一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：COLO 320DM 人结直肠腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 COLO205（腹水转移结直肠癌）、Caco-2（原发结直肠癌）同属结直肠癌细胞，区别于 SNU-216（胃癌）、GES-1（正常胃黏膜），核心特色为 “Dukes 氏 C 型（晚期局部转移）+ 激素分泌功能 + 圆形折光形态”，是结直肠癌晚期转移机制、神经内分泌样表型研究的专属模型；可与 COLO205（腹水远处转移）、Caco-2（原发）、GES-1（正常）组成 “正常 – 原发 – 局部转移 – 远处腹水转移” 结直肠癌全转移阶段体系，探索结直肠癌从局部侵犯到远处转移的恶性进展差异，同时因激素分泌特性，可单独用于 “肿瘤 – 内分泌” 交叉领域研究）
- 细胞别称：COLO-320DM; COLO_320DM; COLO-320-DM; COLO320/DM; COLO320-DM; COLO320DM; Colo320DM; COLO320 DM; COLO 320 DM；人结直肠腺癌细胞（别称以 “COLO 320DM” 为核心，“DM” 后缀为关键标识，与 COLO205（无后缀）形成同 “COLO” 系列的清晰区分；大小写、连接符及空格差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人结直肠腺癌细胞” 明确标注器官与病理亚型，避免与其他 “COLO” 前缀细胞（如 COLO205）混淆，贴合 “结直肠癌细胞 + 系列编号 + 特性后缀” 的精准命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；55 岁（明确的中年女性背景，填补结直肠癌细胞模型中中年女性晚期患者的空白，与 COLO205（70 岁男）形成 “中年女 – 老年男” 性别年龄双重对照，与 MKN-45（62 岁女胃癌）形成 “同性别不同器官肿瘤” 对照，与 GES-1（9 个月胎儿）形成 “中年 – 胎儿” 极端年龄对照，为结直肠癌中年女性高发机制、晚期患者性别相关药物敏感性研究提供精准模型，适合模拟临床中年女性 Dukes 氏 C 型结直肠癌研究场景）
- 组织来源：器官：结肠；肿瘤分期：Dukes 氏Ｃ型（晚期，肿瘤穿透肠壁全层，伴区域淋巴结转移，无远处转移）；疾病：结直肠腺癌（核心特色为 Dukes 氏 C 型结直肠腺癌，保留晚期结直肠癌特有的 “局部浸润、淋巴结转移潜能、神经内分泌样分化” 特性；区别于 COLO205 的腹水远处转移、Caco-2 的原发无转移，可用于结直肠癌局部淋巴结转移机制研究（如肿瘤细胞穿透肠壁至淋巴结定植）、晚期结直肠癌治疗方案优化（如术前新辅助化疗），同时为临床 Dukes 氏 C 型结直肠癌诊断标志物筛选提供实验依据）
- 生长特性：半贴壁半悬浮生长（混合生长模式与 COLO205 相似，但悬浮细胞比例更高（约 40%-50%），贴壁细胞占比 50%-60%；悬浮细胞呈单个或小团状（3-5 个细胞），具备强折光性；对数生长期细胞增殖节奏中等（慢于 COLO205 的 25-30 小时，快于 Caco-2 的 60-80 小时），贴壁强度低于 COLO205、高于 SNU-216（胃癌）；传代时需同时收集贴壁与悬浮细胞，悬浮细胞活性更高（可能富集转移潜能亚群），适合开展局部转移相关实验（如淋巴结侵袭）、激素分泌调控研究）
- 细胞形态：圆形的并能折光的（核心特色为非上皮细胞样形态，与 COLO205（上皮样）、Caco-2（上皮样）显著差异；贴壁细胞呈短梭形，悬浮细胞呈圆形，胞质透亮，折光性强（需在倒置显微镜下观察，光线调节至中低倍镜可见明显亮点），核浆比大，无腺管样或印戒样结构；可通过 “圆形 + 强折光” 形态快速鉴别，避免与其他上皮样结直肠癌细胞混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “Dukes 氏 C 型特性、激素分泌功能、圆形折光形态” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如激素分泌量下降、悬浮细胞比例减少、形态向上皮样转变）
