细胞名称：HCT116-GFP-puro 人结肠癌细胞 (GFP 标记)

细胞别称：HCT116-CGFP；人结肠腺癌细胞 – 绿色荧光蛋白标记；人结肠腺癌细胞 – CGFP

种属来源：人

组织来源：结肠

生长特性：贴壁生长

细胞形态：上皮细胞样

细胞代数：p3-p8（极低传代范围，能最大程度维持绿色荧光蛋白（GFP）表达稳定性及结肠癌细胞特有的致瘤与克隆形成特性）

背景介绍：

HCT 116 细胞稳定表达绿色荧光蛋白（GFP），性状稳定，培养时无需抗生素常规维持，可作为绿色荧光蛋白活性检测的阳性对照，也适用于结肠癌体内成像实验（如裸鼠成瘤后的荧光追踪）。

该细胞通过慢病毒转染携带 CGFP 基因，亲本 HCT 116 细胞具备明确病理与功能特征：1979 年由 M・Brattain 等人从男性结肠癌患者中分离，在半固体琼脂糖培养基中可形成克隆，在无胸腺裸鼠中具有致瘤性并能形成肿瘤结节，是研究结肠癌发病机制、药物筛选的经典细胞株。

puro 药筛浓度：

HCT116-CGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 GFP 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、克隆形成及致瘤特性。

生物安全等级：1 级，操作风险低，符合常规实验室生物安全管理要求，无需特殊防护。

细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装。

支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、GFP 表达及结肠癌相关实验结果，保障数据准确性）。

保藏机构：ATCC; CCL-247、BCRC; 60349、BCRJ; 0288、DSMZ; ACC-581（细胞来源可追溯，确保细胞株稳定性与结肠癌特性可靠性）。

培养基：McCoy’s 5a 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+1.0μg/ml puro（专用 McCoy’s 5a 培养基适配结肠癌细胞生长需求，按标注浓度添加 puro 以维持 GFP 基因稳定）。

培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；培养时避免强光直射，减少 GFP 光漂白）。

冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞消化充分且处于对数生长期，保留其克隆形成能力与 GFP 表达稳定，可适当提高冻存密度，减少复苏损伤）。

细胞货期：现货，1 周左右。

运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递。

供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。

特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主。