一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：PANC 05.04 人胰腺癌细胞（与 SW1990（胰腺癌脾转移、100% 空气）、PANC-1（胰管原发癌、常规 DMEM）同属胰腺来源贴壁生长上皮样肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤间皮）、TPC-1（甲状腺乳头状癌），核心特色为 “胰腺来源 + 上皮细胞样形态 + 1640+15% FBS + 重组胰岛素培养基 + 常规 CO₂气相 + 10 代以内低代数”，是胰腺癌基础机制研究、胰岛素调控肿瘤生长、高血清培养体系适配的关键模型；可与 SW1990（脾转移 / 空气气相）、PANC-1（胰管原发 / 常规 DMEM）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “胰腺癌细胞 – 原发 / 转移 + 高血清 / 常规培养 + CO₂/ 空气气相 + 正常对照” 体系，探索胰岛素对胰腺癌细胞的调控作用及高血清培养的适配机制，同时因常规气相，适合开展胰腺癌通用实验（如转染、药物筛选）及多细胞系平行对比研究）
- 细胞别称：Panc 05.04；人胰腺癌上皮细胞（别称以 “Panc 05.04” 为核心，大小写差异为常见书写变体，“人胰腺癌上皮细胞” 明确标注 “胰腺器官 + 上皮细胞属性”，与 SW1990 的 “腺癌 II 期脾转移”、PANC-1 的 “胰管上皮细胞癌” 形成差异；贴合 “胰腺癌细胞 + 字母数字 + 上皮属性” 的命名体系，通过 “上皮细胞” 标签强化细胞起源特征，避免与 SW1990 的转移属性、PANC-1 的胰管亚型混淆，精准定位胰腺癌上皮细胞基础研究场景）
- 种属来源：人（STR 鉴定确认无交叉污染，细胞群体为单一胰腺癌细胞系，种属纯净，可稳定表现人胰腺癌上皮细胞特有的生物学特性（如上皮分化倾向、胰腺相关标志物表达），区别于 SW1990 的脾转移属性、PANC-1 的胰管亚型特性，无外源细胞干扰，实验结果重复性及可靠性强，尤其适合胰腺癌上皮细胞通用机制研究）
- 性别年龄：未明确（建议实验前通过 STR 位点 Amelogenin 基因或 SRY 基因 PCR 验证性别，参考临床胰腺癌高发年龄（50-70 岁）及同类胰腺癌细胞系特征，推测为中年至中老年个体，与 SW1990（中年至中老年推测）形成 “同年龄层不同转移状态” 对照，与 PANC-1（56 岁男）形成 “推测 – 明确” 年龄性别对比，与 PATU 8988t（64 岁女）形成 “中年 – 老年” 年龄梯度；年龄背景适配胰腺癌高发人群，适合开展年龄相关的肿瘤上皮特性及治疗敏感性研究）
- 组织来源：胰腺（明确为胰腺来源，未提及具体病理亚型（如腺泡 / 导管）及转移背景，推测为胰腺癌原发灶，保留胰腺癌细胞特有的 “上皮起源、胰腺微环境适应能力”；区别于 SW1990 的脾转移灶、PANC-1 的胰管原发灶，可用于胰腺癌原发机制研究（如胰腺上皮癌变过程）、胰腺癌不同转移状态（原发 vs 脾转移）的分子差异对比，同时为临床胰腺癌原发灶上皮细胞相关研究提供通用实验模型，可通过补充实验（如亚型标志物检测）明确其病理分类，提升实验精准性）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 SW1990、PANC-1 一致，但核心特色为 “上皮样贴壁 + 高血清依赖 + 胰岛素调控增殖”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖节奏未明确标注，结合高血清（15% FBS）及胰岛素添加特性，推测倍增时间 30-40 小时（快于 SW1990 的 35-45 小时，与 PANC-1 的 38-56 小时部分重叠），无有限传代限制（永生化肿瘤细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系），增殖均一性高（上皮样细胞排列规整，无 SW1990 的低植板率异质性）；②贴壁特性：贴壁强度介于 SW1990（中等贴壁）与 PANC-1（易聚团贴壁）之间，细胞呈典型上皮样铺路石样排列（无 PANC-1 的聚团、SW1990 的均匀紧密排列）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 80% 时按 1:3 传代（高于 SW1990 的 1:2），传代时常规消化（0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟），无需特殊处理（区别于 SW1990 的空气气相管理），适合开展需高效传代的实验（如胰岛素调控增殖实验））
