一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

核心培养注意事项

1. 优先使用 100% 空气气相的专用培养箱；
2. 无专用培养箱时，可采用带不透气密封盖的 T25 培养瓶，培养期间每天需将细胞取出培养箱，打开瓶盖换气 1-2 次，确保细胞获得充足氧气，避免代谢废物堆积。

背景与筛选验证

• 背景介绍：
  1. 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶（FLUC），性状稳定，可作为荧光素酶活性检测的阳性对照，也适用于活体动物成像实验。
  2. 通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 SW480 细胞源自原位直肠腺癌，与 SW620 细胞（同一病人一年后淋巴结转移灶来源）为同源细胞系，具备典型结肠腺癌细胞特征。
  3. 该细胞有明确基因与蛋白表达特征：p53 基因存在 273 位、309 位密码子突变且蛋白表达水平提高；癌基因 c-myc、K-ras 等呈阳性表达，不表达肿瘤入侵相关金属蛋白酶（细胞溶解酶），可表达 GM-CSF；ras 原癌基因 12 位密码子突变，可作为 PCR 检测该突变的阳性对照，适用于结肠癌基因机制、转移相关研究。
• puro 药筛浓度：SW480 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持，可有效去除未转染细胞，保障 Luc 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长及特有的基因表达模式。

细胞培养核心信息

• 生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。
• 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、荧光素酶活性及结肠癌基因相关实验结果，保障数据准确性）。
• 保藏机构：ATCC; CCL-228、DSMZ; ACC-313、ECACC; 87092801（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与基因特性可靠性）。
• 培养基：L-15 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+ PS（青霉素 – 链霉素双抗）+ 0.5μg/ml puro（专用 L-15 培养基适配无 CO₂培养环境，满足细胞营养需求，同时维持 Luc 基因稳定与细胞特有生物学特性）。
• 培养条件：气相 100% 空气，温度 37℃（严格规避 CO₂，防止细胞代谢紊乱或凋亡）。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前需确保细胞处于对数生长期，保留其基因与荧光表达稳定性，保障复苏后活性）。
• 细胞货期：现货，1 周左右。
• 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递。
• 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。