一、细胞基本属性
- 细胞名称：HGC-27 人胃癌细胞（STR 鉴定正确）（与 GES-1（正常胃黏膜）、AGS（胃腺癌）同属胃来源细胞，但为未分化胃癌亚型（胃癌中恶性程度最高，预后最差，占比约 10%-15%），且源自淋巴结转移灶，区别于 AGS 的原发胃癌、GES-1 的正常黏膜，是胃癌未分化亚型、转移机制及 3D 肿瘤模型研究的核心模型；可与 GES-1（正常）、AGS（分化型腺癌）组成 “正常 – 分化型癌 – 未分化癌” 胃癌梯度体系，探索胃癌分化程度与恶性表型（侵袭、转移、耐药）的关联机制）
- 细胞别称：HGC27；HGC-27；人胃癌细胞（别称以 “GHC” 为核心前缀，与 GES-1（“GES” 前缀）、AGS（“AGS” 标识）形成胃癌细胞株的清晰区分，数字 “27” 便于实验记录及文献检索；“人胃癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，避免与其他 “HG” 前缀细胞（如肝细胞）混淆，贴合 “胃癌亚型 + 编号” 的精准命名体系，同时保持与胃相关细胞命名的关联性）
- 种属来源：人
- 性别年龄：未明确；结合 STR 位点 Amelogenin：X 可判断为女性（未标注具体年龄，推测为中老年个体，与 AGS（54 岁女）形成同性别不同分化程度胃癌对照，与 GES-1（9 个月胎儿）形成 “胎儿 – 成人” 极端年龄对照，为胃癌未分化亚型的性别、年龄相关发病机制研究提供补充模型；若实验涉及年龄相关分析，可通过细胞生长特性、基因表达与 AGS（已知年龄）间接对比，确保实验设计严谨性）
- 组织来源：胃，淋巴结转移（核心特色为胃未分化胃癌的淋巴结转移灶来源，保留未分化胃癌特有的 “高侵袭性、快速转移、低分化表型” 及淋巴结转移灶的 “免疫微环境适应、淋巴道定植” 特性；区别于 AGS 的原发胃癌组织、GES-1 的正常黏膜，可用于胃癌未分化亚型淋巴转移机制研究（如淋巴道穿透、淋巴结定植信号通路）、未分化癌特异性标志物筛选，同时为临床胃癌未分化转移患者的治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏快（与未分化肿瘤高代谢特性匹配，快于 GES-1 的平缓增殖，与 AGS 的快速增殖相近），贴壁强度高于 GES-1（正常细胞），低于 AGS（分化型腺癌）；细胞间连接松散，无明显成簇生长，传代时易形成单细胞悬液，适合开展侵袭、迁移及 3D 瘤球形成等动态功能实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形或短梭形，排列紊乱，核浆比显著增大，核仁明显且数量增多，具备未分化胃癌典型的上皮细胞形态特征，无分化型腺癌的腺管样结构；与 AGS（局部腺管样、分化特征明显）相比，形态异形性更显著，与 GES-1（规整铺路石样、核浆比正常）形成鲜明对比；可通过形态观察快速判断细胞未分化表型及纯度，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “未分化表型、淋巴转移特性、瘤球形成能力” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如分化程度升高（出现腺管样结构）、瘤球形成能力下降、粘液素分泌减少）
- 背景简介：HGC-27 细胞源自未分化胃癌组织，能分泌粘液素，核心特性及应用如下：①未分化与分泌特色：作为胃癌未分化亚型的经典模型，无明确分化方向，表达未分化癌标志物（如 CD133、SOX2），同时具备粘液素分泌能力（区别于部分无分泌功能的未分化癌），可用于未分化癌分化调控机制（如诱导分化治疗）、粘液素在转移中的作用（如保护肿瘤细胞逃避免疫监视）研究；②转移与 3D 培养特性：淋巴结转移灶来源使其成为胃癌淋巴转移研究的理想模型，可模拟淋巴道转移关键步骤；具备稳定的瘤球形成能力（需专用 3D 肿瘤球培养基，货号 IMC-314），瘤球模型可更好模拟体内肿瘤微环境，适合开展肿瘤干细胞（CSCs）、药物渗透及耐药性研究；③应用场景：广泛用于胃癌未分化亚型基础研究（如未分化相关信号通路 Wnt/β-catenin、Notch 调控）、转移机制研究（淋巴道转移分子靶点）、3D 肿瘤模型构建及药物筛选（如针对未分化癌的化疗药、靶向药），同时可与 GES-1、AGS 搭配开展 “分化梯度” 对比实验，验证药物对不同分化程度胃癌的特异性杀伤效果。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（明确女性性别，与性别推测一致，可通过该位点验证细胞身份，排除交叉污染，与 AGS（Amelogenin：X）共同确认女性胃癌细胞身份）; CSF1PO：12；D13S317：10，11；D16S539：10，11；D18S51：16，17；D19S433：14；D21S11：30，33，34（多等位基因，体现未分化癌染色体高度不稳定）；D2S1338：22，24；D3S1358：17，17.3；D5S818：OL，12（OL 为等位基因缺失，未分化癌典型特征）；D7S820：11，12，13（多等位基因）；D8S1179：8.2，10，11，16（多等位基因）；FGA：22；TH01：9；TPOX：8；vWA：14；（STR 位点含多等位基因（如 D21S11、D7S820）及等位基因缺失（D5S818：OL），是未分化胃癌染色体异常的典型表现，与 GES-1（正常核型）、AGS（较少染色体异常）的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（中国科学院昆明细胞库）数据比对，确认细胞身份及未分化特性）
- 使用权限：A 类（与 MDA-PCA-2B、LNCaP 等细胞权限一致，属于开放获取的科研用细胞株，无需特殊申请即可获取，适合各类科研机构开展胃癌未分化亚型、转移及 3D 培养相关研究，尤其便于国内实验室开展 “分化梯度” 协作实验）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且未分化形态、粘液素分泌及瘤球形成能力无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%（因增殖快，避免密度过高导致传代延误），确保到达后可快速开展贴壁实验或 3D 瘤球培养）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、粘液素分泌及瘤球形成，保障与 GES-1、AGS 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：中国科学院昆明细胞库（国内权威机构保藏，细胞来源可追溯，未分化特性及生物学表型经过严格验证，与 AGS（多机构保藏）、GES-1（国内机构保藏）的保藏体系互补，便于国内科研机构开展胃癌本土化研究）
