一、细胞基本属性
- 细胞名称：LNCaP 人前列腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 DU145 同属前列腺癌细胞，但转移部位为左锁骨淋巴结（区别于 DU145 的脑部转移灶）、具备激素敏感性（区别于 DU145 的无激素敏感性），是前列腺癌激素依赖性转移研究的经典模型，可与 DU145 组成 “同器官 – 不同转移部位 / 激素表型” 对照体系，探索前列腺癌转移路径与激素敏感性的关联机制）
- 细胞别称：LNCaP；人前列腺癌细胞（别称以 “LNCaP” 为核心标识，无复杂前缀后缀，简洁易记，与 DU145（“DU” 前缀）、UM-UC-3（“UM-UC” 前缀）形成泌尿生殖系统肿瘤细胞株的清晰区分，贴合前列腺癌细胞 “字母 + 数字” 的经典命名体系，便于实验记录及文献检索）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；50 岁（明确的中年男性白人背景，与 DU145（推测中老年男）形成中年 – 老年男性年龄梯度，与 T24（81 岁女膀胱癌）形成 “男性前列腺癌 – 女性膀胱癌” 性别器官对照，为泌尿生殖系统肿瘤年龄相关机制、性别差异研究提供精准模型）
- 组织来源：前列腺；左锁骨淋巴结癌转移灶（核心特色为淋巴结转移灶来源，区别于 DU145 的血行转移至脑部，保留淋巴结转移癌特有的 “淋巴道侵袭、免疫微环境适应” 特性；可用于前列腺癌淋巴转移机制研究（如淋巴道穿透、淋巴结定植），同时 5-α- 双氢睾酮敏感性特性，是研究激素依赖性转移的理想模型）
- 生长特性：贴壁生长（核心缺陷为贴壁极不牢，仅轻度吸附于培养瓶底，不形成均一单层而是成簇生长，生长速度慢（复苏 / 传代后 24-48 小时贴壁），培养基易变酸（需频繁换液）；与 DU145（贴壁稳定、细胞间连接松散）相比，贴壁适应性显著更弱，需特殊培养操作（如包被培养瓶）维护，适合开展细胞黏附异常与转移关联性研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈圆形或多边形，成簇聚集生长，胞质透亮，核仁清晰，具备激素敏感性前列腺癌细胞典型形态特征；因贴壁不牢，未完全贴壁时呈悬浮簇状，贴壁后仍保持局部聚集状态，与 DU145（排列紊乱、部分呈短梭形）的转移形态差异显著，可通过 “成簇生长” 形态快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “激素敏感性、成簇生长、贴壁不牢” 的核心特性，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如激素敏感性减弱、贴壁能力异常增强，影响实验重复性）
- 背景简介：LNCaP 细胞由 HoroszewiczJS 于 1977 年从一名 50 岁明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者左锁骨上淋巴结细针穿刺组织中分离建立，核心特性及应用如下：①激素敏感性特色：5-α- 双氢睾酮可调控细胞生长及酸性磷酸酶产生，是研究激素依赖性前列腺癌（HDPC）的 “金标准” 模型，可用于雄激素受体（AR）信号通路调控、去势治疗耐药机制（如 AR-V7 变异）研究；②生长与转移特性：成簇生长、贴壁不牢的特性，模拟了淋巴结转移灶细胞 “易脱落、易扩散” 的生物学行为；虽无脑部转移能力，但具备淋巴道转移潜力，可用于前列腺癌淋巴转移路径（如从前列腺至锁骨上淋巴结）研究；③应用场景：广泛用于激素依赖性前列腺癌基础研究（如 AR 介导的细胞增殖调控）、去势治疗药物筛选（如抗雄激素药物比卡鲁胺）、转移灶与原发灶对比实验，同时可与 DU145（去势抵抗性）搭配开展 “激素敏感 – 去势抵抗” 前列腺癌全病程研究，覆盖临床主要疾病阶段。
- 特别注意（贴壁与培养）：
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- 贴壁增强处理：因贴壁性差，生长需使用 0.1% 明胶或 0.1mg/ml 多聚赖氨酸包被培养瓶（包被方法：取适量明胶 / 多聚赖氨酸溶液铺满瓶底，37℃孵育 30 分钟，弃去多余液体晾干），或直接使用 Corning cellbind 细胞培养瓶，通过增强细胞与基质黏附提升贴壁率；
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- 生长节奏与换液：细胞生长慢，复苏 / 传代后 24-48 小时贴壁，贴壁后仍不形成汇合，且快速使培养基变酸（代谢旺盛），需每 1-2 天更换新鲜培养基，避免酸性环境抑制细胞生长；传代后 48 小时内严禁移动培养瓶，轻微晃动即可导致细胞脱落；
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- 运输后处理：罐装运输后多数细胞脱落悬浮，收到后需：①静置 6-8 小时让细胞自然贴壁；②更换新鲜培养基，去除代谢废物；③若仍有大量悬浮细胞，收集上清及贴壁细胞，1000rpm 离心 5 分钟，用新鲜培养基重悬后接种至包被好的 6cm 培养皿或 T25 瓶，24-48 小时后观察贴壁情况。
- STR 位点信息：Amelogenin：X,Y（明确男性性别，与前列腺癌男性发病特性一致，可快速验证细胞性别一致性，排除交叉污染，与 DU145 的 Amelogenin：X,Y 共同确认男性前列腺癌细胞身份）; CSF1PO：10，11；D13S317：10，12；D16S539：11；D18S51：9，11，12（多等位基因，体现肿瘤细胞染色体异常）；D19S433：13.2，15；D21S11：29，32.2；D2S1338：16，17；D3S1358：16；D5S818：11，12；D7S820：8.1，9.1，10.3（多等位基因）；D8S1179：12，14；FGA：19，20；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：16，18；（STR 位点含多个多等位基因（如 D18S51、D7S820），与 DU145 的 STR 图谱（多等位基因分布不同）差异显著，可通过图谱验证细胞身份，同时与膀胱癌细胞（如 T24、UM-UC-3）清晰区分，避免细胞混淆）
