一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：22RV1-NLUC-puro 人前列腺癌细胞 (NLUC 标记，NLUC 为纳米荧光素酶，具有高灵敏度、低背景信号优势)
种属来源：人
年龄性别：男
组织来源：前列腺
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
特别注意：细胞贴壁和生长速度较慢，传代或消化处理后，48h 内不要移动培养瓶，避免干扰细胞贴壁过程，导致贴壁率下降
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 NLUC 基因稳定表达
细胞代数：10 代以内（低传代，更好维持纳米荧光素酶（NLUC）活性及前列腺癌细胞生物学特性）
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞缓慢增殖、NLUC 活性及前列腺癌相关实验结果，保障数据准确性）
背景介绍
22RV1-NLUC-puro 细胞是在 22RV1 人前列腺癌细胞基础上稳定表达纳米荧光素酶（NLUC）构建而成，性状稳定。22RV1 细胞保留前列腺癌细胞的激素敏感性与典型生物学特征，叠加 NLUC 标记后，可通过高灵敏度荧光信号追踪肿瘤动态，适用于前列腺癌体内外实验，如体外药物敏感性筛选（尤其激素相关药物）、体内皮下成瘤 / 骨转移模型的活体成像，是研究前列腺癌发病机制、抗肿瘤药物评估的专用细胞株。
验证核心
- NLUC 活性：通过检测报告确认荧光信号稳定且可量化，满足体内外成像对信号灵敏度与稳定性的需求；
- 贴壁特性：验证细胞虽贴壁慢，但在 “48h 不移动” 条件下可正常贴壁生长，维持上皮细胞样形态，保障后续实验细胞状态一致性。
基础参数
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性、NLUC 表达特性及人前列腺癌细胞属性可靠。
培养与冻存
培养基配方
90% DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清） + PS（青霉素 – 链霉素双抗）；药筛或维持 NLUC 稳定表达时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml），适配贴壁生长的前列腺癌细胞营养需求，无需额外添加特殊因子。
培养条件
气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，需确保培养箱温度、湿度稳定，避免环境波动进一步延缓细胞贴壁与生长）；
操作注意事项（针对 “慢贴壁、慢生长” 特性）
- 传代操作：
- 消化控制：细胞贴壁较牢固，胰酶消化时间需适当延长（约 3-4 分钟），待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后，立即加含 0.5μg/ml puro 的培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；
- 传代密度：因生长慢，传代时需适当提高接种密度（建议 1×10⁵cells/cm²），缩短细胞增殖至可实验密度的时间；
- 严格避光移动：传代后立即放入培养箱，48h 内严禁移动培养瓶，观察时仅短暂取出快速查看，减少环境变化对贴壁的影响。
- 换液频率：因生长慢，营养消耗较慢，每 3-4 天更换一次新鲜培养基即可，避免频繁换液干扰细胞生长；换液时轻柔操作，沿培养瓶壁缓慢加入培养基，减少对贴壁细胞的冲击。
- NLUC 保护：NLUC 对光稳定性较好，但仍建议避免长时间强光直射培养瓶，观察荧光时缩短暴露时间，减少荧光信号淬灭。
冻存与复苏
- 冻存液：无血清冻存液；
- 冻存要点：选择对数生长期细胞（贴壁状态良好、NLUC 活性稳定），胰酶消化收集后，用含 0.5μg/ml puro 的培养基清洗 1 次，再用冻存液重悬，调整细胞密度至 2×10⁶-3×10⁶cells/ml（因复苏后贴壁慢，需提高冻存密度保障复苏后细胞量）；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存），避免降温过快损伤细胞；
- 复苏要点：从液氮取出冻存管后，立即放入 37℃水浴融化（约 1-2 分钟，避免反复冻融）；1000rpm 离心 5 分钟弃冻存液，用含 0.5μg/ml puro 的新鲜培养基重悬；复苏后快速放入培养箱，48h 内不移动，72h 后观察细胞贴壁情况与上皮细胞样形态，后续通过 Luciferase 检测确认 NLUC 活性。
货期与运输
细胞货期：现货，1 周左右；
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；
运输注意事项：复苏发货时，使用防震包装减少颠簸，最大程度降低运输过程中对已贴壁细胞的影响；冻存发货需确保干冰量充足，维持细胞冻存状态，保障接收后细胞活性与 NLUC 表达稳定。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展前列腺癌相关实验时，需充分预留细胞贴壁与生长时间（如传代后 7-10 天达到实验所需密度），避免因时间不足导致实验中断；利用 NLUC 高灵敏度特性，可构建骨转移模型，通过活体成像动态监测肿瘤生长与药物干预效果，提升实验数据的临床相关性。
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