一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:HCT-8 人回盲肠癌细胞(STR 鉴定正确)(与 HCT-116(经典结肠癌、成年男性)、CW2(低增殖、女性)同属结直肠来源肿瘤细胞,区别于 GES-1(正常胃黏膜)、SNU-216(胃癌),核心特色为 “回盲肠部位(结直肠特殊区域)+67 岁男性 + 与 HRT-18 细胞同源 + 高异倍体染色体”,是结直肠癌回盲肠亚型、区域特异性发病机制研究的专属模型;可与 HCT-116(结肠、成年男)、CW2(结肠、女性)、GES-1(正常)组成 “结直肠不同部位 / 性别 / 年龄 + 正常对照” 体系,探索回盲肠与结肠肿瘤的生物学差异,同时因与 HRT-18 细胞同源,可用于细胞身份验证及文献结果交叉比对,提升实验可靠性)
- 细胞别称:HCT-8; HCT8(别称以 “HCT” 为核心前缀,与 HCT-116(“HCT” 前缀)形成结直肠癌细胞 “同前缀不同编号” 的系列关联,数字 “8” 与 HCT-116 的 “116” 形成编号区分,便于实验记录检索;无复杂变体书写,简洁易记,贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 数字” 的精准命名体系,“人回盲肠癌细胞” 明确标注器官部位与肿瘤属性,避免与 HCT-116(结肠)混淆,同时与其他 “HCT” 前缀细胞(如乳腺癌 HCT-15)形成器官特异性区分)
- 性别年龄:男;67 岁(明确的老年男性背景,与 HCT-116(成年男)形成 “老年 – 成年” 男性年龄梯度,填补结直肠癌细胞模型中老年男性回盲肠肿瘤的空白,与 CW2(女性)形成 “男性 – 女性” 性别对照,与 GES-1(9 个月胎儿)形成 “老年 – 胎儿” 极端年龄对照;回盲肠部位结合老年男性特征,可模拟临床老年男性回盲肠结直肠癌的发病场景,为该人群肿瘤的高发机制、药物耐受性研究提供精准模型)
- 组织来源:结肠;回盲肠结直肠腺癌(核心特色为明确的回盲肠部位(结直肠交界区域,临床肿瘤发生率较低但预后特殊),区别于 HCT-116(未明确具体结肠部位)、CW2(结肠),保留回盲肠腺癌特有的 “区域适应性代谢、肠道菌群互作潜能” 特性;可用于回盲肠肿瘤区域特异性机制研究(如回盲瓣结构对肿瘤侵袭的影响)、结直肠不同部位肿瘤的对比实验,同时为临床回盲肠结直肠癌诊断及治疗方案优化提供实验依据)
- 生长特性:贴壁生长(纯贴壁生长模式与 HCT-116、CW2 一致,对数生长期细胞增殖节奏未明确标注,结合同类贴壁结直肠癌细胞及染色体特征推测为中等速度(慢于 HCT-116 的 25-48 小时,快于 CW2 的 72-96 小时);贴壁强度高于 CW2、与 HCT-116 相近,细胞间连接紧密,呈单层均匀分布,无悬浮细胞或成簇生长现象;传代操作可参考常规贴壁细胞流程,无需特殊处理,适合开展回盲肠与结肠肿瘤的平行对比实验)
- 细胞形态:上皮细胞样(细胞呈多边形,排列规整呈铺路石样,胞质丰富,核浆比适中,具备回盲肠腺癌细胞典型上皮形态特征;与 HCT-116(上皮样、快速增殖排列密集)相比,排列密度相近但增殖节奏更缓,与 CW2(上皮样、生长稀疏)相比,排列更紧密;角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性(验证上皮属性),可通过形态结合部位特异性标志物(如回盲肠特异性蛋白)进一步鉴别,同时与 OS-RC-2 肾癌细胞(上皮样)形成器官特异性区分)
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞能更好保留 “回盲肠部位特性、与 HRT-18 同源身份、高异倍体染色体、低 CEA 表达” 核心特征,建议传代次数不超过 12 代,防止长期传代导致特性漂移,如贴壁能力下降、CEA 表达异常、染色体数目偏离 81~90 范围)
- 背景简介:HCT-8 [HRT-18] 细胞与 HRT-18 细胞是一样的,角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性,核心特性及应用如下:①同源身份特色:与 HRT-18 细胞为同一细胞株,可通过两株细胞的平行实验验证结果重复性,同时可追溯 HRT-18 细胞相关文献,拓展实验设计思路;角蛋白阳性验证上皮属性,确保细胞身份与回盲肠腺癌的上皮来源一致;②区域研究价值:作为少数明确回盲肠部位的结直肠癌细胞,可用于回盲肠肿瘤与结肠肿瘤的差异研究(如对肠道菌群代谢产物的响应差异);③应用场景:广泛用于结直肠区域特异性机制研究、老年男性肿瘤药物敏感性实验、细胞身份验证对照,同时可与 HCT-116 搭配开展 “不同年龄男性 + 不同结肠部位” 对比实验,探索年龄与部位对肿瘤特性的双重影响。
