一、细胞基本属性
- 细胞名称：MKN-1 人胃癌细胞（与 MGC-803（原发低分化粘液样腺癌）、HGC-27（未分化转移癌）、GES-1（正常胃黏膜）同属胃来源细胞，但为印戒细胞癌亚型（胃癌特殊亚型，占比约 5%-15%，恶性程度高、预后极差），且源自胃淋巴结转移灶，区别于 MGC-803 的原发灶、HGC-27 的未分化转移灶，是胃癌印戒细胞癌亚型、淋巴转移机制研究的专属模型；可与 GES-1（正常）、MGC-803（原发低分化腺癌）、HGC-27（未分化转移癌）组成 “正常 – 原发腺癌 – 印戒细胞转移癌 – 未分化转移癌” 胃癌亚型 / 转移梯度体系，探索不同胃癌亚型的恶性进展差异及特异性治疗靶点）
- 细胞别称：MKN1；MKN-1；人胃癌细胞（别称以 “MKN” 为核心前缀，与 MGC-803（“MGC” 前缀）、HGC-27（“HGC” 前缀）形成胃癌细胞株的清晰区分，数字 “1” 便于实验记录及文献检索；“人胃癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，避免与其他 “MK” 前缀细胞（如乳腺细胞）混淆，贴合 “胃癌亚型 + 编号” 的精准命名体系，同时与 MGC-803、HGC-27 共同构建胃癌细胞 “M” 系列命名关联）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；35 岁（明确的年轻女性背景，填补胃癌细胞模型中年轻女性来源的空白，与 MGC-803（53 岁男）形成 “年轻女 – 中年男” 年龄性别双重对照，与 HGC-27（推测中老年女）形成 “年轻女 – 中老年女” 年龄梯度，为胃癌发病的年龄性别差异机制、年轻女性胃癌特殊发病特征研究提供独特模型，适合模拟临床年轻女性印戒细胞癌研究场景）
- 组织来源：胃癌（具体为胃印戒细胞癌的淋巴结转移灶，保留印戒细胞癌特有的 “胞质内粘液充盈、核偏位、印戒样形态” 核心表型及淋巴结转移灶的 “淋巴道定植、免疫微环境适应” 特性；区别于 MGC-803 的原发低分化腺癌、HGC-27 的未分化转移癌，可用于印戒细胞癌特异性研究（如粘液合成与细胞形态调控）、淋巴转移机制（如印戒细胞如何穿透胃壁淋巴屏障）研究，同时为临床年轻女性印戒细胞癌转移治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖节奏中等偏慢（与印戒细胞癌代谢特性匹配，慢于 HGC-27 的快速增殖，与 MGC-803 的中等增殖相近），贴壁强度低于 MGC-803（低分化腺癌），高于 GES-1（正常细胞）；细胞间连接松散，部分细胞因胞质粘液充盈呈圆形，传代时需轻柔吹打避免胞质破裂导致粘液释放，适合开展印戒细胞形态观察、粘液分泌调控等功能实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈圆形或椭圆形，胞质丰富且含大量粘液（需通过 PAS 染色验证），细胞核被粘液挤压至细胞边缘呈偏位状，形成典型 “印戒样” 形态，无完整腺管结构（区别于 MGC-803 的部分腺管）；与 HGC-27（短梭形、无印戒结构）相比，印戒样形态是核心鉴别点，与 GES-1（规整铺路石样）形成鲜明对比；可通过形态观察快速判断细胞印戒细胞癌表型及纯度，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “印戒细胞形态、粘液分泌功能、淋巴结转移相关分子特征” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如印戒样形态丢失、粘液分泌减少、转移相关基因表达改变）
- 背景介绍：MKN-1 细胞系由 S Akiyama 建立，源于一位 35 岁患有印戒细胞癌的女性的胃淋巴结，核心特性及应用如下：①亚型与转移特色：作为胃癌印戒细胞癌淋巴转移灶的经典模型，保留印戒细胞癌的 “粘液驱动侵袭” 特性（胞质粘液推动细胞变形穿透组织屏障），可用于印戒细胞癌特异性发病机制（如 CDH1 基因突变导致的细胞黏附异常）、淋巴转移路径（从胃原发灶至区域淋巴结）研究；②临床关联价值：年轻女性来源使其成为研究年轻女性胃癌（多与遗传因素、激素水平相关）的关键模型，可探索印戒细胞癌在年轻人群中的特殊分子特征；与 MGC-803（中年男性原发腺癌）的 “性别 – 年龄 – 亚型” 对比，可挖掘胃癌发病的人群特异性机制；③应用场景：广泛用于印戒细胞癌基础研究（如粘液合成相关信号通路 PI3K/Akt 调控）、淋巴转移实验、药物筛选（如针对印戒细胞癌的粘液靶向药物），同时可与 MGC-803、HGC-27 搭配开展 “不同亚型胃癌” 对比实验，验证药物对印戒细胞癌的特异性杀伤效果。
