一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:KELLY 人神经母细胞瘤细胞
细胞别称:Kelly; NB19; NB-19; NB19-RIKEN
种属来源:人
组织来源:脑(神经母细胞瘤来源)
背景介绍:KELLY 细胞由神经母细胞瘤患者建立,核心特征为 N-MYC 基因在 der(100)hsr 中基因组扩增约 17 倍,且表达高水平 N-myc RNA 或蛋白质。该细胞 HPV(人瘤病毒)阴性,可在裸鼠体内成瘤,适用于神经母细胞瘤相关科学研究。
生长特性:贴壁生长
细胞形态:圆形、梭形细胞样
细胞代数:10 代以内
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或 1mL 冻存管
支原体检测:无
培养基:1640(RPMI 1640)+10% FBS+PS
培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规细胞培养条件)
冻存条件:无血清冻存液,液氮储存
细胞货期:现货,1 周左右
运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用) 顺丰快递
供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
培养核心操作
- 传代:
- 细胞密度达 70%-80% 时,用胰酶温和消化,加 RPMI 1640 培养基终止;
- 操作时避免剧烈吹打,防止圆形、梭形细胞形态被破坏,传代比例参考 1:3-1:5,保障细胞稳定增殖的同时,维持 N-MYC 基因扩增的核心特征。
- 换液:
- 每 2-3 天更换新鲜 RPMI 1640 培养基,清除代谢废物;
- 及时补充 10% FBS 提供营养,避免营养不足影响细胞活性,确保其 “裸鼠成瘤” 及基因表达相关的研究适用性。
- 冻存:
- 选取对数期(增殖旺盛、状态均一)的细胞,1000rpm 离心 5 分钟后弃上清;
- 用冻存液重悬至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml,梯度降温后存入液氮,确保复苏后细胞仍保持 N-myc 高表达及圆形、梭形的典型形态。
- 复苏:
- 37℃水浴速融冻存管,立即加入 5 倍体积新鲜培养基稀释;
- 离心弃上清后用预热的 RPMI 1640 培养基重悬接种,静置 24-48h,观察贴壁情况及细胞形态恢复,可对照 STR 鉴定文件确认细胞一致性。


评价
目前还没有评价