一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
- 细胞名称:Sp2/0-Ag14 小鼠骨髓瘤细胞
- 细胞别称:SP2/0-Ag14; SP2/0-AG14; SP2/0-ag14; Sp2/O-Ag14; SP2/O-Ag14; Sp2/0-Ag-14; SP2-0-Ag14; SP2/0 Ag-14; SP-2/0-AG14; Sp 2/0-Ag 14; Sp2/0; SP2/0; Sp2/O; SP2/O; SP-2; SP2; GM03569; GM03569B; GM3569;小鼠骨髓瘤细胞
- 种属来源:小鼠
- 年龄性别:未明确提及(从细胞来源及骨髓瘤细胞特性推断,无特殊性别关联,实验中无需针对性考虑年龄性别因素)
- 组织来源:骨髓(造血组织来源,核心用于浆细胞相关肿瘤研究及杂交瘤制备)
- 生长特性:悬浮生长(培养过程中无需贴壁支持,细胞呈悬浮状态增殖,换液或传代时直接收集上清细胞即可,避免贴壁细胞消化操作)
- 细胞形态:淋巴母细胞样(细胞呈圆形或类圆形,大小均一,具有典型淋巴母细胞形态特征,可通过显微镜观察形态判断细胞活性与状态)
- 特别注意:
- 细胞对 20μg/ml 的 8 – 氮鸟嘌呤有抗性,对 HAT(次黄嘌呤 – 氨基蝶呤 – 胸腺嘧啶)培养基敏感,实验中需利用该特性进行杂交瘤筛选,避免因培养基选择不当导致细胞死亡。
- 作为细胞融合的 B 细胞组分时,需提前确认细胞活性(建议活性达 90% 以上),确保融合效率;融合前可适当调整细胞密度,维持对数生长期状态。
- 虽为悬浮生长,但需避免细胞密度过高(建议密度控制在 1×10⁵-1×10⁶cells/ml),防止因营养不足导致细胞活力下降。
- 细胞代数:10 代以内(低代数细胞可稳定保留 HGPRT 缺陷、不分泌免疫球蛋白等核心特性,减少传代导致的细胞功能漂移,建议核心实验在 10 代内完成)
- 背景介绍:Sp2/0-Ag14 细胞由绵羊红细胞免疫的 BALB/c 小鼠脾细胞与 P3X63Ag8 骨髓瘤细胞融合构建而来;关键生物学特性包括:①不分泌免疫球蛋白(排除自身抗体干扰,是制备特异性单克隆抗体的理想亲本细胞);②对 8 – 氮鸟嘌呤抗性、对 HAT 敏感(源于 HGPRT 基因缺陷,可通过 HAT 培养基筛选杂交瘤细胞,淘汰未融合的亲本细胞);③鼠痘病毒阴性(避免病毒污染对实验结果及杂交瘤稳定性的影响)
- 生物安全等级:1(常规生物安全实验室即可满足培养需求,操作时遵循无菌操作规范,处理废液、耗材需经灭菌处理)
- 物种鉴定报告:SP2-0-AG14 物种鉴定报告.pdf(实验前建议查阅报告,确认细胞种属真实性,排除交叉污染风险)
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶 或 1mL 冻存管(T25 培养瓶复苏后可直接扩增,1mL 冻存管适合长期储存备用,可根据实验规模选择包装)
- 支原体检测:无(经严格支原体筛查,可直接用于细胞融合、抗体制备等实验,无需额外进行支原体清除)
- 保藏机构:ATCC; CRL-1581、ATCC; CRL-8287;DSMZ; ACC-146;ECACC; 85072401(权威机构保藏,细胞身份可追溯,生物学特性经过验证,质量可靠)
- 培养基:DMEM(基础培养基,提供细胞基础营养)+10% FBS(胎牛血清,补充生长因子、蛋白质等)+PS(青霉素 – 链霉素双抗,浓度建议 1%,预防细菌污染)
- 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度 37℃(需使用二氧化碳培养箱精准控温控气,维持细胞正常代谢与增殖,培养箱湿度建议保持 70%-80%,防止培养基过快蒸发)
- 抗原表达情况:H-2d(表达小鼠主要组织相容性复合体(MHC)I 类分子 H-2d,可用于免疫相关实验,如 T 细胞识别、抗原提呈机制研究等)
- 染色体:45~80(染色体数目呈多倍体特征,符合骨髓瘤细胞染色体变异特点,若实验涉及细胞遗传学研究,需提前进行核型分析确认)
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存时采用 “慢冻” 策略:4℃冰箱 30 分钟→-80℃冰箱过夜→液氮长期保存;复苏时迅速在 37℃水浴融化,避免冰晶损伤细胞,复苏后及时接种培养)
- 细胞货期:现货,1 周左右(可根据实验进度提前采购,确保细胞及时到位,缩短实验准备周期)
- 运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递(复苏细胞收到后需立即检查细胞活力,若出现异常及时联系客服;冻存细胞收到后需尽快转入液氮,避免干冰耗尽导致细胞解冻)
- 供应限制:仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用(严格遵守科研伦理与细胞使用规范,禁止用于临床、诊断或其他非科研用途)
- 特别说明:以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主(注:该细胞是杂交瘤技术的经典亲本细胞,广泛用于单克隆抗体制备、肿瘤生物学研究、免疫功能验证等领域;实验中需充分利用其 HAT 敏感、不分泌抗体的特性设计筛选方案,同时注意悬浮细胞的密度控制与活性监测,确保实验顺利开展;若用于抗体制备,建议融合前对细胞进行适应性培养,维持最佳生长状态)


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