一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：MIA-PACA-2 人胰腺癌细胞（与 JF-305（通用胰腺癌细胞、贴壁生长）、HPAC（胰腺腺泡癌、多因子依赖）同属胰腺来源上皮样肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤间皮）、TPC-1（甲状腺乳头状癌），核心特色为 “65 岁男性白人胰腺癌细胞 + 半贴壁生长 + 双血清（FBS + 马血清）DMEM 培养基 + 多文献验证倍增时间 + CSF-I / 纤溶酶原激活剂表达 + 多机构保藏”，是胰腺癌生长特性研究、双血清培养体系适配性、老年胰腺癌机制分析的关键模型；可与 JF-305（贴壁 / 单血清）、HPAC（腺泡癌 / 多因子）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “胰腺癌细胞 – 半贴壁 / 贴壁 + 双血清 / 常规培养 + 老年 / 中年 + 正常对照” 体系，探索半贴壁生长特性的分子机制及双血清对胰腺癌细胞的调控作用，同时因明确年龄及基因表达，适合开展老年胰腺癌基因功能及临床转化研究）
- 细胞别称：MIA-PaCa-2; MIA-PACA-2; MIA-Pa-Ca-2; MIA Paca2; MIA PaCa2; MiaPaCa-2; MIAPACA-2; MiaPaca.2; MiaPaCa2; Miapaca2; MIAPaCa2; MIAPACA2; Mia PACA 2; MIAPaCa-2; PaCa2；人胰腺癌细胞（别称以 “MIA-PACA-2” 为核心，大小写、连接符、空格差异为常见书写变体，“人胰腺癌细胞” 需结合背景补充 “未明确病理亚型（推测为导管相关）” 标注，避免与 JF-305 的 “通用型”、HPAC 的 “腺泡癌” 混淆；贴合 “胰腺癌细胞 + 字母数字组合 + 生长特性标签” 的命名体系，通过 “半贴壁”“双血清” 标注强化与常规胰腺癌细胞的差异，精准定位胰腺癌生长特性及特殊培养需求的研究场景）
- 种属来源：人；种族背景：白人（明确白人种族背景，与 JF-305（未明确）、HPAC（白人）形成 “白人 – 未明确” 种族对照，适合开展胰腺癌种族差异与基因表达（如 CSF-I）的关联研究；细胞群体为单一胰腺癌细胞系，种属纯净，STR 鉴定排除交叉污染，可稳定表现白人老年胰腺癌特有的生物学特性（如衰老相关通路激活伴随 CSF-I 高表达），无外源细胞干扰）
- 性别年龄：男；65 岁（明确的老年男性背景，填补胰腺癌细胞模型中 “60-70 岁白人男性明确年龄” 空白，与 JF-305（中年至中老年推测）形成 “明确老年 – 推测中年” 年龄对照，与 HPAC（64 岁）形成 “同龄层不同生长特性” 对照，与 CFPAC-1（26 岁男）形成 “老年男 – 年轻男同性别年龄梯度” 对比；65 岁为胰腺癌晚期高发年龄，且为原发肿瘤组织建系，可用于模拟临床老年男性胰腺癌晚期患者的肿瘤特性，开展年龄相关的治疗耐药（如双血清依赖导致的药物敏感性差异）机制研究）
- 组织来源：胰腺（明确为胰腺原发肿瘤组织来源，未提及具体病理亚型（推测为导管相关，因无腺泡癌特异性标志物），保留胰腺癌特有的 “上皮起源、胰腺微环境适应能力”，同时具备半贴壁生长的独特属性；区别于 JF-305 的未明确原发 / 转移、HPAC 的腺泡上皮癌，可用于胰腺癌半贴壁生长机制研究、老年胰腺癌原发灶与年轻患者（CFPAC-1）的分子差异对比，为临床老年胰腺癌诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：半贴壁生长（核心特色，与 JF-305、HPAC 的纯贴壁差异显著）：①生长模式：10 代以内细胞呈 “贴壁细胞为主 + 少量悬浮细胞” 混合生长（贴壁细胞占比 70%-80%，悬浮细胞呈小簇状，非污染），悬浮细胞可通过离心收集后重新接种，仍能贴壁生长，体现 “贴壁 – 悬浮” 双向潜能；②增殖特性：倍增时间 25.7-40 小时（多文献验证，数据跨度大，与培养基血清浓度相关：含血清时 25.7-26 小时，无血清时 18-40 小时），快于 JF-305 的 30-45 小时下限、HPAC 的 23-44 小时上限，增殖速度受血清类型影响显著；③传代操作：因半贴壁特性，传代时需 “贴壁细胞消化 + 悬浮细胞离心” 两步处理：贴壁细胞用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3-4 分钟（长于 JF-305 的 2-3 分钟），收集消化液后，再离心收集培养上清中的悬浮细胞，合并后计数传代；传代比例 1:2-1:3（低于 JF-305 的 1:3-1:4），传代后 24 小时内贴壁细胞占比可恢复至 60% 以上，适合开展细胞黏附 – 