- 背景简介：COLO 320DM 细胞可产生 5 – 羟色胺、去甲肾上腺素、肾上腺素、ACTH（促肾上腺皮质激素）和甲状旁腺素，角蛋白、波形蛋白弱阳性，核心特性及应用如下：①激素分泌特色：作为少数具备神经内分泌样表型的结直肠癌细胞，激素分泌功能模拟临床 “神经内分泌型结直肠癌”（占结直肠癌 1%-2%，预后差），可用于肿瘤 – 内分泌交叉研究（如激素对肿瘤生长的自分泌调控）、激素相关肿瘤并发症机制（如癌性高钙血症、类癌综合征）研究；②分子表型：角蛋白弱阳性（提示上皮属性减弱）、波形蛋白弱阳性（提示间质属性增强），体现晚期结直肠癌 “上皮 – 间质转化（EMT）” 特征，与 COLO205（角蛋白阳性）的 EMT 程度差异显著，可用于 EMT 与转移阶段的关联研究；③应用场景：广泛用于结直肠癌局部转移机制（如淋巴结侵袭）、神经内分泌样表型调控、激素靶向治疗筛选，同时可与 COLO205 搭配开展 “局部转移 – 远处转移” 对比实验，验证药物对不同转移阶段结直肠癌细胞的疗效差异。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（明确女性性别，与性别标注一致，验证细胞身份，排除交叉污染，与 MKN-45（Amelogenin：X）共同确认女性消化道肿瘤细胞身份）; CSF1PO：11；D13S317：11；D16S539：11，12；D18S51：15；D19S433：16.2；D21S11：33.2；D2S1338：18，25；D3S1358：17；D5S818：12；D7S820：9，12；D8S1179：13；FGA：20；TH01：9；TPOX：8，9；vWA：15，18；（STR 位点以纯合子和双等位基因为主，无多等位基因（区别于 COLO205 的多等位基因），体现较低的染色体不稳定性，与 49~52 条染色体的低异倍体特征一致；可通过图谱与 ATCC CCL-220 数据比对，确认细胞身份及 Dukes 氏 C 型特性）
- 生物安全等级：1（与 COLO205、Caco-2、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞，降低实验操作门槛）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需包含贴壁细胞与悬浮细胞（无需吹散，直接计数圆形细胞团）；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥80%（悬浮细胞复苏存活率高于贴壁细胞），且激素分泌量、圆形折光形态无显著改变；T25 瓶发货时标注 “高悬浮细胞比例（正常）”，提醒用户收集上清细胞，避免活性细胞流失）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞混合生长平衡、激素分泌及转移相关实验结果，保障与 COLO205 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CCL-220，BCRC; 60108，ECACC; 87061205；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际权威机构（ATCC、ECACC）、地区性机构（BCRC）与国内机构四重保藏，细胞来源可追溯性极强，Dukes 氏 C 型特性及激素分泌表型经过多重验证，与 COLO205（多机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①与 COLO205 的培养基配方完全一致，区别于 Caco-2 的 MEM（含 NEAA）；RPMI-1640 含丰富氨基酸及葡萄糖，适配晚期结直肠癌细胞的代谢需求，支持其激素合成及混合生长模式；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中激素成分干扰细胞自身分泌功能；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞转移特性及激素分泌）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致悬浮细胞团干涸；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落加剧；与 COLO205、Caco-2、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配高悬浮比例调整操作（如换液时轻柔吸取上清），便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配高悬浮与激素分泌特性：①选择对数生长期细胞（悬浮细胞团占比 40% 左右），贴壁细胞用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，同时收集上清悬浮细胞，合并后轻柔吹打（避免破坏激素分泌相关细胞器）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL（高于 COLO205，补偿悬浮细胞冻存损失）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对激素分泌相关蛋白（如 ACTH 合成酶）的影响）
