一、细胞基本属性
- 细胞名称:DU145 人前列腺癌细胞(STR 鉴定正确)(与 UM-UC-3 同属泌尿生殖系统肿瘤细胞,但组织来源为前列腺(脑部转移灶),区别于 UM-UC-3 的膀胱移行细胞癌,是前列腺癌晚期转移机制研究的经典模型,可与 UM-UC-3 组成 “前列腺 – 膀胱” 泌尿生殖系统跨器官肿瘤对照体系,探索不同器官肿瘤转移特性的共性与差异)
- 细胞别称:DU 145;DU145;DU-145;人前列腺癌细胞(别称以 “DU” 为核心前缀,与 UM-UC-3(“UM-UC” 前缀)、T24(“T” 前缀)形成泌尿生殖系统肿瘤细胞株的清晰区分,数字 “145” 便于实验记录及文献检索,“前列腺癌细胞” 标注明确病理类型,贴合 “器官来源 + 编号” 的精准命名体系)
- 种属来源:人
- 性别年龄:未明确(结合前列腺癌男性高发特性及 STR 位点 Amelogenin:X,Y,可判断为男性;虽年龄未知,但源自 “有 3 年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者”,推测为中老年个体,可与 UM-UC-3(未明确)、T24(81 岁女)形成 “男性前列腺癌 – 女性膀胱癌” 性别器官互补,为泌尿生殖系统肿瘤性别差异机制研究提供模型)
- 组织来源:前列腺(具体为脑部转移灶)(核心特色为转移灶来源,且是前列腺癌中少见的脑部转移模型,保留转移癌特有的高侵袭性、适应异质性微环境能力;区别于原发灶前列腺癌细胞(如 LNCaP),可用于前列腺癌转移路径(尤其是血行转移至脑部)、转移微环境适应机制研究,同时酸性磷酸酶阳性、不表达前列腺抗原的特性,可作为转移灶与原发灶的鉴别标志物)
- 生长特性:贴壁生长(贴壁能力稳定,对数生长期细胞增殖节奏与转移癌特性匹配(介于原发灶肿瘤与正常细胞之间),细胞间连接松散(符合转移细胞易脱落扩散的特性),贴壁强度与 UM-UC-3 相近,传代操作可参考泌尿生殖系统肿瘤细胞通用流程,便于与 UM-UC-3 同步开展跨器官对比实验)
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形或短梭形,排列紊乱,核浆比增大,具备前列腺癌细胞典型的上皮细胞形态特征,同时因脑部转移灶来源,部分细胞可能呈现适应脑部微环境的形态变异(如胞质突起增多);与 UM-UC-3(贴壁展开后规整)相比,形态异形性更显著,可通过形态观察初步判断细胞转移特性及纯度,同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留前列腺癌脑部转移灶的原始生物学特性,如无激素敏感性、高侵袭性等,建议传代次数不超过 15 代,防止长期传代导致转移特性漂移,如激素敏感性异常恢复、软琼脂集落形成能力下降)
- 背景简介:DU145 细胞从一位有 3 年淋巴细胞白血病史的前列腺癌患者脑部转移灶中建立,核心特性及应用如下:①转移与功能特色:作为前列腺癌脑部转移模型,填补转移灶细胞株的空白,可用于研究前列腺癌血行转移至脑部的关键步骤(如血脑屏障穿透机制);无激素敏感性(区别于 LNCaP 等激素敏感性前列腺癌细胞),是研究去势抵抗性前列腺癌(CRPC)的重要工具;酸性磷酸酶阳性、不表达前列腺抗原,可用于转移灶特异性标志物筛选;②结构与生长特性:亚显微结构可见微绒毛(利于物质交换)、微丝(参与细胞运动)、细胞桥粒(维持细胞连接)、发达高尔基体(分泌功能活跃),支持其转移及适应异质性微环境的能力;单个细胞可在软琼脂中形成集落,体现锚定非依赖性生长(转移细胞核心特性),可用于体外转移能力评估;③应用场景:广泛用于前列腺癌转移机制研究(如 EMT 调控、血脑屏障穿透)、去势抵抗性前列腺癌药物筛选(如靶向 AR-V7、mTOR 的药物)、转移灶与原发灶对比实验,同时可与 UM-UC-3(膀胱肿瘤)搭配开展泌尿生殖系统肿瘤转移特性的跨器官研究。
- STR 位点信息:Amelogenin:X,Y(明确男性性别,与前列腺癌男性发病特性一致,可快速验证细胞性别一致性,排除交叉污染,与 UM-UC-3(未明确,推测女性)形成性别区分); CSF1PO:10,11;D13S317:12,13,14(多等位基因,体现肿瘤细胞染色体异常);D16S539:11,13;D18S51:12;D19S433:13;D21S11:30,33;D2S1338:16;D3S1358:16;D5S818:10,13;D7S820:7,10,11(多等位基因);D8S1179:13,14;FGA:21,22;TH01:7;TPOX:11;vWA:17,18,19(多等位基因);(STR 位点含多个多等位基因(如 D13S317、D7S820),是转移灶肿瘤细胞染色体不稳定的典型特征,可通过图谱验证细胞身份,同时与 UM-UC-3、T24 等膀胱癌细胞的 STR 图谱清晰区分,避免细胞混淆)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(冻存管建议含 10% 二甲基亚砜(DMSO)的无血清冻存液,经检测复苏存活率稳定在 85% 以上,且复苏后无激素敏感性、软琼脂集落形成能力无显著改变,确保实验起始条件一致)
- 支原体检测:无(每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体,覆盖肺炎支原体、人型支原体等常见类型,结果为阴性,可直接用于实验,避免支原体污染影响细胞生长及转移特性相关实验结果)
- 保藏机构:中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心(国内权威机构保藏,细胞来源可追溯,转移特性及生物学表型经过严格验证,与 UM-UC-3(含国际保藏)的保藏体系互补,便于国内科研机构开展泌尿生殖系统肿瘤跨器官研究)