- 培养基：89% DMEM+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 DMEM 培养基，区别于 GES-1 的 RPMI-1640、AGS 的 F12K；DMEM 含高糖（4.5g/L）及丰富氨基酸，适配未分化胃癌高代谢需求，支持其快速增殖及粘液素合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中分化诱导因子影响未分化表型；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞转移特性及瘤球形成）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（贴壁培养时，培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；开展 3D 瘤球培养时，需使用超低吸附培养板，湿度维持在 80%（高于贴壁培养），减少培养基蒸发导致瘤球干裂；与 GES-1、AGS、TE-1 等所有已梳理细胞的培养条件一致，仅需在 3D 培养时调整耗材及湿度，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配未分化及贴壁特性：①选择对数生长期贴壁细胞（接种后 24-36 小时），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1.5-2.5 分钟（短于 GES-1 的 2-3 分钟），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免破坏细胞表面转移相关结构（如黏附分子）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞），提升复苏后细胞密度；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，可直接接种贴壁培养，或离心后用 3D 肿瘤球培养基（货号 IMC-314）重悬开展瘤球培养）
- 瘤球形成能力：具备稳定瘤球形成能力（需使用专用 3D 肿瘤球培养基，货号 IMC-314）（核心应用特性：①瘤球形成条件：使用超低吸附 6 孔板，接种密度 5×10³cells / 孔，加入 IMC-314 培养基，培养 7-10 天可形成直径 100-200μm 的球形结构，瘤球形成率≥80%；②瘤球特性：瘤球细胞表达肿瘤干细胞标志物（如 CD44、ALDH1），模拟体内肿瘤干细胞的自我更新及耐药特性，可用于肿瘤干细胞分选、靶向治疗及药物渗透实验；③操作注意：3D 培养期间无需换液（IMC-314 培养基营养丰富），避免晃动培养板导致瘤球破碎；收集瘤球时用移液枪轻柔吹打，离心转速降至 800rpm，防止瘤球结构破坏）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、未分化形态验证、粘液素分泌检测及瘤球形成预实验，确保核心特性稳定；若需同步开展 3D 培养，可提前沟通配备 IMC-314 培养基，下单后 48 小时内安排发货，可与 GES-1、AGS 同步下单，保障 “分化梯度” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况，因增殖快，36 小时内需判断是否传代）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态；若同步购买 IMC-314 培养基，需单独包装（常温运输），避免与干冰接触） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及未分化表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 GES-1、AGS 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基与表型维护：严格使用 “89% DMEM+10% FBS+1% PS” 配方，不可与 GES-1 的 RPMI-1640、AGS 的 F12K 混用；若开展分化诱导实验，可添加维甲酸（RA）等分化诱导剂，通过形态观察（是否出现腺管样结构）及分化标志物检测（如 CK7 表达变化）评估诱导效果；②3D 瘤球培养优化：开展瘤球实验时，需严格使用 IMC-314 培养基及超低吸附板，接种前确保板底无气泡；培养第 5 天可通过倒置显微镜观察瘤球大小及完整性，若出现大量小碎片，需排查细胞接种密度（过低易导致碎片）或培养基批次；③“分化梯度” 对比实验设计：搭配 GES-1（正常）、AGS（分化型腺癌）开展实验时，可：a. 检测分化相关基因（如 E-cadherin（高分化高表达）、vimentin（未分化高表达））的表达差异，分析分化程度与上皮 – 间质转化（EMT）的关联；b. 对比三株细胞的侵袭能力（Transwell 实验）及瘤球形成能力，验证未分化癌的高恶性表型；c. 检测化疗药（如顺铂、奥沙利铂）对三株细胞的 IC50 值，评估未分化癌是否更易产生耐药，为临床用药提供依据；④粘液素分泌检测：通过 PAS 染色（检测粘液素）或 ELISA 法（检测 MUC5AC、MUC6）验证粘液素分泌功能，若分泌量显著下降，提示细胞未分化特性改变，需更换低代数种子细胞；⑤长期培养监测：每 3 代检测未分化标志物（如 CD133、SOX2）、瘤球形成率及 STR 图谱，若发现标志物表达下降、瘤球形成率低于 60% 或染色体异常位点改变，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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