NCI-N87-FLUC-eGFP-puro人胃癌细胞(FLUC/eGFP双标)

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NCI-N87-FLUC-eGFP-puro人胃癌细胞(FLUC/eGFP双标)

原价为:¥6,000.00。当前价格为:¥5,000.00。

类别:

一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)

细胞名称:NCI-N87-FLUC-eGFP-puro 人胃癌细胞 (FLUC/eGFP 双标)

细胞别称:NCI-N87-EGFP-LUC;人胃癌细胞 – 绿色荧光蛋白 – 荧光素酶标记;NCI-N87 – 绿色荧光蛋白 – 荧光素酶标记

种属来源:人

组织来源:胃

生长特性:贴壁生长

形态特征:上皮细胞样

细胞代数:未明确标注,建议优先选择低传代细胞(如 p3-p10),以维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及胃癌细胞特有的分子与功能特征

特别注意:NCI-N87-LUC-EGFP 细胞培养过程中会长空泡,属于正常现象,无需特殊处理,避免误判为细胞污染或状态异常。

背景与筛选验证

背景介绍:

NCI-N87-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶(FLUC)与增强型绿色荧光蛋白(eGFP),性状稳定,培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照,也适用于胃癌体内成像实验(如胃原位成瘤、转移追踪的双荧光观测)。

该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 NCI-N87 细胞具备明确分子特征:表达癌胚抗原(CEA)、TAG 72 及蕈毒碱胆碱受体,无左旋多巴胺脱羧酶(DDC)活性,VIP 受体活性极低且缺乏胃泌激素受体;植板率约 4.3%,不表达 N-myc、L-myc 等基因,是研究胃癌分子机制、药物筛选的专用细胞株。

puro 药筛浓度:

NCI-N87 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 0.5μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.2μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达,同时避免高浓度药物对细胞活性、空泡形成等正常特性的影响。

细胞培养核心信息

生物安全等级:未明确标注,参考同类人胃癌细胞标准,建议按 1 级生物安全防护操作(常规实验室环境,操作时佩戴手套、口罩,避免细胞污染或培养液接触皮肤),具体可参照随货产品说明书补充确认。

产品规格:1×10⁶cells/T25 细胞培养瓶。

支原体检测:未明确标注,可通过随货质检报告或供应商确认,建议培养前自行检测,避免支原体污染影响双荧光表达及实验结果。

保藏机构:ATCC; CRL-5822;中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(细胞来源可追溯,确保细胞株分子特征与双荧光特性稳定)。

培养基:90% RPMI-1640 培养基 + 10% FBS(胎牛血清);若需维持双荧光基因稳定,可按建议添加 0.2μg/ml puro(适配贴壁生长的人胃癌细胞营养需求,不影响细胞空泡正常形成)。

培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整;避免强光直射,减少 eGFP 光漂白,影响双荧光观测)。

传代方法:按 1:2 至 1:3 比例传代,每周 3 次;传代时动作轻柔,控制消化时间,避免过度消化损伤细胞,保障传代后细胞贴壁效率与双荧光表达稳定。

冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存前确保细胞处于对数生长期,保留双荧光特性与空泡形成能力;可适当提高冻存密度,减少复苏损伤,复苏后需观察空泡形成情况以判断细胞状态)。

产品货期:现货,1 周左右。

运输方式:T25 培养瓶包装,顺丰快递(包邮);运输过程需尽量减少颠簸,降低细胞脱落概率,收到后优先观察细胞空泡与双荧光表达情况。

供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(重复标注,需严格遵守)。

特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主,且需注意区分细胞空泡与异常状态。

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