一、细胞基本属性
- 细胞名称：ACHN 人肾细胞腺癌细胞（STR 鉴定正确）
- 细胞别称：ACHN；人肾细胞腺癌细胞（别称简洁，“ACHN” 为核心标识，与 A-704、A498、786-O 的 “字母 + 数字 / 纯字母” 别称体系保持一致，便于肾脏肿瘤细胞株的分类检索与管理）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；22 岁（明确的年轻男性背景，与 A-704 的高龄男性（78 岁）、786-O 的中年男性（58 岁）、A498 的中年女性（52 岁）形成完整的年龄梯度，填补年轻群体肾癌研究模型的空白，为肾癌发病年龄相关性机制、年轻患者药物敏感性差异实验提供关键模型）
- 组织来源：肾细胞腺癌，胸水转移灶（明确标注为转移灶来源，区别于 A-704、A498 等原发灶来源肾癌细胞，具备肿瘤转移相关生物学特性，是研究肾癌转移机制（如胸水转移路径、转移相关基因功能）、抗转移药物筛选的理想模型）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖活跃，传代时易分散为单细胞悬液，操作便捷性与其他肾癌细胞株相近，可快速融入现有肾脏肿瘤细胞培养体系）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈典型上皮细胞形态，具备肾细胞腺癌细胞的共性形态特征，可通过形态观察初步判断细胞纯度及生长状态，与 A-704 的 “典型上皮细胞形态”、A498 的 “多边形” 形成形态参照，丰富肾脏肿瘤转移灶细胞形态学数据库）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留肾细胞腺癌细胞转移灶的原始生物学特性，如干扰素敏感性、致瘤性等，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如干扰素抗增殖效应减弱、转移相关表型丢失）
- 背景介绍：ACHN 细胞于 1979 年建系，源自一名 22 岁患有肾细胞腺癌的白人男性的胸腔积液，核心特性及应用如下：①独特来源与功能：作为胸水转移灶来源细胞，保留肾癌转移过程中的关键生物学特征，如细胞侵袭、迁移能力；对干扰素敏感，干扰素可显著抑制其生长，是研究干扰素及其诱导剂抗肾癌增殖机制、筛选干扰素协同增效药物的专属模型；②生长与致瘤特性：倍增时间短（~28-36 小时），增殖速度快，且在裸鼠中具有高成瘤率（100% 频率），成瘤周期短（21 天内），适合开展快速体内药物 efficacy 评估；③应用场景：广泛用于肾癌转移机制研究（依托转移灶来源特性）、干扰素相关抗肾癌研究（基于干扰素敏感性）、体内外快速药物筛选（凭借短倍增时间与高成瘤率），同时可与 A-704（原发灶、体内不成瘤）、786-O（原发灶、体内成瘤）组成 “原发灶 + 转移灶”“干扰素敏感 + 常规” 的多元化肾脏肿瘤细胞实验体系，拓展肾癌转移与药物研究维度。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（此处需注意：性别标注为男性，但 Amelogenin 位点显示为 X，推测为原文标注误差或位点检测特殊情况，建议实验前通过染色体核型分析或重新 STR 鉴定确认性别，避免对实验结果产生干扰）；CSF1PO：11；D13S317：12；D16S539：12，13；D18S51：16；D19S433：14，15；D21S11：30；D2S1338：17；D3S1358：17；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：12；FGA：22；TH01：8；TPOX：8，11；vWA：16，17；（STR 位点含多个特异性位点（如 D21S11：30、D3S1358：17），可通过图谱与保藏机构（如 ATCC CRL-1611）数据比对，确认细胞身份准确性，同时可与 A-704、A498 等肾癌细胞的 STR 图谱清晰区分，避免细胞混淆）
- 生物安全等级：1（参考人源肾细胞腺癌细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，与 A-704、A498、786-O 安全操作要求一致，便于实验室统一管理及多细胞株并行实验）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后干扰素敏感性、致瘤性无显著改变，确保实验起始条件一致）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型，结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染影响细胞生长、干扰素作用效果及致瘤性实验结果）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1611，ECACC; 88100508；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际权威机构（ATCC、ECACC）与国内机构双重保藏，细胞来源可追溯性强，基因型及生物学特性经过多重验证，与 A-704（建议补充保藏）、A498 的保藏机构体系互补，便于多细胞株实验的溯源管理）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素），配方说明：①培养基适配性：采用 DMEM 培养基，与 A-704 的 DMEM 配方一致，区别于 A498 的 MEM、786-O 的 RPMI-1640，其高糖配方（含 4.5g/L 葡萄糖）可满足该细胞快速增殖及干扰素处理后的能量需求；②10% FBS 建议选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中干扰素样物质干扰实验结果；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞代谢及干扰素作用过程。培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞。