脱落调控机制研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（贴壁细胞呈多边形，排列松散呈铺路石样，胞质丰富；悬浮细胞呈小簇状（3-5 个细胞聚集），形态与贴壁细胞一致，无 JF-305 的紧密排列、HPAC 的分散生长特征；核浆比大于 JF-305（中年）、小于 HPAC（同龄腺泡癌），体现老年半贴壁癌细胞的形态特征；可通过 “上皮样 + 半贴壁生长 + CSF-I 阳性” 快速鉴别，同时与 JF-305 通过生长特性（半贴壁 vs 贴壁）、与 HPAC 通过病理亚型标志物（如胰蛋白酶原阴性）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “半贴壁特性、双血清依赖、基因表达谱” 核心属性，建议传代次数不超过 10 代，防止长期传代导致特性漂移，如贴壁细胞占比下降（＜50%）、倍增时间延长（＞45 小时）、CSF-I 表达降低，确保细胞始终贴合半贴壁生长的实验需求）
- 背景简介：MIA-PACA-2 细胞 1975 年由 A. Yunis 等从 65 岁白人男性胰腺肿瘤组织建系，核心特性及应用如下：①生长特性价值：作为罕见半贴壁生长胰腺癌细胞系，可用于研究细胞黏附分子（如 E-cadherin）表达与贴壁能力的关联，探索肿瘤细胞 “上皮 – 间质转化” 过程中的半悬浮状态机制；②双血清特色：需同时添加 FBS 与马血清才能维持最佳生长，适合开展血清成分对肿瘤细胞生长的调控研究（如马血清中的未知因子协同 FBS 促进增殖）；③应用场景：广泛用于老年胰腺癌基础机制、半贴壁肿瘤细胞药物筛选（需同时考虑贴壁与悬浮细胞的药物敏感性）、CSF-I 相关肿瘤微环境研究，同时可作为 “双血清培养” 的阳性对照，优化其他难培养肿瘤细胞的培养基配方）
- STR 鉴定：STR 鉴定通过（核心保障：①通过至少 16 个核心 STR 位点检测（如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等），结果与 ATCC CRL-1420、DSMZ ACC-733 标准图谱一致，Amelogenin：Y（确认男性核型，与性别标注一致），无 JF-305、HPAC 的 STR 位点特征，排除交叉污染；②可通过对比多机构（ATCC/DSMZ/ECACC）的 STR 数据，验证细胞身份的一致性，尤其适合跨国协作研究及文献结果复现，避免因细胞系混淆导致实验结论偏差）
- 生物安全等级：1（与 JF-305、HPAC 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级规范，因含半悬浮细胞，换液时需轻柔操作，避免将贴壁细胞冲脱；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，含悬浮细胞的废液需直接灭菌，无需额外离心）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需同时收集贴壁消化细胞与悬浮细胞，合并后台盼蓝染色计数，确保计数误差＜8%（高于 JF-305 的 5%）；冻存管含 10% DMSO 无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥80%（低于 JF-305 的 85%），且半贴壁比例（贴壁 70%-80%）、基因表达无改变；T25 瓶发货时标注 “胰腺癌细胞，半贴壁生长，需双血清培养基，65 岁男白人”，提醒用户关注特殊生长特性及培养配方）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体，结果为阴性，避免污染叠加半贴壁特性导致的生长异常，保障与 JF-305、HPAC 平行实验的可靠性，尤其适合多细胞系生长特性对比实验）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1420，DSMZ; ACC-733，ECACC; 85062806，JCRB; JCRB00（国际四大权威机构保藏，细胞来源可追溯性极强，半贴壁特性、双血清需求经过多机构验证，与 JF-305 的未明确保藏、HPAC 的单机构保藏形成显著优势，便于国内外科研协作及高质量文献发表）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+2.5% 马血清 + 双抗（核心特色，与 JF-305 对比）：①双血清配方：采用 DMEM 培养基（与 JF-305 的 RPMI-1640 差异），需同时添加 10% FBS 与 2.5% 马血清（缺一不可，实验验证：缺失马血清时细胞增殖下降 50%，贴壁比例降至 40%），马血清可提供 FBS 中缺乏的黏附相关因子（如某些糖蛋白），支持半贴壁生长；②成分要求：FBS 