一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：4T1-GFP-puro 小鼠乳腺癌细胞 (GFP 标记)
种属来源：小鼠
组织来源：乳房
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持绿色荧光蛋白（GFP）表达稳定性及小鼠乳腺癌细胞特有的生物学特征）
生物安全等级：未明确标注，参考同类小鼠肿瘤细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持，保障 GFP 基因稳定表达的同时不影响细胞生长
背景与筛选验证
背景介绍
4T1-GFP-puro 细胞稳定表达绿色荧光蛋白（GFP），性状稳定，可用作 GFP 荧光检测的阳性对照，也适用于小鼠乳腺癌体内成像实验（如裸鼠皮下成瘤、肺转移模型的荧光追踪）。
该细胞保留小鼠乳腺癌细胞核心特性，尤其是模拟人类三阴性乳腺癌的转移能力，是研究乳腺癌转移机制、抗肿瘤药物筛选（如抗转移药物评估）的经典细胞株。
puro 药筛浓度说明
- 筛选阶段：puro 浓度为 1.0μg/ml，可高效清除未转染的非荧光细胞，确保细胞群体中 GFP 阳性细胞纯度；
- 维持阶段：puro 浓度降至 0.5μg/ml，既能稳定细胞的药物抗性与 GFP 表达，又可避免高浓度药物对细胞贴壁能力、增殖活性的抑制。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、GFP 荧光表达及乳腺癌相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与小鼠乳腺癌属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方
90% RPMI-1640 培养基（简称 “1640”）+10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml），适配贴壁生长的小鼠乳腺癌细胞营养需求，无需额外添加特殊因子。
2. 培养条件
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
- 操作注意事项：避免强光直射培养瓶，减少 GFP 光漂白，保障荧光观测效果；操作时动作轻柔，避免频繁移动影响细胞贴壁；待细胞密度达 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致形态异常。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 GFP 荧光活性；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后存入液氮；复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 GFP 荧光强度，确认细胞功能正常。
货期与发货
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展实验时，可利用 GFP 的荧光特性，通过荧光显微镜直接观察细胞迁移、侵袭过程，或通过活体成像仪动态监测体内肿瘤生长与转移，提升实验直观性与效率。
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