一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:5637-FLUC-puro 人膀胱癌细胞 (FLUC 标记,FLUC 为荧光素酶,可用于荧光成像追踪)
种属来源:人
组织来源:膀胱
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:10 代以内(低传代,更好维持荧光素酶(FLUC)活性及膀胱癌细胞生物学特性)
注意事项(puro 药筛浓度):该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 2.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 1.0μg/ml puro 维持,保障 FLUC 基因稳定表达
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装
支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、FLUC 活性及膀胱癌相关实验结果,保障数据准确性)
细胞到货处理建议:稳转细胞株一般交付混合克隆细胞系,需通过抗性药物维持或筛选,否则稳转效率会降低;建议收到细胞后先传代建库,确保后续实验有充足、稳定的细胞来源
背景介绍
5637-FLUC-puro 细胞是在 5637 人膀胱癌细胞基础上稳定表达荧光素酶(FLUC)构建而成,性状稳定,FLUC 信号清晰易量化。该细胞保留 5637 细胞核心特性(典型人膀胱癌细胞特征),适用于膀胱癌体内外实验,如体外药物敏感性检测、体内皮下成瘤 / 肺转移模型的荧光追踪,是研究膀胱癌发病机制、抗肿瘤药物筛选(如抗增殖、抗转移药物评估)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
保藏机构:未明确标注,可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息,确保细胞株稳定性、FLUC 表达特性及人膀胱癌细胞属性可靠。
培养与冻存
培养基配方
90% RPMI-1640 培养基 + 10% FBS(胎牛血清) + PS(青霉素 – 链霉素双抗);药筛或维持 FLUC 稳定表达时,需额外添加对应浓度 puro(药筛 2.0μg/ml,维持 1.0μg/ml),适配贴壁生长的膀胱癌细胞营养需求,无需额外添加特殊因子。
培养条件
气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整,需确保培养箱温度、湿度稳定,避免环境波动影响 FLUC 活性);
操作注意事项
- 传代操作:用胰酶温和消化贴壁细胞,待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后,立即加含 1.0μg/ml puro 的培养基终止消化,避免过度消化损伤细胞;
- 密度控制:定期观察细胞密度,待密度达 70%-80% 时及时传代,防止过度密集导致 FLUC 活性下降或细胞凋亡;
- 建库操作:按 “到货处理建议”,收到细胞后优先传代建库(如分为 3-5 支冻存管),冻存前需确认 FLUC 活性正常,保障后续实验细胞供应稳定;
- FLUC 防护:FLUC 对光稳定性较好,但仍建议避免长时间强光直射培养瓶,减少潜在荧光信号损耗。
冻存与复苏
- 冻存液:无血清冻存液;
- 冻存要点:冻存前确保细胞处于对数生长期(FLUC 表达稳定),胰酶消化收集细胞后,用含 1.0μg/ml puro 的培养基清洗 1 次,再用冻存液重悬,调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml;梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存),避免降温过快损伤细胞;
- 复苏要点:从液氮取出冻存管后,立即放入 37℃水浴融化(约 1-2 分钟),1000rpm 离心 5 分钟弃冻存液,用含 1.0μg/ml puro 的新鲜培养基重悬;复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态,后续可通过荧光检测确认 FLUC 活性是否正常。
货期与运输
细胞货期:现货,1 周左右;
运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;
运输注意事项:复苏细胞运输时用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率;冻存发货需确保干冰量充足,维持细胞冻存状态,保障接收后细胞活性与 FLUC 表达特性。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展膀胱癌相关实验时,可结合其易转移的特性设计肺转移模型,利用 FLUC 荧光信号动态监测肿瘤生长与转移过程,精准评估药物干预效果,提升实验数据的临床相关性;同时需严格遵循 “到货建库” 建议,避免因细胞稳转效率下降影响实验重复性。


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