一、细胞基本属性
- 细胞名称：UM-UC-3 人膀胱移行细胞癌（STR 鉴定正确）（与 T24、RT112 同属膀胱移行细胞癌亚型，区别于 SV-HUC-1（正常输尿管上皮）、RT4（低度恶性乳头瘤），核心特色为 “贴壁生长缓慢”，可与 T24（快速贴壁增殖）、RT112（中速贴壁）组成 “慢 – 中 – 快” 贴壁生长节奏的膀胱肿瘤体系，用于研究细胞贴壁能力与恶性表型的关联机制）
- 细胞别称：UMUC-3; UM-UC3; UMUC3; UC-3; University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3；人膀胱移行细胞癌（别称含 “UM-UC” 前缀，源自 “密歇根大学尿路上皮癌” 命名体系，与 T24（“T” 前缀）、RT 系列（“RT” 前缀）形成明确区分；“Urothelial Carcinoma” 直接标注尿路上皮癌（即移行细胞癌），病理类型标识精准，便于科研场景中快速追溯细胞来源及背景）
- 种属来源：人
- 性别年龄：未明确（虽无具体性别年龄信息，但可通过与 T24（81 岁女）、RT4（63 岁男）的对比实验，间接分析年龄性别因素对细胞贴壁能力、药物敏感性的影响；若实验涉及性别相关研究，建议通过染色体核型分析（如 Amelogenin 基因检测）补充确认性别，确保实验设计严谨性）
- 组织来源：器官：膀胱；疾病：移行细胞癌（病理亚型明确为移行细胞癌，临床中占膀胱癌绝对主导类型，该细胞保留移行细胞癌的核心生物学特征，同时因贴壁缓慢特性，可用于研究膀胱肿瘤细胞黏附分子（如整合素）表达异常对贴壁及侵袭的影响）
- 生长特性：贴壁生长（核心特性：贴壁速度慢、形态展开迟缓，传代或消化后需 48 小时稳定贴壁，细胞间连接较紧密；与 T24（贴壁强但连接松散）、RT112（贴壁稳定）相比，贴壁适应性更弱，需特殊培养操作维护，适合开展细胞黏附、贴壁相关信号通路（如 FAK 通路）研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，贴壁展开后排列较规整，核浆比适中，具备移行细胞癌中分化至低分化过渡阶段的形态特征；因贴壁缓慢，未完全展开时呈圆形或短梭形，需 48 小时后才能观察到典型上皮细胞形态，可通过形态展开时间判断细胞活性及培养条件适配性，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性形态区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “贴壁缓慢” 的核心特性及移行细胞癌原始表型，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致贴壁特性漂移，如贴壁速度加快、形态展开时间缩短，影响实验重复性）
- 特别说明（贴壁相关）：UM-UC-3 细胞贴壁和形态展开较慢，传代或消化处理后，48h 内不要移动培养瓶，操作建议：①传代后立即放入 37℃培养箱，避免反复开关箱门或移动位置，减少温度、气相波动对贴壁的干扰；②贴壁期间无需换液，48 小时后观察细胞贴壁情况（若贴壁率≥70% 可正常换液，低于则延长至 72 小时）；③若需显微镜观察，轻推培养箱托盘，避免晃动瓶内培养基导致未贴壁细胞流失，确保贴壁效率。
- 生物安全等级：1（参考人源膀胱移行细胞癌常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，与 T24、RT112 安全要求一致，便于实验室统一管理多株膀胱肿瘤细胞，无需额外提升防护等级）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时贴壁存活率≥80%（低于 T24 的 85%），且贴壁缓慢特性无显著改变，确保实验起始细胞状态统一）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖肺炎支原体、人型支原体等常见类型，结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染进一步延缓细胞贴壁及生长，影响实验周期）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1749，ECACC; 96020936；中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（国际权威机构（ATCC、ECACC）与国内顶尖机构三重保藏，ATCC 编号 CRL-1749 为该细胞专属标识，细胞来源可追溯性强，贴壁特性及病理表型经过严格验证，与 T24（ATCC HTB-4）的保藏体系互补，便于跨实验室结果复现）
- 培养基：DMEM+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：采用 DMEM 培养基，区别于 T24 的 MCCOY’S 5A、RT112 的 RPMI-1640；建议选择高糖型 DMEM（含 4.5g/L 葡萄糖），为缓慢贴壁细胞提供充足能量，支持形态展开；10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中黏附抑制因子影响贴壁；PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞黏附分子表达）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致的渗透压升高，避免进一步阻碍细胞贴壁；培养箱内托盘需水平放置，防止培养基倾斜导致细胞聚集，确保贴壁均匀；与 T24、RT112、SV-HUC-1 等泌尿生殖系统细胞培养条件一致，仅需在贴壁阶段特殊防护，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作需适配贴壁缓慢特性：①选择完全贴壁展开的对数生长期细胞（传代后 72 小时左右），避免使用未完全贴壁的细胞；②消化时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（长于 T24 的 1-2 分钟），镜下见细胞间隙增大、边缘收缩即可终止，轻柔吹打避免损伤细胞表面黏附结构；③重悬浓度调整至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞），提升复苏后贴壁细胞密度；冻存流程与 T24 一致，复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 重悬，直接接种至预温的 T25 瓶，减少温度刺激）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 48 小时贴壁验证，确保贴壁特性稳定，下单后 48 小时内可安排发货；若需同步开展与 T24 的对比实验，可提前沟通协调发货时间，保障两株细胞同时到达，便于实验同步启动）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少对已贴壁细胞的影响；到达后立即放入 37℃培养箱，48 小时内不移动，按 “贴壁特别说明” 操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，避免复苏后贴壁能力进一步下降） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及贴壁特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等法规；实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①贴壁期管理：传代后 48 小时内严格禁止移动培养瓶，包括显微镜观察仅可进行 1 次（轻缓操作）；若发现部分细胞未贴壁，无需离心重铺，继续培养至 72 小时，未贴壁细胞会自然淘汰，避免反复操作加重细胞损伤；②传代时机选择：因贴壁生长慢，传代间隔建议 4-5 天（长于 T24 的 1-2 天、RT112 的 2-3 天），待细胞密度达 80%（完全贴壁展开后）再传代，避免过早传代导致细胞数量不足；③与其他膀胱癌细胞的对比实验设计：搭配 T24 开展 “贴壁速度差异” 研究时，可检测黏附分子（如 integrin β1、E-cadherin）表达水平，分析贴壁能力与分子表达的关联；开展药物筛选实验时，需根据 UM-UC-3 的贴壁节奏调整药物处理时间（如贴壁 72 小时后加药，而非常规的 24 小时），确保细胞处于稳定生长状态，同时与 T24 的药物响应结果对比，验证药物对不同贴壁特性肿瘤细胞的作用差异；④污染防控与贴壁验证：实验操作在超净工作台内进行，DMEM 培养基单独存放，避免与 T24 的 MCCOY’S 5A 交叉使用；长期培养中，每 5 代通过 “48 小时贴壁率检测” 验证核心特性，若贴壁率持续低于 70%，需更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠；⑤形态观察要点：培养初期（24 小时内）细胞呈圆形，属于正常未展开状态，无需担忧；48 小时后若仍无多边形展开形态，需排查培养基是否适配、温度是否稳定，及时调整培养条件。
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