一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞永生化
种属来源:人
组织来源:滑膜细胞(贴合类风湿关节炎滑膜病变研究场景)
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维样细胞
细胞鉴定:纤维连接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)免疫荧光染色为阳性(可通过该方法进行细胞身份与纯度二次验证)
细胞代数:10 代以内(低传代,保障永生化滑膜细胞生物学特性稳定,减少表型漂移)
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或 1mL 冻存管包装
支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖及实验结果,确保数据准确性)
培养基:成纤维细胞专用培养基(不可用普通培养基替代,需适配永生化成纤维样滑膜细胞生长与功能维持需求)
背景与核心价值
背景介绍
人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞永生化细胞株,保留类风湿关节炎滑膜细胞核心特性(如成纤维样形态、贴壁生长、特定蛋白表达),可长期稳定传代。适用于类风湿关节炎病理机制研究,包括滑膜炎症调控、关节损伤相关因子分泌、抗风湿药物筛选等,是自身免疫性关节疾病基础研究的重要工具细胞。
关键特性
- 功能特异性:源自类风湿关节炎滑膜组织,且经永生化处理,既能模拟病理状态下滑膜细胞的功能,又可长期培养,减少实验重复性误差;
- 鉴定明确:通过纤维连接蛋白 / 波形蛋白免疫荧光染色阳性确认细胞类型,确保细胞纯度,避免杂细胞干扰实验;
- 培养专业性:需成纤维细胞专用培养基维持细胞永生化特性与病理相关功能,保障实验数据的可靠性与针对性。
培养与冻存
基础信息
培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(建议维持培养箱湿度 70%-80%,避免培养基过快蒸发导致细胞营养失衡);
冻存条件:无血清冻存液,液氮长期储存。
操作要点
- 传代操作:
- 时机:细胞密度达 70%-80% 时传代,避免过度密集导致细胞形态异常(如成纤维样特征消失);
- 方法:用胰酶温和消化,待成纤维样细胞边缘收缩、间隙增大后,立即加专用培养基终止消化,轻柔吹打分散细胞(避免剧烈吹打破坏细胞形态),传代比例建议 1:2-1:4。
- 换液频率:每 2-3 天更换一次新鲜专用培养基,去除代谢废物,确保细胞营养充足,维持永生化特性。
- 冻存要点:选择对数生长期细胞(状态最佳,成纤维样形态典型),胰酶消化收集后,用专用培养基清洗 1 次,再用无血清冻存液重悬,调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml;梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮储存),避免降温过快损伤细胞。
- 复苏要点:从液氮取出冻存管后,立即放入 37℃水浴快速融化(约 1-2 分钟,避免反复冻融);1000rpm 离心 5 分钟弃冻存液,用预热至 37℃的专用培养基重悬,复苏后静置 24-48h,优先观察细胞贴壁情况与成纤维样形态恢复情况,必要时可通过免疫荧光染色验证细胞特性。
货期与运输
细胞货期:现货,1 周左右(可快速备货,适合短期实验规划);
运输方式:复苏发货(T25 瓶,免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;
运输注意:复苏发货用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率;冻存发货需确保干冰量充足,维持细胞低温冻存状态,保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;培养过程中需严格使用成纤维细胞专用培养基,避免因营养不适导致细胞永生化特性丢失或功能异常;若需验证细胞纯度,可参照 “纤维连接蛋白 / 波形蛋白免疫荧光染色” 方法操作。


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