一、细胞基本属性
- 细胞名称：Huh-7.5.1 人肝癌细胞（为 HuH-7 细胞的衍生株，经筛选获得，具备更适合病毒感染研究的特性，是肝癌及病毒相关研究的常用模型）
- 细胞别称：Huh 7.5.1; Huh7.5.1; 人肝癌细胞（别称简洁，可通过 “7.5.1” 后缀与亲本 HuH-7 细胞快速区分，便于实验记录及文献检索）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；57 岁（明确的年龄性别信息，相较于亲本 HuH-7 细胞更详细，为年龄相关肝癌发病机制研究、性别差异对药物敏感性影响等实验提供背景支撑）
- 组织来源：肝脏（源自肝癌组织，继承亲本 HuH-7 细胞的肝细胞肝癌特性，同时因筛选过程获得独特表型，适用于特定研究场景）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力与亲本 HuH-7 细胞相近，对数生长期细胞贴壁紧密，传代时需控制消化时间，避免过度损伤细胞表面结构）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列呈铺路石样，胞质均匀，核仁明显，形态与亲本 HuH-7 细胞无显著差异，可通过形态观察初步判断细胞生长状态及纯度）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留衍生株的独特生物学特性，如病毒易感性、蛋白表达模式等，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移）
- 背景介绍：Huh-7.5.1 细胞是 HuH-7 人肝癌细胞的重要衍生株，核心特性及应用如下：①衍生背景：通过对 HuH-7 细胞进行体外筛选获得，相较于亲本细胞，其缺陷性表达视黄醇 X 受体 α（RXRα）或存在其他基因表达差异，导致对丙型肝炎病毒（HCV）等病毒的感染效率显著提高，是 HCV 体外复制、病毒生命周期及抗 HCV 药物筛选的经典模型；②功能保留：继承亲本细胞的肝细胞功能，可分泌甲胎蛋白（AFP）、白蛋白等肝特异性蛋白，同时保留对肝癌治疗药物的敏感性，适用于肝癌发病机制、药物 efficacy 评估等基础及应用研究；③应用场景：除常规肝癌研究外，因病毒易感性优势，广泛用于 HCV、HBV 等病毒与肝癌相互作用研究，如病毒诱导肝癌发生机制、病毒抑制剂筛选等，同时也可用于基因编辑、信号通路调控等分子生物学实验。
- 生物安全等级：1（参考人源肝细胞肝癌细胞及衍生株常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，若涉及病毒感染实验，需根据病毒类别提升防护等级）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后病毒易感性等特性保持稳定，确保实验起始条件一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法或培养法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型，结果为阴性，可直接用于实验，无需额外除支原体处理，避免影响细胞生长及病毒相关实验结果）
- 保藏机构：CCTCC; GDC0137（中国典型培养物保藏中心专属保藏编号，细胞来源可追溯，基因型及生物学特性经过严格验证，确保细胞身份准确、质量可靠，适合长期实验及结果重复）
- 培养基：90% DMEM (含 NaHCO₃ 1.5g/L)+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素），关键配方说明：①DMEM 培养基含特定浓度 NaHCO₃（1.5g/L），可维持培养基在 5% CO₂环境下的 pH 稳定（约 7.2-7.4），避免 pH 波动影响细胞生长及病毒感染效率；②10% FBS 建议选择无病毒污染、批次间差异小的优质胎牛血清，防止外源因子干扰实验；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞及病毒活性。培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞。
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；避免频繁开关培养箱，维持气相及温度稳定，保障细胞生长一致性，尤其对病毒感染实验的重复性至关重要）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①取对数生长期细胞，用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化后离心收集；②用预冷的无血清冻存液重悬细胞，调整浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；③分装至冻存管，4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议使用程序降温盒，减少低温损伤）→-80℃过夜→转入液氮长期保存。复苏时需 37℃水浴快速融化，1 分钟内完全溶解，离心去除冻存液，用新鲜培养基重悬，降低 DMSO 对细胞的毒性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过活性检测及特性验证，下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急复苏、额外检测病毒易感性等，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，运输时采用恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，保障复苏存活率） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及特性变化风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；若用于病毒相关实验，需遵守《病原微生物实验室生物安全管理条例》，实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）或专用消毒剂处理后丢弃）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞为 HuH-7 衍生株，实验操作及结果解读需注意：①传代操作：采用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液，37℃孵育 2-3 分钟，镜下观察细胞间隙增大、形态变圆即可终止消化，用含血清培养基中和胰酶，轻柔吹打瓶壁，避免用力过猛导致细胞破碎；若用于病毒感染实验，传代后建议 24 小时内进行感染操作，此时细胞状态最佳，感染效率最高；②培养基使用：严格遵循 “含 NaHCO₃ 1.5g/L 的 DMEM” 配方，不可随意更换为普通 DMEM 培养基，防止 pH 调节异常影响细胞生长；配制后建议检测培养基 pH 值，确保在 7.2-7.4 范围内；③病毒实验注意事项：开展 HCV 等病毒实验时，可利用其高易感性优势，但需设置亲本 HuH-7 细胞作为对照，排除衍生株特性对实验结果的干扰；同时需在相应生物安全等级实验室操作，做好个人防护及环境消毒；④特性验证：定期通过 Western Blot 检测病毒感染相关蛋白（如 HCV 核心蛋白）或 PCR 检测病毒 RNA，验证细胞病毒易感性的稳定性；若用于药物筛选，需设置阳性对照（如已知抗病毒药物），确保实验体系有效性；⑤污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，使用带滤芯吸头，避免气溶胶污染；定期对培养箱、移液器等设备进行消毒，防止细胞交叉污染或微生物污染，确保实验结果可靠。
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