- STR 位点信息:Amelogenin:X(与男性性别标注矛盾,推测为 STR 检测时 Y 染色体部分缺失或标注误差,建议实验前通过 SRY 基因 PCR 或染色体核型分析补充验证性别,避免性别误差影响老年男性相关实验(如雄激素对回盲肠肿瘤的影响)); CSF1PO:12;D13S317:8,11;D16S539:12,13;D18S51:11,17;D19S433:14,16;D21S11:29,32.2;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:13;D7S820:10,11.3;D8S1179:15;FGA:22;TH01:7,9.3;TPOX:8,11;vWA:18,19;(STR 位点含特异性等位基因(如 D21S11:29,32.2、D7S820:10,11.3),与 HCT-116、CW2 的 STR 图谱差异显著,可通过图谱与保藏机构(ECACC 90032006)数据比对确认细胞身份及回盲肠特性,同时为与 HRT-18 细胞的同源性验证提供依据)
- 生物安全等级:1(与 HCT-116、CW2、GES-1 的安全等级一致,低于 HGC-27(等级 2)、WPMY-1(等级 2),操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范,便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞,降低实验操作门槛)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装(冻存管含 10% 二甲基亚砜(DMSO)无血清冻存液,经检测复苏后 48 小时存活率≥80%(与 HCT-116 的 85% 相近),且上皮样形态、角蛋白阳性特性无显著改变;T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%,确保到达后可直接用于实验或按常规节奏传代)
- 支原体检测:无(每批次细胞通过 PCR 法检测支原体(覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体),结果为阴性,避免支原体污染影响细胞生长、形态及后续实验(如区域特异性标志物检测),保障与 HCT-116、CW2 平行实验的可靠性)
- 保藏机构:ECACC; 90032006;中国典型培养物保藏中心细胞库(国际权威机构(ECACC)与国内权威机构(中国典型培养物保藏中心)双重保藏,细胞来源可追溯性强,回盲肠特性及与 HRT-18 的同源性经过严格验证,与 HCT-116(多国际机构保藏)的保藏体系互补,便于国内外科研机构协作及文献结果复现)
- 培养基:90% DMEM+10% FBS+PS(青霉素 – 链霉素)(核心特色:①采用 DMEM 培养基,与 HCT-116 的 McCoy’s 5a、CW2 的 RPMI-1640 显著不同;DMEM 含高糖(4.5g/L)及丰富氨基酸,适配回盲肠癌细胞的代谢需求,支持其贴壁生长及上皮形态维持;②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清,避免血清中区域特异性分化因子影响细胞回盲肠表型;③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素,有效预防细菌污染,不影响细胞角蛋白表达及致瘤性)
- 培养条件:气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(培养箱湿度维持在 70%-80%,定期更换水盘,防止培养基蒸发导致渗透压升高;培养箱内避免剧烈晃动,防止贴壁细胞脱落;与 HCT-116、CW2、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致,无需特殊调整,便于多细胞株并行开展 “结直肠不同部位” 对比实验)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存操作适配贴壁上皮与高异倍体特性:①选择对数生长期细胞(贴壁均匀、形态典型时),用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟,镜下见细胞间隙增大即可终止,轻柔吹打避免细胞破碎,确保形成单细胞悬液;②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞,用预冷的无血清冻存液重悬,调整浓度至 1.5×10⁶cells/mL;③冻存流程:4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时(程序降温盒)→-80℃过夜→液氮保存;复苏时 37℃水浴 1 分钟融化,离心后用预热的 DMEM 培养基重悬,直接接种,避免 DMSO 对细胞染色体稳定性及 CEA 表达的影响)