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 80% 以上（略低于 MGC-803，因印戒细胞对低温更敏感），且印戒样形态、粘液分泌特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%（避免密度过高导致细胞挤压变形），确保到达后可快速开展形态观察或粘液检测实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、印戒形态及粘液分泌，保障与 MGC-803、HGC-27 平行实验的可靠性）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，与 MGC-803 的 RPMI-1640（可补充 PS）一致，区别于 HGC-27 的 DMEM；RPMI-1640 含有的氨基酸组合适配印戒细胞癌的粘液合成需求，支持其印戒样形态维持；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中分化诱导因子影响印戒细胞表型；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞粘液分泌及转移特性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（贴壁培养时，培养箱湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致的粘液浓缩；培养箱内避免剧烈晃动，防止细胞脱落；与 GES-1、MGC-803、HGC-27 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配印戒细胞特性：①选择对数生长期贴壁细胞（接种后 48-72 小时），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2.5-3.5 分钟（长于 MGC-803 的 2-3 分钟），镜下见细胞间隙增大、边缘轻微收缩即可终止，轻柔吹打（力度低于其他胃癌细胞）避免胞质破裂；②1000rpm 离心 5 分钟（离心力低于 HGC-27 的 1000rpm，防止粘液层压缩）收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿印戒细胞复苏损失）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟（长于其他细胞）→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化（缓慢融化减少细胞损伤），离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对粘液结构的破坏）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、印戒样形态验证及粘液分泌检测，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 MGC-803、HGC-27 同步下单，保障 “不同亚型胃癌” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免任何颠簸，减少贴壁细胞脱落及胞质损伤；到达后立即放入 37℃培养箱，36 小时内不换液，待细胞完全贴壁恢复形态后再进行后续操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及印戒表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 GES-1、MGC-803 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①形态维护与观察：培养过程中需避免频繁移动培养瓶，防止细胞因晃动导致形态改变；观察形态时选择低倍镜（100×），聚焦胞质区域，通过 “核偏位 + 胞质透亮” 特征判断印戒细胞纯度，若印戒样细胞占比低于 60%，提示细胞表型异常；②亚型对比实验设计：搭配 MGC-803（低分化腺癌）、HGC-27（未分化癌）开展实验时，可：a. 检测印戒细胞特异性标志物（如 CDH1、MUC6）与其他亚型标志物（如 HGC-27 的 CD133）的表达差异，筛选印戒细胞癌专属靶点；b. 对比三株细胞的粘液分泌量（PAS 染色定量），MKN-1（印戒细胞）粘液量应显著高于 MGC-803、HGC-27，验证印戒细胞 “粘液驱动” 特性；c. 开展 Transwell 侵袭实验，因 MKN-1 增殖偏慢，培养时间建议延长至 72 小时，对比其与 HGC-27（转移灶）的淋巴道侵袭能力差异；③药物敏感性实验：针对年轻女性模型特性，可开展激素相关药物（如雌激素受体抑制剂）的敏感性检测，设置不同年龄性别来源的胃癌细胞作为对照，分析激素对印戒细胞癌的影响；④冻存复苏优化：若复苏后细胞存活率低，可调整冻存液配方（添加 5% 血清）或延长 4℃平衡时间至 1 小时，同时复苏后 24 小时内添加 1× 胰岛素转铁蛋白硒（TS），促进细胞形态恢复；⑤长期培养监测：每 4 代检测印戒样形态占比、粘液分泌量及 CDH1 基因表达，若发现形态异常、粘液减少或 CDH1 表达下降，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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