- 培养基:90% MEM+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素)(核心特色:采用 MEM 培养基,区别于 UM-UC-3 的 DMEM、T24 的 MCCOY’S 5A;MEM 培养基含丰富氨基酸及维生素,适配转移细胞高代谢需求,建议选择含非必需氨基酸的 MEM 亚型,进一步支持细胞适应异质性环境;10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中激素成分干扰 “无激素敏感性” 特性研究;PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响细胞转移相关表型)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(培养箱湿度维持在 70%-80%,定期更换水盘,防止培养基蒸发导致渗透压升高;与 UM-UC-3、T24、SV-HUC-1 等泌尿生殖系统细胞培养条件完全一致,确保跨器官对比实验环境的统一性,仅需在转移相关实验中调整微环境模拟条件(如添加血脑屏障相关细胞共培养))
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作需适配转移细胞特性:①选择对数生长期细胞(确保转移特性稳定),用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟,镜下见细胞间隙增大即可终止,轻柔吹打避免损伤微绒毛、微丝等结构;②离心后用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 1×10⁶-2×10⁶cells/mL,避免浓度过高导致细胞聚集;③冻存流程与 UM-UC-3 一致,复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热的 MEM 培养基重悬,直接接种,减少对转移表型的影响)
- 染色体:59~65(染色体数目多于正常人类二倍体(46 条),体现肿瘤细胞染色体异质性,与 STR 位点多等位基因特征一致;染色体数目波动范围窄,说明细胞系遗传背景相对稳定,适合长期实验及结果重复)
- 使用权限:A 类(属于开放获取的科研用细胞株,无需特殊申请即可获取,适合各类科研机构开展前列腺癌转移、去势抵抗等研究,尤其便于国内实验室开展泌尿生殖系统肿瘤跨器官协作实验)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存细胞均经过无激素敏感性验证(如雄激素处理后增殖无显著变化)及软琼脂集落形成实验验证,确保核心转移特性稳定,下单后 48 小时内可安排发货,可与 UM-UC-3 同步下单,保障跨器官对比实验的时间一致性)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用防震恒温泡沫箱,内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,运输过程中避免剧烈颠簸,减少对细胞贴壁及转移相关结构的损伤;到达后立即放入 37℃培养箱,24 小时后观察细胞贴壁情况,无需像 UM-UC-3 那样严格限制移动)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,确保到达时干冰剩余量≥50%,维持细胞冻存状态,避免复苏后转移特性改变) 顺丰快递(优先选择次日达服务,缩短运输时间,降低细胞活性损失及转移表型漂移风险)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途,使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等法规;因涉及转移灶模型,实验废弃物需经高压灭菌(121℃,30 分钟)处理,避免生物危害)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①培养基与激素控制:严格使用 MEM 培养基,不可与 UM-UC-3 的 DMEM 混用;若开展激素敏感性相关实验,需选择 charcoal-stripped FBS(去除血清中内源性激素),避免干扰 “无激素敏感性” 特性检测;②转移相关实验设计:开展软琼脂集落形成实验时,接种密度建议 1×10³cells / 孔(6 孔板),培养 10-14 天后计数集落,设置 LNCaP(激素敏感性前列腺癌细胞)作为对照,验证转移灶与原发灶的锚定非依赖性生长差异;开展血脑屏障穿透实验时,可与脑微血管内皮细胞(如 hCMEC/D3)共培养,构建 Transwell 血脑屏障模型,检测 DU145 细胞的穿透能力;③与 UM-UC-3 的跨器官对比:搭配 UM-UC-3 开展实验时,需控制培养条件一致性(除培养基外),如检测两株细胞的 EMT 标志物(E-cadherin、N-cadherin)表达差异,分析不同器官肿瘤转移的分子机制共性;对比两者对化疗药(如多西他赛、顺铂)的 IC50 值,评估药物对泌尿生殖系统不同肿瘤的适用性;④传代与形态监测:因细胞间连接松散,传代时避免过度吹打导致细胞破碎;每代培养需观察细胞形态,若发现短梭形细胞比例显著增加,可能提示 EMT 程度加深,需及时更换低代数种子细胞;⑤无前列腺抗原的应用:利用 “不表达前列腺抗原” 特性,可开展转移灶特异性诊断标志物筛选实验,如对比 DU145(转移灶)与 LNCaP(原发灶,表达前列腺抗原)的基因表达谱,挖掘转移灶专属标志物,为临床转移诊断提供靶点。


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