- 致瘤性：Yes, in nude mice.（明确的裸鼠成瘤能力，成瘤病理类型与 Dukes 氏 C 型一致（局部浸润性生长），成瘤周期中等（结合增殖节奏，推测皮下成瘤 3-4 周可见明显肿瘤）；建议同时构建皮下成瘤与淋巴结转移模型（模拟临床 Dukes 氏 C 型），淋巴结接种密度 1×10⁶cells / 只，28 天后观察淋巴结内肿瘤定植情况，更贴合晚期局部转移场景）
- 基因表达情况：serotonin（5 – 羟色胺，神经递质，参与肿瘤细胞增殖调控）; norepinephrine（去甲肾上腺素，激素，可能促进肿瘤侵袭）; epinephrine（肾上腺素，激素，与肿瘤血管生成相关）; adrenocorticotropic hormone (ACTH)（促肾上腺皮质激素，可诱导皮质醇分泌，参与肿瘤免疫逃逸）; parathyroid hormone（甲状旁腺素，可能导致癌性高钙血症）（基因表达与神经内分泌样表型高度关联，可通过 ELISA 法检测培养上清中激素含量（如 ACTH 参考值：10-20pg/mL/10⁶cells），与 COLO205（无激素分泌）对比，验证 “晚期结直肠癌激素分泌” 的临床特征；激素分泌量可作为细胞表型稳定性的判断指标）
- 染色体：49~52（染色体数目略高于正常二倍体（46 条），为低异倍体，与 COLO205 的 85~100 条高异倍体形成鲜明对比，体现不同转移阶段结直肠癌细胞的遗传差异；染色体数目稳定，实验设计中无需考虑高异倍体导致的靶点表达波动，适合开展精准的激素调控实验）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、激素分泌检测（如 5 – 羟色胺 ELISA）及圆形折光形态验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 COLO205 同步下单，保障 “不同转移阶段” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免任何颠簸，减少贴壁细胞脱落及悬浮细胞团破碎；到达后立即放入 37℃培养箱，36 小时内不换液，待悬浮细胞团稳定后再操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及激素分泌特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 COLO205、Caco-2 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因具备激素分泌功能，实验过程中需妥善处理含激素的培养基，避免环境污染，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①激素分泌实验设计：检测激素分泌时，需收集培养 48 小时的上清（对数生长期），3000rpm 离心 10 分钟去除细胞碎片，采用特异性 ELISA 试剂盒（如 ACTH 试剂盒货号：E-EL-H0138）检测，设置 COLO205（阴性对照）、标准品梯度，确保结果准确性；若需调控激素分泌，可添加激素合成抑制剂（如酮康唑抑制肾上腺素合成），观察细胞增殖及转移能力变化；②混合生长维护：传代时用移液管沿瓶壁缓慢吸取上清（保留底部 2mL 旧培养基），收集悬浮细胞，1000rpm 离心 5 分钟后与贴壁消化细胞合并传代；若悬浮细胞比例低于 30%，需检查培养基 pH 值（应维持在 7.2-7.4）及血清批次，排除环境因素导致的表型改变；换液频率建议 2 天 1 次，换液时保留 1/3 旧培养基（含细胞分泌的自分泌因子）；③“转移阶段” 对比实验：搭配 COLO205（腹水转移）开展实验时，可：a. 检测转移相关基因（如 MMP2（局部转移高表达）、MMP9（远处转移高表达））的表达差异，分析不同转移阶段的分子特征；b. 对比两株细胞的淋巴结侵袭能力（Transwell 小室铺 Matrigel 模拟淋巴结屏障），COLO 320DM（局部转移）的穿膜细胞数应显著高于 COLO205（腹水转移），验证局部转移细胞的淋巴结定植优势；c. 检测激素对两株细胞增殖的影响（如添加 5 – 羟色胺），COLO 320DM 可能存在自分泌增殖优势；④形态与染色体监测：长期培养中，每 5 代观察细胞形态（圆形折光细胞占比需≥60%）、检测染色体数目（49~52 范围）及激素分泌量，若发现形态异常、染色体数目偏离或激素分泌下降，需立即更换低代数种子细胞；⑤临床关联实验：利用 Dukes 氏 C 型特性，可开展术前新辅助化疗模拟实验（如用奥沙利铂预处理），检测细胞对化疗药的敏感性及激素分泌变化，为临床晚期结直肠癌治疗方案优化提供实验依据。
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