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高，与 A-704、A498、786-O 培养条件完全一致，确保多细胞株实验环境的统一性，减少环境因素对实验结果的干扰）
- 倍增时间：~28-36 hours（增殖速度快于 A-704（未明确，推测较慢）、A498（60 小时）、769-P（35 小时），与 786-O（24-45 小时）相近，对数生长期为接种后 1-2 天，需根据该特性及时传代（建议 2-3 天传代一次），避免细胞过度密集影响干扰素处理效果；实验设计中可利用短倍增时间优势，开展快速药物筛选实验（如 48 小时药物活性检测））
- 致瘤性：Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).（致瘤性明确且高效：①高成瘤率（100%）与短成瘤周期（21 天内），适合快速构建体内肿瘤模型，缩短实验周期；②明确的接种条件（1×10^7 cells / 只，皮下接种），可直接参考开展实验，减少预实验成本；与 A-704（体内不成瘤）形成鲜明对比，可用于研究肿瘤转移灶与原发灶在体内成瘤能力上的差异机制）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程与其他肾癌细胞株一致：①对数生长期细胞消化离心，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；②分装后 4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议用程序降温盒，减少低温损伤）→-80℃过夜→转入液氮长期保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟内完全融化，离心去除冻存液，用预热的 DMEM 培养基重悬，避免 DMSO 对细胞的毒性影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过活性检测及干扰素敏感性预实验验证，确保核心特性达标，下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急提供干扰素抑制率检测报告，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用恒温泡沫箱内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，因增殖速度快，24 小时后即可观察细胞贴壁情况）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，保障复苏存活率） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及干扰素敏感性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求，与其他肾癌细胞株供应限制条款一致，便于实验室合规管理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①干扰素相关实验优化：作为干扰素研究专属模型，实验时需设置梯度干扰素浓度（如 0、10、50、100、500IU/mL），处理时间建议为 48-72 小时（结合 28-36 小时倍增时间），通过 CCK-8 或 MTT 法检测细胞活力，计算抑制率；同时设置无干扰素的空白对照及已知干扰素敏感细胞（如 HeLa）作为阳性对照，确保实验体系有效性；②转移相关实验操作：依托胸水转移灶来源特性，可开展 Transwell 侵袭 / 迁移实验，接种细胞密度建议为 5×10⁴cells / 孔（Transwell 小室），培养 24-36 小时后计数穿膜细胞，评估细胞转移能力；实验中可与 A-704（原发灶）对比，分析转移灶与原发灶在侵袭能力上的差异；③致瘤性实验设计：开展裸鼠成瘤实验时，严格参照推荐接种条件（1×10^7 cells / 只，皮下接种），选择 6-8 周龄裸鼠，接种后每周测量肿瘤体积（长 × 宽 ²/2），21 天内即可观察到明显肿瘤，适合快速评估药物体内抗瘤效果；④STR 性别位点差异处理：因 Amelogenin 位点（X）与性别标注（男）存在矛盾，建议复苏后通过染色体核型分析（如 G 带染色）或 Amelogenin 基因单独 PCR 验证，确认细胞实际性别，避免因性别误差影响实验设计（如性别相关药物代谢研究）；⑤培养与传代注意事项：因增殖速度快，需每天镜检细胞密度，待密度达 70%-80% 时立即传代；消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1-2 分钟（短于 A498、A-704），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎，防止影响后续转移实验或转染效率；⑥污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，干扰素实验中使用的试剂、耗材需无菌处理，避免交叉污染；定期对 DMEM 培养基、培养箱进行无菌检测，确保实验环境洁净，保障实验结果可靠。
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