细胞荧光标记定制

一、技术核心概述

二、核心标记类型与特性

1. 荧光蛋白标记（GFP/RFP）

• 核心原理：将绿色荧光蛋白（GFP）或红色荧光蛋白（RFP）基因插入慢病毒载体，通过 flag-Ub 启动子过表达，实现基因永久性整合。
• 关键特性：
  1. 标记信号稳定，荧光永不丢失，可随细胞传代持续表达。
  2. 操作简单，无需额外底物，可通过荧光显微镜直接观察。
• 适用场景：细胞移植后体外追踪（如荧光显微镜观察细胞分布）、细胞归巢效果评估。

2. 荧光素酶标记

• 核心原理：将萤火虫荧光素酶基因插入慢病毒载体，通过 CGA 启动子过表达，基因永久性整合到细胞基因组。
• 关键特性：
  1. 依赖底物反应发光，信号灵敏度高，可实现活体追踪。
  2. 标记信号稳定，无背景干扰，适合长期观察。
• 适用场景：小动物体内细胞移植活体成像、活体细胞动态追踪与治疗效果评估。

三、服务内容与流程

1. 核心服务内容

1. 制备含目标报告基因（GFP/RFP/ 荧光素酶）的慢病毒。
2. 慢病毒感染客户提供的目标细胞（或原代细胞）并培养。
3. 抗生素筛选转染成功的阳性细胞株。
4. 荧光显微镜观察荧光蛋白表达效果；荧光凝胶成像仪检测荧光素酶发光效果。
5. 提供免费荧光鉴定，确保结果真实可靠。

2. 服务流程选项

• 选项 1：客户提供细胞，公司完成标记、筛选与鉴定。
• 选项 2：公司针对客户需求，对指定原代细胞进行标记。
• 选项 3：提供慢病毒套装，客户自行按说明书标记目标细胞。
• 选项 4：定制红色荧光标记或荧光蛋白 + 荧光素酶双标记服务。

3. 周期与收费

• 服务周期：4-8 周（根据细胞类型与标记类型略有差异）。
• 收费标准：4000 元 / 株起（具体费用根据标记类型、细胞难度调整）。

四、应用范围与公司优势

1. 应用范围

• 细胞移植后体内迁移、分布追踪（如肿瘤细胞、干细胞移植）。
• 移植细胞归巢效果评估（如干细胞向损伤组织的迁移能力）。
• 细胞治疗效果长期监测（如通过活体成像观察细胞存活与功能）。

2. 公司优势

1. 技术与设备：仪器设备先进，慢病毒载体技术成熟，实验经验丰富。
2. 结果保障：保证高转染效率、零污染，细胞可稳定传代，荧光持续表达。
3. 服务支持：免费提供荧光鉴定，全程透明化沟通，确保结果可靠。