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，无 SW1990 的均匀紧密排列、PANC-1 的聚团生长，核浆比小于 SW1990（脾转移）、大于 PANC-1（胰管原发），体现胰腺癌细胞通用上皮形态特征；与 SW1990（紧密上皮样）相比，排列更松散且无转移细胞的形态特征，与 PANC-1（聚团上皮样）相比，无聚团且形态更均一；可通过 “上皮样 + 胰腺通用标志物（如 CK18、CEA）阳性” 快速鉴别，同时与 SW1990 通过转移标志物（如 CCL19 阴性）、与 PANC-1 通过聚团特性（无 vs 有）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “上皮形态、高血清依赖、胰岛素响应” 核心属性，建议传代次数严格控制在 10 代以内，防止长期传代导致特性漂移，如上皮形态向梭形转变、胰岛素调控增殖能力下降（增殖速度变化＞20%）、胰腺相关标志物（如 CK18）表达降低，确保细胞始终贴合胰腺癌上皮细胞的实验需求）
- STR 鉴定：STR 鉴定通过（核心保障：①通过至少 16 个核心 STR 位点检测（如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等），结果与胰腺癌细胞标准图谱一致，无 SW1990、PANC-1 的 STR 位点特征，排除交叉污染；②可通过对比国内胰腺癌细胞库（如中国医学科学院基础医学研究所细胞库）的通用胰腺癌细胞 STR 数据，辅助确认细胞身份，同时与 SW1990 的 “脾转移 STR”、PANC-1 的 “胰管原发 STR” 对比，明确 PANC 05.04 的独特位点，避免与亚型特异或转移型细胞系混淆，确保实验用细胞身份准确）
- 生物安全等级：1（与 SW1990、PANC-1 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染；因培养基含重组胰岛素，需注意试剂储存（-20℃分装保存），避免反复冻融影响活性）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时因上皮细胞排列规整，轻柔吹打即可获得单细胞悬液，计数准确性高（误差＜5%），无 SW1990 的低植板率计数干扰、PANC-1 的聚团计数偏差；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥85%（与 PANC-1 一致，高于 SW1990 的 80%），且上皮样形态、胰岛素响应特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-75%，标注 “人胰腺癌上皮细胞，1640+15% FBS + 重组胰岛素，建议检测上皮标志物”，提醒用户关注高血清 + 胰岛素配方及上皮属性）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响高血清培养下的增殖及胰岛素调控实验，保障与 SW1990、PANC-1 平行实验的可靠性，尤其适合多细胞系同步开展的对比研究）
- 保藏机构：未明确标注（建议实验前咨询供应商获取保藏机构信息（如 ATCC、DSMZ 或国内胰腺癌细胞库），通过保藏机构数据库查询细胞详细背景（如性别年龄、病理亚型、是否含胰腺癌典型突变（KRAS、p53）），补充完善细胞基础信息，提升实验可追溯性与结果重复性，与 SW1990 的未明确保藏、PANC-1 的 ATCC 保藏形成互补，便于国内外科研协作及文献结果复现）
- 培养基：1640（RPMI-1640）+15% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）+0.01mg/ml rh insulin（重组胰岛素）（核心特色，与 SW1990、PANC-1 对比）：①高血清 + 胰岛素配方：采用 RPMI-1640 培养基，区别于 SW1990 的 L-15、PANC-1 的 DMEM；15% FBS（高于常规 10%）提供充足营养支持上皮细胞增殖，0.01mg/ml 重组胰岛素激活胰岛素信号通路（如 PI3K-AKT），调控胰腺癌细胞代谢及生长，适配上皮细胞能量需求；②成分要求：FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清（建议选用南美来源），重组胰岛素需用无血清 1640 培养基稀释至工作浓度，现配现用；PS 终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素；③配制与储存：培养基需在 2-8℃避光保存，开封后 1 周内使用完毕（胰岛素易降解），无需特殊气相平衡（常规 CO₂环境即可），操作便利性高，仅需注意胰岛素的添加时机（培养基预热后再加入，避免变性））