选择低内毒素批次（南美来源优先），马血清需选择透析型（去除小分子干扰物质），双抗终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素；培养基需在 2-8℃避光保存，开封后 1 周内使用完毕（马血清成分易降解）；③应用价值：适合开展血清成分筛选实验（如 FBS / 马血清浓度梯度组合），探索不同血清对肿瘤细胞贴壁能力的影响，同时为其他半贴壁肿瘤细胞的培养基优化提供参考）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 JF-305、HPAC 一致，湿度需维持在 75%-85%（高于 JF-305 的 70%-80%），防止培养基蒸发导致血清浓度异常；培养箱需稳定控温（波动≤±0.5℃），避免温度变化影响细胞贴壁 – 悬浮平衡；因半贴壁特性，培养瓶需垂直放置，避免倾斜导致悬浮细胞聚集在一侧）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配半贴壁特性）：①细胞收集：同时收集贴壁消化细胞与悬浮细胞，1000rpm 离心 8 分钟（长于 JF-305 的 5 分钟），彻底去除培养基残留；②冻存浓度：用预冷无血清冻存液重悬至 3×10⁶cells/mL（高于 JF-305 的 2.5×10⁶），补偿复苏损失；③冻存流程：4℃平衡 60 分钟→-20℃放置 4 小时→-80℃过夜→液氮；复苏时 37℃水浴 2 分钟，立即用含双血清的 DMEM 重悬，接种后 24 小时内不换液，帮助细胞恢复贴壁能力）
- 倍增时间：25.7-40 小时（多文献 / 机构验证，数据差异源于培养条件）：①浓度依赖特性：含 10% FBS+2.5% 马血清时 25.7-26 小时（最快），仅含 10% FBS 时 30-40 小时，无血清时 18-40 小时（波动大）；②实验设计：需根据实验目的选择血清浓度，如短期药物筛选用标准双血清（25.7 小时倍增），血清剥夺实验用无血清培养基（18-40 小时）；与 JF-305 的推测倍增相比，数据更精准，适合开展精准时间依赖型实验（如细胞周期同步化））
- 基因表达情况：human colony stimulating factor, subclass I (CSF-I)（集落刺激因子 I）、plasminogen activator（纤溶酶原激活剂）：①功能关联：CSF-I 可调控肿瘤相关巨噬细胞浸润（老年胰腺癌微环境特征），纤溶酶原激活剂促进细胞外基质降解（与半贴壁细胞的局部侵袭能力相关）；②应用场景：通过 Western Blot 检测 CSF-I 表达，分析老年胰腺癌微环境调控机制；通过纤溶酶活性检测（如发色底物法），探索其与细胞半贴壁生长的关联，同时可作为细胞身份验证的补充指标）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过双血清培养基适应性培养、半贴壁比例验证（70%-80%）及支原体检测，核心特性稳定；因需双血清配置，下单后需提前 1 天准备培养基，可与 JF-305 同步下单，无需额外等待）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运费，采用双层防震包装，内置 2-8℃冰袋，附带单独的双血清试剂（冰袋冷藏）；到达后立即配制完整培养基，接种后 24 小时内不移动；因半贴壁特性，运输时需保持培养瓶垂直，避免悬浮细胞聚集）/ 冻存发货（加干冰费用，干冰用量加倍（常规 1kg→2kg），确保到达时干冰剩余量≥70%） 顺丰次晨达，缩短运输时间减少半贴壁平衡破坏
- 供应限制：仅限于科学研究，严禁临床使用；因双血清需求，额外限制：①不可用于无血清临床治疗实验；②马血清需按动物源性试剂规范管理；③实验数据发表需标注培养基配方及保藏机构信息
- 特别说明：核心建议：①半贴壁细胞操作：a. 换液方法：倾斜培养瓶，轻轻吸出上清（保留底部 1-2mL），避免吸走悬浮细胞，再加入新鲜双血清培养基；b. 纯度维持：每代去除过度悬浮的细胞簇（直径＞100μm），防止细胞向完全悬浮漂移；②双血清优化实验：设置 FBS（5%/10%/15%）与马血清（1%/2.5%/5%）浓度组合，培养 3 代后检测增殖速度与贴壁比例，筛选个性化配方；③老年胰腺癌对比：与 CFPAC-1（26 岁）对比时，可：a. 检测衰老基因（p16、p21，MIA-PACA-2 高表达）；b. 对比 CSF-I 介导的巨噬细胞招募能力（Transwell 共培养实验）；c. 分析药物敏感性（如吉西他滨 IC50，MIA-PACA-2 可能更高）；④长期监测：每 5 代检测半贴壁比例、倍增时间及 CSF-I 表达，若特性异常，立即更换低代数细胞；⑤培养基注意事项：不可用 RPMI-1640 替代 DMEM（实验验证：替换后贴壁比例降至 30%），马血清不可用其他血清替代，确保培养体系稳定。
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