一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

培养核心操作

1. 传代：
   • 细胞密度达 70%-80%（上皮细胞铺满瓶壁且无明显重叠）时，用胰酶温和消化，待细胞边缘收缩、间隙增大后，加专用培养基终止；
   • 操作时避免剧烈吹打，防止上皮细胞样形态破损，传代比例参考 1:3-1:5，保障肺腺癌细胞的稳定增殖特性。
2. 换液：
   • 每 2-3 天更换新鲜专用培养基，先弃去旧培养基，用无菌 PBS 轻柔冲洗细胞表面 1 次（去除残留血清和代谢废物）；
   • 加入足量专用培养基，避免营养不足影响细胞贴壁能力，维持其上皮细胞样的典型形态与肺腺癌生物学特征。
3. 冻存：
   • 选取对数期（增殖旺盛、形态均一）的细胞，胰酶消化后 1000rpm 离心 5 分钟，弃上清；
   • 用无血清冻存液重悬细胞至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml，按 “4℃静置 30 分钟→-20℃放置 2 小时→-80℃过夜→转入液氮” 的梯度降温，减少冻存损伤。
4. 复苏：
   • 从液氮中取出冻存管，立即放入 37℃水浴速融（1-2 分钟内完全融化），避免冰晶反复冻融破坏细胞；
   • 加入 5 倍体积新鲜专用培养基稀释，1000rpm 离心 5 分钟弃上清，用预热的专用培养基重悬后接种，24-48h 观察细胞贴壁情况及形态恢复。