一、细胞基本属性
- 细胞名称：SNU-449 人肝癌细胞
- 细胞别称：SNU-449；SNU449；人肝癌细胞
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；52 岁（明确的中年男性背景，为年龄相关肝癌代谢特征、药物敏感性差异等研究提供匹配模型）
- 组织来源：肝脏（源自肝癌组织，具备肝细胞肝癌典型的上皮细胞样形态及恶性表型，是肝癌基础研究及药物筛选的常用细胞株）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞排列紧密，传代时需控制消化时间，避免过度损伤细胞表面结构）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，胞质丰富，核仁清晰，排列呈铺路石样，可通过形态观察初步判断细胞生长状态及纯度）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留肝癌细胞原始基因型及生物学特性，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如药物敏感性下降、蛋白表达改变等）
- STR 位点：Amelogenin：X,Y（与男性性别匹配，可快速验证细胞性别一致性，排除交叉污染）;CSF1PO：11;D1S1656：15,17;D2S441：12;D2S1338：19;D3S1358：15,16;D5S818：10;D7S820：8,13;D8S1179：10,13;D10S1248：12,15;D12S391：17,18;D13S317：9;D16S539：9;D18S51：14,16;D19S433：15.2,17.2;D21S11：29,31;D22S1045：17;FGA：22,24;Penta D：10,11;Penta E：10,15;TH01：6,9;TPOX：11;vWA：14,16（STR 位点覆盖全面，含多个特异性位点（如 D19S433：15.2,17.2），可通过图谱与保藏机构数据比对，确认细胞身份准确性，保障实验可靠性）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，确保实验起始细胞活性一致，减少批次差异）
- 保藏机构：ATCC; CRL-2234，KCLB; 00449（国际权威保藏机构双重保藏，细胞来源可追溯，基因型及生物学特性经过严格验证，适合长期实验及结果重复验证，尤其适用于需多中心协作或文献结果复现的研究）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型（如肺炎支原体、精氨酸支原体等），结果为阴性，可直接用于实验，无需额外进行除支原体处理，避免影响细胞生长及实验结果）
- 培养基：90%1640（RPMI-1640 培养基）+10% FBS（胎牛血清）+1% PS（青霉素 – 链霉素），配方说明：①RPMI-1640 培养基含多种氨基酸及维生素，适配肝癌细胞营养需求；②建议选择批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清质量波动导致细胞生长状态不稳定；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防革兰氏阳性菌及阴性菌污染，不影响细胞正常代谢。培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞产生应激反应。
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换培养箱内水盘，防止培养基蒸发过快导致渗透压升高，影响细胞生长；避免频繁开关培养箱，维持气相及温度稳定，确保细胞生长环境一致性）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①取对数生长期细胞，用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液 37℃孵育 2-3 分钟，镜下观察细胞间隙增大、形态变圆时终止消化；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整细胞浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；③分装至冻存管，4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议使用程序降温盒，减少低温损伤）→-80℃过夜→转入液氮长期保存。复苏时需 37℃水浴快速融化，1 分钟内完全溶解，离心去除冻存液，用新鲜培养基重悬，降低 DMSO 对细胞的毒性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过活性检测及无菌验证，下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急复苏、额外检测细胞活力等，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，运输时采用恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，保障复苏存活率） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求，实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）后处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需注意：①传代操作：因细胞为上皮细胞样贴壁生长，消化时避免过度延长时间，防止细胞破碎；吹打时使用 1mL 移液器轻柔吹打瓶壁，形成单细胞悬液，减少细胞团块，避免影响后续实验（如流式细胞术、转染等）；②培养基更换：常规培养时每 2-3 天更换一次新鲜培养基，若细胞密度较低（＜30%），可适当延长换液间隔至 4 天，避免营养浪费；③实验应用：该细胞可用于肝癌发病机制（如信号通路异常、基因突变影响）、抗肝癌药物筛选（如化疗药物、靶向药物 efficacy 评估）、病毒感染（如 HBV、HCV）相关研究等，实验设计中建议结合其男性中年来源特性，选择匹配的对照模型；④污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，定期对培养箱、移液器、耗材等进行无菌检测，避免细胞交叉污染或微生物污染，确保实验结果可靠。
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