- 致瘤性:Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^8 cells).(明确的裸鼠高成瘤能力,成瘤周期短(21 天内)、成瘤率 100%,但接种密度(1×10^8cells / 只)显著高于 HCT-116(1×10⁶cells / 只)、COLO205(1×10^7cells / 只),体现回盲肠癌细胞体内成瘤对细胞密度的高需求;建议接种时选择 6-8 周龄裸鼠,接种后每周测量肿瘤体积(长 × 宽 ²/2),21 天后通过 HE 染色观察回盲肠腺癌特有的病理形态,验证体内外特性一致性,适合开展回盲肠肿瘤体内药物 efficacy 评估)
- 基因表达情况:carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days(结直肠癌标志物,表达量明确且低于 HCT-116(1ng/(1×10⁶cells・10 天))、CW2(推测更高),是已梳理结直肠癌细胞中 CEA 表达最低的模型,可用于低 CEA 表达结直肠癌的机制研究(如 CEA 合成调控);alkaline phosphatase(碱性磷酸酶,肠道细胞分化标志物,验证回盲肠细胞的肠道分化属性); The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining(角蛋白阳性,验证上皮细胞属性,与 HCT-116、CW2 的上皮属性一致)(基因表达与回盲肠部位特性关联,可通过 RT-PCR 检测回盲肠特异性基因(如 CDX2)的表达,进一步确认细胞区域身份)
- 染色体:81~90(染色体数目显著多于正常二倍体(46 条),为高异倍体,与 HCT-116(未明确,推测中低异倍体)、CW2(未明确)形成染色体倍性梯度;染色体数目稳定,实验设计中需注意高异倍体对药物靶点表达(如 EGFR)的潜在影响,适合开展肿瘤染色体不稳定性相关研究)
- 细胞货期:现货,1 周左右(库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、角蛋白染色验证及 CEA 表达检测,确保核心特性稳定;下单后 48 小时内可安排发货,可与 HCT-116(1 周货期)同步下单,保障 “不同年龄男性 + 不同结肠部位” 平行实验的时间一致性)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用,采用防震恒温泡沫箱,内置 2-8℃冰袋及温度监测卡,运输过程中避免剧烈颠簸,减少贴壁细胞脱落;到达后立即放入 37℃培养箱,24 小时后观察细胞贴壁情况,3 天内首次换液,确保细胞快速适应培养环境)/ 冻存发货(需加干冰运输费用,干冰用量按运输时长计算,国内运输一般配备 1kg 干冰,确保到达时干冰剩余量≥60%,维持细胞冻存状态) 顺丰快递(优先选择次晨达服务,最大限度缩短运输时间,降低细胞活性损失及回盲肠特性改变风险)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(与 HCT-116、CW2 等细胞限制条款一致,严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途;实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理,避免生物危害)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;该细胞实验操作需重点关注:①培养基与区域特性维护:严格使用 “90% DMEM+10% FBS+PS” 配方,不可与 HCT-116 的 McCoy’s 5a、CW2 的 RPMI-1640 混用,避免因培养基差异导致细胞回盲肠表型丢失;培养过程中可通过检测碱性磷酸酶活性(比色法)验证细胞肠道分化属性,活性下降提示表型漂移;②同源细胞应用:因与 HRT-18 细胞同源,可同时培养两株细胞开展交叉验证实验(如 STR 图谱比对、CEA 表达量检测),确保实验结果的可靠性;引用文献时可同时参考 HCT-8 与 HRT-18 的相关研究,丰富实验设计依据;③“不同部位 / 年龄” 对比实验:搭配 HCT-116(成年男、结肠)开展实验时,可:a. 检测回盲肠与结肠特异性标志物(如回盲肠 CDX2 高表达、结肠 CK20 高表达)的差异,分析区域特异性分子特征;b. 对比两株细胞对化疗药(如氟尿嘧啶)的 IC50 值(HCT-8 因老年来源可能 IC50 更高,耐药性更强),评估年龄与部位对药物敏感性的双重影响;c. 检测 CEA 表达量与肿瘤恶性程度(如 Transwell 侵袭能力)的关联,验证低 CEA 表达是否与回盲肠肿瘤特性相关;④染色体与性别验证:长期培养中,每 5 代通过染色体核型分析(观察数目是否在 81~90 范围)、SRY 基因 PCR 验证性别(解决 Amelogenin:X 与男性标注的矛盾),若染色体数目异常或性别验证为女性,需立即更换低代数种子细胞;⑤致瘤性实验优化:开展裸鼠成瘤实验时,需严格按 1×10^8cells / 只的密度接种,可提前用 Matrigel 包裹细胞提升成瘤效率;成瘤后除测量体积外,可通过免疫组化检测回盲肠特异性蛋白,验证肿瘤的区域属性。
评价
目前还没有评价