一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：SKOV3-GFP-FLUC-puro 人卵巢癌细胞 (GFP/FLUC 双标记)
种属来源：人
组织来源：卵巢
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 2.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 1.0μg/ml puro 维持，保障 GFP 与 FLUC 基因稳定表达
细胞代数：10 代以内（低传代，更好维持双标记活性及卵巢癌细胞生物学特性）
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、双标记活性及卵巢癌相关实验结果，保障数据准确性）
背景与筛选验证
背景介绍
SKOV3-GFP-FLUC-puro 细胞稳定表达绿色荧光蛋白（GFP）与荧光素酶（FLUC）双标记，GFP 可直观观察细胞形态与分布，FLUC 可通过活体成像量化追踪，性状稳定。该细胞保留 SKOV3 细胞核心特性（典型人卵巢癌细胞特征），适用于卵巢癌体内外多维度实验，是研究卵巢癌发病机制、抗肿瘤药物筛选（如抗腹腔转移、靶向治疗效果评估）的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与人卵巢癌细胞属性可靠。
培养与冻存
培养基配方：90% McCoy’s 5A 培养基 + 10% FBS（胎牛血清） + 双抗（青霉素 – 链霉素）；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 2.0μg/ml，维持 1.0μg/ml），适配贴壁生长的卵巢癌细胞营养需求，无需额外添加特殊因子。
培养条件：
气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整，需确保培养箱温度、湿度稳定）；
操作注意事项：
- 传代时用胰酶温和消化贴壁细胞，待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后，立即加含 1.0μg/ml puro 的培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；
- 定期观察细胞密度，待密度达 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致 GFP/FLUC 活性下降或细胞凋亡；
- GFP 对光敏感，需避免长时间强光直射培养瓶，减少荧光信号淬灭；FLUC 对光稳定性较好，但仍建议同步做好避光防护；
- 换液时需使用新鲜配置的含 1.0μg/ml puro 的培养基，确保 puro 浓度稳定，维持细胞抗性与双标记表达。
冻存条件：
冻存液：无血清冻存液；
操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 GFP/FLUC 活性与卵巢癌细胞特性；胰酶消化收集细胞后，用含 1.0μg/ml puro 的培养基清洗 1 次，再用冻存液重悬，调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存）；复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化，离心后用含 1.0μg/ml puro 的新鲜培养基重悬，避免冻存液残留对细胞的毒性影响，复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 GFP 荧光强度，后续可通过 Luciferase 检测确认 FLUC 活性。
货期与运输
细胞货期：现货，1 周左右；
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；
运输复苏细胞时，需使用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率；同时做好避光防护，避免运输过程中 GFP 信号损耗，保障接收后细胞活性与双标记稳定性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展卵巢癌相关实验时，可结合其易腹腔转移的特性设计转移模型，利用 GFP（体外观察）与 FLUC（体内追踪）双标记优势，多维度监测肿瘤生长与转移过程，精准评估药物干预效果，提升实验数据的全面性与临床相关性。
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