一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：SK-MES-1 人肺鳞癌细胞（STR 鉴定正确）（与 PC-9（肺腺癌、有分化）、NCI-H520（肺鳞癌原发、p53 低表达）同属肺来源肿瘤细胞，区别于 HFL-1（正常肺成纤维）、BEAS-2B（正常支气管上皮），核心特色为 “65 岁男性肺鳞癌胸水转移 + 50 小时慢倍增 + DMEM 培养基 + 明确血型 HLA 分型”，是老年男性肺鳞癌转移机制、肺癌病理亚型（鳞癌 vs 腺癌）差异、免疫相关研究的关键模型；可与 PC-9（肺腺癌、有分化）、NCI-H520（肺鳞癌原发）、HFL-1（正常）组成 “肺细胞 – 病理亚型（鳞癌 / 腺癌）+ 转移状态（转移 / 原发）+ 年龄（老年 / 未明确）+ 正常对照” 体系，探索年龄、转移状态对肺鳞癌特性的影响及免疫分型（HLA）与肿瘤的关联，同时因胸水转移背景，适合开展肺癌胸水微环境适应机制研究）
- 细胞别称：SK MES 1; SKMES-1; SK-Mes-1; SK-MES1; SKMES1; SK-MES; SKMES；人肺鳞癌细胞（别称以 “SK-MES-1” 为核心，空格、连接符及大小写差异为常见书写变体，“SK” 前缀与 SK 系列肿瘤细胞（如 SK-OV-3 卵巢癌细胞）形成系列关联，统一标注便于实验记录检索；“人肺鳞癌细胞” 明确标注器官、病理亚型，贴合 “肺癌细胞 + 字母数字组合 + 病理亚型” 体系，避免与 PC-9 的 “肺腺癌”、NCI-H520 的 “肺鳞癌原发” 混淆，精准定位肺鳞癌胸水转移亚型）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；65 岁（明确的老年男性背景，填补肺鳞癌细胞模型中 “60 岁以上老年男性胸水转移患者” 空白，与 PC-9（年龄未明确）形成 “老年 – 未明确” 年龄对照，与 NCI-H520（中老年推测）形成 “老年 – 中老年” 年龄梯度，与 HT-29（44 岁女性肠癌）形成 “老年男肺癌 – 中年女肠癌” 性别年龄双重对比；65 岁为肺鳞癌高发且易出现胸水转移的临床阶段（吸烟史累积效应），可用于老年男性肺鳞癌晚期转移机制研究，适合模拟临床老年男性肺鳞癌胸水转移的研究场景）
- 组织来源：肺；病理亚型：肺鳞状细胞癌；转移位置：胸水（明确为肺鳞癌胸水转移灶来源，保留肺鳞癌转移特有的 “液体微环境适应、高侵袭性、鳞癌角质化残留” 特性；区别于 PC-9 的肺腺癌（未明确转移）、NCI-H520 的肺鳞癌原发灶，可用于肺鳞癌胸水转移机制（如肿瘤细胞在胸水中的存活定植）、肺鳞癌转移与原发的分子差异对比，同时为临床老年男性肺鳞癌胸水转移患者的诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 PC-9、NCI-H520 一致，核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 慢倍增”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖缓慢（倍增时间～50 小时，与 PC-9 的 35-50 小时上限一致，慢于 NCI-H520 的 32-60 小时中速区间），无有限传代限制（永生化癌细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度高于 PC-9（腺癌，贴壁较弱）、与 NCI-H520（鳞癌原发，贴壁较强）相近，细胞呈紧密铺路石样排列（鳞癌上皮特征，因转移特性略松散于原发灶）；对数生长期为接种后 36-100 小时，传代需每 36 小时镜检 1 次，待密度达 70% 时按 1:2 传代（低于 PC-9 的 1:2-1:3），传代时需适度消化（避免过度消化破坏鳞癌特有的细胞连接），适合开展长周期转移实验（如胸水微环境共培养）及免疫相关实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列紧密呈铺路石样，胞质丰富，含肺鳞癌细胞特有的角质小体（光镜下可见），核浆比大于 PC-9（腺癌），体现鳞癌与腺癌的形态差异；与 PC-9（腺癌上皮样、有分化、排列规整）相比，无分化相关的规则间隙且含角质小体，与 NCI-H520（鳞癌原发、排列紧密）相比，细胞间隙略宽（转移细胞特征）；可通过 “上皮样 + 角质小体 + 慢倍增” 结合鳞癌标志物（如 CK5/6）快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺鳞癌特异性标志物（如 p63）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “慢倍增、胸水转移特性、鳞癌形态” 核心属性，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如增殖速度加快（＜40 小时）、角质小体减少、转移相关基因（如 MMP2）表达下降）