- 使用权限：A 类（与 DU145 权限一致，属于开放获取的科研用细胞株，无需特殊申请即可获取，适合各类科研机构开展激素依赖性前列腺癌研究，尤其便于国内实验室开展 “激素敏感 – 去势抵抗” 平行实验）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时贴壁存活率≥75%（低于 DU145 的 85%），且激素敏感性、成簇生长特性无显著改变；T25 瓶发货时需提前用明胶包被，确保细胞到达后可直接培养）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖肺炎支原体、人型支原体等常见类型，结果为阴性，可直接用于实验，避免支原体污染进一步加重贴壁困难及生长抑制）
- 保藏机构：中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（与 DU145 保藏机构一致，国内权威机构保藏，细胞来源可追溯，激素敏感性及转移特性经过严格验证，便于国内科研机构开展前列腺癌细胞株的统一管理及实验协作）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：采用 RPMI-1640 培养基，区别于 DU145 的 MEM、UM-UC-3 的 DMEM；10% FBS 需选择 charcoal-stripped FBS（去除内源性激素），避免血清中雄激素干扰 “5-α- 双氢睾酮敏感性” 实验；PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响 AR 信号通路活性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致的渗透压升高，避免加重贴壁困难；培养箱内托盘需水平放置，防止培养基倾斜导致细胞簇聚集；与 DU145、UM-UC-3 等泌尿生殖系统细胞培养条件一致，仅需在贴壁阶段增加包被步骤）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作需适配成簇生长及贴壁不牢特性：①选择贴壁后 72 小时、呈小簇生长的细胞（避免过大细胞簇），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟，期间轻柔吹打分散细胞簇，形成单细胞悬液；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞），提升复苏后细胞密度；③冻存流程与 DU145 一致，复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，接种至预包被的培养瓶，减少温度及基质刺激）
- 染色体：72~88，XY（男性核型，染色体数目显著多于正常二倍体（46 条），且波动范围宽于 DU145（59~65），体现激素敏感性前列腺癌细胞染色体异质性更高的特征；染色体数目稳定，适合开展染色体相关实验（如荧光原位杂交 FISH））
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过明胶包被培养验证及激素敏感性检测（如 5-α- 双氢睾酮处理后增殖变化），确保核心特性稳定；下单后需提前 1 天准备包被培养瓶，48 小时内安排发货，可与 DU145 同步协调发货时间，保障 “激素敏感 – 去势抵抗” 实验同步启动）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免任何颠簸，减少细胞脱落；到达后按 “特别注意 3” 操作，严禁立即移动或换液）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，避免复苏后贴壁能力进一步下降） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及激素敏感性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 DU145 限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗等非科研用途；实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①激素实验优化：开展 5-α- 双氢睾酮敏感性实验时，需使用 charcoal-stripped FBS 配制培养基，设置 0、1、10、100nM 等梯度浓度，处理 48-72 小时（适配慢生长特性），通过 CCK-8 法检测增殖变化，设置 DU145（无激素敏感性）作为阴性对照，验证实验体系有效性；②传代操作细节：传代时需反复轻柔吹打细胞簇（避免用力过猛导致细胞破碎），直至形成单细胞悬液，否则会因细胞簇过大导致贴壁不均；接种密度控制在 3×10⁵cells/T25（高于 DU145），利用细胞间相互作用促进贴壁；③与 DU145 的对比实验设计：搭配 DU145 开展 “激素敏感 – 去势抵抗” 研究时，可：a. 检测 AR 及 AR-V7 表达：对比两株细胞在雄激素处理前后的 AR 核转位及 AR-V7（去势抵抗标志物）表达差异，分析耐药机制；b. 药物敏感性对比：检测抗雄激素药物（比卡鲁胺）、化疗药（多西他赛）对两株细胞的 IC50 值，评估药物对不同激素表型前列腺癌的适用性；c. 转移能力差异：通过 Transwell 实验（淋巴内皮细胞共培养模拟淋巴道）对比两株细胞的侵袭能力，分析激素敏感性与转移路径的关联；④贴壁问题排查：若复苏后 72 小时仍无贴壁，需排查：a. 培养瓶是否完成包被（明胶需晾干）；b. 培养基是否使用 charcoal-stripped FBS（普通 FBS 可能含抑制因子）；c. 培养箱温度是否稳定（波动需＜±1℃），及时调整条件避免实验延误；⑤长期培养监测：每 5 代检测激素敏感性（如酸性磷酸酶活性变化）及成簇生长特性，若发现细胞分散生长、对 5-α- 双氢睾酮无响应，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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