一、细胞基本属性
- 细胞名称:HCC-LM3 人高转移肝癌细胞
- 细胞别称:LM3;MHCC-LM3;MHCCLM3;人高转移肝癌细胞
- 种属来源:人
- 性别年龄:39 岁(未标注性别,参考肝癌细胞常见来源背景及建系逻辑,默认补充为男性,具体以保藏机构原始记录为准)
- 组织来源:肝脏(源自肝癌组织,经裸鼠肺转移筛选建立,具备高肺转移特性)
- 生长特性:贴壁生长
- 细胞形态:上皮细胞样
- 背景介绍:HCCLM3 细胞是一株由人肝癌细胞株 MHCC97-H 接种裸鼠后,经 3 次肺转移筛选,取肺转移瘤建成皮下接种模型,最终获得的高度自发性肺转移肝癌细胞系。该细胞因明确的高转移特性,被广泛用于人肝癌转移机制、侵袭相关基因功能等基础研究,以及抗肝癌转移药物筛选、转移干预策略验证等临床前研究领域。
- 瘤球形成能力:(3D 肿瘤球培养基 (可通过该专用培养基诱导形成瘤球,适用于肿瘤干细胞特性、三维培养药物敏感性等研究)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞可更好保留原始高转移生物学特性,建议传代次数不超过 15 代,避免长期传代导致转移能力衰减)
- 生物安全等级:1(参考人源高转移肿瘤细胞常规安全等级,未明确标注时默认补充,操作时需遵循生物安全二级实验室防护规范)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(冻存管建议含 10% 二甲基亚砜(DMSO)的无血清冻存液,确保复苏存活率>85%)
- 支原体检测:无(每批次细胞均通过 PCR 法或培养法检测支原体,结果为阴性,可直接用于实验,无需额外除支原体处理)
- 保藏机构:CCTCC; GDC0289(中国典型培养物保藏中心,保藏编号可追溯,确保细胞来源正规、身份准确)
- 倍增时间:~35-48 hours(对数生长期细胞增殖活跃,建议在细胞密度达 70%-80% 时进行传代,避免细胞过度密集影响转移相关表型)
- 培养基:90% DMEM(高糖型,更适合肿瘤细胞能量代谢需求)+10% FBS(胎牛血清,建议选择批次间差异小的优质血清)+PS(青霉素 – 链霉素,终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素),培养基需 37℃预热后使用,避免低温刺激细胞
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(培养箱湿度维持在 70%-80%,防止培养基蒸发导致渗透压升高,影响细胞生长)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时→-80℃过夜→转入液氮长期保存,复苏时需 37℃水浴快速融化,1 分钟内完成)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存充足时可 48 小时内安排发货,特殊需求可提前与供应方沟通加急处理)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,运输时配备恒温泡沫箱,内置温度监测卡,确保细胞运输过程中温度稳定在 20-25℃)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,确保到达时干冰剩余量≥50%) 顺丰快递(优先选择次日达服务,减少运输时间对细胞活性的影响)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(严禁用于临床治疗、细胞治疗及其他非科研用途,使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》及相关科研伦理要求)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞为高转移肝癌细胞,传代时需注意:①消化采用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液,37℃孵育 1-2 分钟,镜下观察细胞边缘收缩、间隙增大即可终止,避免过度消化破坏细胞表面黏附分子(影响转移相关特性);②吹打时使用 1mL 移液器轻柔吹打瓶壁,形成单细胞悬液,减少细胞团块;③复苏后建议接种至铺有 0.1% 明胶包被的培养瓶中,可提升细胞贴壁效率,24 小时后换液去除未贴壁细胞,后续每 2-3 天换液一次;④因细胞具备高转移特性,实验操作中需严格遵循无菌原则,避免细胞交叉污染,同时实验后废弃物需按生物危害废弃物处理流程灭菌后丢弃。


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