- 背景介绍：SK-MES-1 细胞系 1970 年由 G. Trempe 和 L. J. Old 从老年男性肺鳞癌患者胸水中分离建立，核心特性及应用如下：①年龄转移特色：65 岁老年男性 + 胸水转移背景，模拟临床老年肺鳞癌转移高发人群，可用于老年肿瘤微环境（如免疫衰老）与转移关联研究；②免疫特色：明确 HLA 分型（A3, Aw30, B7, B27），适合肿瘤免疫实验（如 T 细胞识别、免疫检查点抑制剂筛选）；③应用场景：广泛用于老年男性肺鳞癌胸水转移机制、肺癌免疫分型研究、鳞癌与腺癌（PC-9）病理差异对比，同时可与 NCI-H520（鳞癌原发）搭配开展 “原发 / 转移” 对比实验，探索鳞癌转移的分子演变）
- STR 位点信息：Amelogenin：X,Y（明确男性核型，与性别年龄栏一致，无性别矛盾问题，验证细胞身份，排除交叉污染，与 PC-9（未明确）、NCI-H520（X 待确认）形成性别核型对照）; CSF1PO：12（纯合子，与 NCI-H520 的 10 纯合子差异）；D13S317：11（纯合子，与 NCI-H520 的 10,11 差异）；D16S539：13（纯合子，与 PC-9 的未明确位点差异）；D18S51：17（纯合子，与 NCI-H520 的 18,19 差异显著）；D19S433：14（纯合子）；D21S11：29，30；D2S1338：19（纯合子，与 NCI-H520 的 17,19 差异）；D3S1358：16（纯合子）；D5S818：11（纯合子）；D7S820：8（纯合子）；D8S1179：13，14；FGA：20，24；TH01：6，9.3（与 NCI-H520 的 10 纯合子差异）；TPOX：8（纯合子）；vWA：14（纯合子）；（STR 位点含多个纯合子，与 PC-9、NCI-H520 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC HTB-58 数据比对，确认细胞身份及肺鳞癌转移属性）
- 生物安全等级：1（与 PC-9、NCI-H520、HFL-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因是胸水转移细胞，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 72 小时存活率≥80%（慢增殖细胞复苏后贴壁及增殖启动时间长），且上皮样形态、鳞癌特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%（与 PC-9 相近），标注 “65 岁男性肺鳞癌胸水转移，~50 小时慢倍增，明确 HLA 分型”，提醒用户适配慢增殖节奏及利用免疫分型开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞慢增殖过程、鳞癌标志物表达及免疫相关实验结果，保障与 PC-9、NCI-H520 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; HTB-58，DSMZ; ACC-353，ECACC; 91091804，ECACC; 93120837（国际权威机构（ATCC、DSMZ、ECACC 双编号）多重保藏，细胞来源可追溯性极强，老年肺鳞癌转移特性、HLA 分型经过严格验证，与 PC-9 的未明确保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：DMEM＋10% FBS＋1% P/S（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 DMEM 培养基，与 PC-9 的 DMEM 一致，区别于 NCI-H520 的 RPMI-1640；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配慢增殖鳞癌细胞的营养配比，支持其角质化过程及转移相关蛋白合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中免疫因子干扰 HLA 相关实验；③1% P/S 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞鳞癌表型及致瘤性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 PC-9、NCI-H520 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他肺细胞培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “病理亚型 / 转移状态” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配上皮细胞特性与慢增殖需求：①选择对数生长期后期细胞（密度 70%，增殖活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（长于 PC-9 的 2-3 分钟，因贴壁强度略高），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL（高于 PC-9 的 2×10⁶cells/mL，补偿慢增殖导致的复苏后生长缓慢）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对细胞角质化过程及 HLA 分子表达的影响）
- 倍增时间：~50 hours（增殖速度慢，与 PC-9 的 35-50 小时上限一致，慢于 NCI-H520 的 32-60 小时中速区间，对数生长期为接种后 36-100 小时，需每 36 小时镜检 1 次细胞密度，传代间隔 5-7 天；实验设计需适配长周期，如药物处理时间建议 96-120 小时（4-5 天），免疫共培养实验需延长至 72 小时以上，确保细胞与免疫细胞充分作用）
- 抗原表达情况：Blood Type O; Rh+（血型抗原 O 型、Rh 阳性，与 PC-9（未明确）、NCI-H520（未明确）血型形成差异，可通过血型鉴定实验辅助验证细胞身份，避免与其他肺癌细胞交叉污染；血型抗原与肿瘤免疫相关，可用于老年肺癌患者 ABO 血型与免疫细胞浸润关联研究）; HLA A3, Aw30, B7, B27（HLA 分型明确，核心免疫特色：①可用于肿瘤免疫实验：如用 HLA-A3 限制性抗原肽负载细胞，检测特异性 T 细胞的杀伤活性；②免疫治疗研究：筛选针对 HLA-B7/B27 的免疫检查点抑制剂（如 PD-1 抗体），评估药物对细胞增殖的抑制效果；③为细胞身份多重验证提供免疫表型依据）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、鳞癌标志物检测（CK5/6 阳性）及 HLA 分型验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因慢增殖，建议比 PC-9（1 周货期）提前 3 天下单，保障 “不同增殖速度” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，48 小时内不观察不换液，待细胞完全适应环境后再操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及慢增殖特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 PC-9、NCI-H520 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验过程中需妥善处理含转移细胞的培养基，避免环境暴露，若涉及免疫实验，需按生物安全规范处理免疫细胞废弃物）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①慢增殖实验设计：开展药物敏感性实验时，需延长处理时间至 96 小时（PC-9 为 72 小时），设置药物浓度梯度时需覆盖更低浓度（如 0.001-10μM），避免高浓度药物导致细胞快速死亡掩盖慢增殖特性；检测细胞活性推荐使用 CCK-8 法（比 MTT 法更适合慢增殖细胞，检测窗口宽）；②免疫相关实验：利用 HLA 分型开展实验时，可：a. 用 HLA-A3 抗体（货号：ab23971）通过流式细胞术检测细胞表面 HLA-A3 分子表达，验证分型准确性；b. 构建 HLA-A3 限制性肿瘤抗原肽（如 MAGE-A3 肽）刺激的 CTL 细胞，通过 LDH 释放法检测 CTL 对 SK-MES-1 的杀伤效率；c. 对比 PC-9（无 HLA 分型），分析 HLA 分型对免疫治疗敏感性的影响；③病理亚型对比实验：与 PC-9（肺腺癌）对比时，可：a. 检测鳞癌标志物（CK5/6、p63，SK-MES-1 高表达）与腺癌标志物（TTF-1、Napsin A，PC-9 高表达）的差异，验证病理亚型特性；b. 对比两株细胞对化疗药的敏感性（如吉西他滨对鳞癌更敏感，培美曲塞对腺癌更敏感），计算 IC50 值，为临床亚型特异性治疗提供依据；c. 检测转移相关基因（如 CXCR4，SK-MES-1 高表达）的差异，分析转移状态对基因表达的影响；④长期培养监测：每 5 代检测鳞癌
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