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 PANC-1 一致，与 SW1990 的 100% 空气差异显著）：①环境控制：湿度维持在 70%-80%（常规标准），CO₂浓度稳定在 5%，无需像 SW1990 那样特殊控制气相；培养箱控温波动≤±0.5℃，避免温度变化影响胰岛素活性及细胞增殖；②环境兼容性：可与 PANC-1、PATU 8988t 等 CO₂依赖型细胞共同放置，无需单独隔离，便于多细胞株并行开展 “胰腺癌细胞多类型” 对比实验；③pH 监测：RPMI-1640 培养基 pH 稳定范围 7.2-7.4，若发现颜色异常（变黄 / 变紫），需及时更换新鲜培养基，同时检查 CO₂供应是否正常）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配高血清 + 胰岛素特性）：①细胞收集：选择对数生长期中期细胞（密度 75%，胰岛素响应最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②冻存浓度：1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL（与 PANC-1、SW1990 一致）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的含胰岛素完整培养基重悬直接接种，避免 DMSO 影响胰岛素受体（如 IRβ）活性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640+15% FBS + 胰岛素适应性培养、支原体检测及细胞形态验证（上皮样），核心培养特性稳定，与 SW1990、PANC-1 的 1 周货期一致；因需添加重组胰岛素，下单后需提前 1 天准备培养基，可与 SW1990、PANC-1 同步下单，通过调整 SW1990 的接种时间（早 2 天），保障 “胰腺癌细胞多类型” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，附带单独的重组胰岛素试剂（-20℃冰袋冷藏）；运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少上皮样贴壁细胞脱落；到达后立即将胰岛素加入基础培养基配制完整体系，放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察贴壁状态，48 小时内首次换液，无需像 SW1990 那样特殊换气）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输配备 1kg 干冰即可，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及胰岛素受体活性波动风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 SW1990、PANC-1 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因培养基含重组胰岛素，额外限制：①不可用于胰岛素相关的人体实验；②胰岛素试剂需按生物活性物质规范管理；③实验过程中需妥善处理含高浓度 FBS 及胰岛素的培养基，避免环境暴露，若后续明确病理亚型，需在实验记录中补充标注，确保数据完整性）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①胰岛素功能验证：首次培养时，建议通过以下实验确认胰岛素响应特性：a. 设置胰岛素浓度梯度（0、0.005、0.01、0.02mg/ml），培养 48 小时后用 CCK-8 检测增殖率，验证 0.01mg/ml 为最佳浓度；b. 通过 Western Blot 检测胰岛素通路下游蛋白（p-AKT、p-ERK）表达，确认通路激活；设置胰岛素受体抑制剂（如 GSK1904529A）对照组，验证胰岛素作用的特异性；②多细胞系对比实验：搭配 SW1990（脾转移 / 空气）、PANC-1（胰管原发 / 常规 DMEM）开展实验时，可：a. 检测上皮标志物（CK18、E-cadherin），分析不同胰腺癌细胞的上皮特性差异；b. 对比胰岛素调控效果（仅 PANC 05.04 依赖胰岛素，SW1990、PANC-1 无显著响应）；c. 检测药物敏感性（如吉西他滨），计算 IC50，分析高血清 + 胰岛素培养对药物响应的影响；③基础实验应用：因常规气相及上皮样形态，适合开展：a. 转染实验：选择脂质体转染法（如 Lipofectamine 3000），转染效率预计 15%-25%（参考同类上皮样胰腺癌细胞），转染后 48 小时检测目的基因表达，可用于胰岛素通路相关基因功能研究；b. 流式细胞术分析：因细胞易获得单细胞悬液，适合检测细胞周期、凋亡率（Annexin V/PI 双染），对比胰岛素添加前后的细胞周期分布变化；④长期培养监测：每 5 代检测细胞形态（上皮样比例≥90%）、胰岛素响应性（增殖率变化≤10%）及支原体，若发现形态异常或胰岛素响应减弱，需立即更换低代数种子细胞；⑤培养基注意事项：不可用 L-15 或 DMEM 替代 RPMI-1640（实验验证：替换后增殖速度下降 30% 以上），不可省略重组胰岛素（缺失后细胞增殖下降 40%），更换 FBS 批次时需同步检测胰岛素适配性，确保培养体系稳定。
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