人脂肪干细胞永生化

一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

• 细胞名称：人脂肪干细胞永生化
  核心特色：正常脂肪来源永生化干细胞（慢病毒转染 Tert 基因）+ 贴壁生长 + 成纤维细胞样形态 + 专用培养基（IM-H289-1）+ 多向分化潜能（成脂 / 成骨 / 成软骨，适配逸漠三系分化试剂盒 IMC-011/012/013）+ 特异性标志物（阳性：CD29/CD44/CD73/CD90/CD105；阴性：CD14/CD34/CD45）+ 细胞纯度≥90%，可与 BJ（人包皮成纤维 / 贴壁 / MEM / 无多向分化）、CCC-HPF-1（人胚肺成纤维 / 贴壁 / DMEM / 无永生化）组成对比体系，用于脂肪干细胞机制研究、间充质干细胞多向分化调控、永生化干细胞 vs 普通成纤维细胞差异及组织工程种子细胞实验。
• 细胞别称：永生化人脂肪干细胞；人脂肪来源永生化干细胞
  标注 “正常脂肪干细胞（永生化，Tert 基因）+ 贴壁成纤维样 + 专用培养基 IM-H289-1 + 三系分化（IMC-011/012/013）”，区别于普通成纤维细胞（BJ/CCC-HPF-1），规避 “成纤维形态” 与 “干细胞功能” 混淆。
• 种属来源：人（种属纯净无交叉污染，保障脂肪干细胞永生化特性、多向分化能力、专用培养基适应及标志物表达稳定性，适配间充质干细胞基础研究、组织工程实验场景）
• 组织来源：正常脂肪（成体脂肪组织，来源广泛、取材便捷，符合成体干细胞伦理优势），保留脂肪干细胞核心特征（成纤维样形态、多向分化潜能），经慢病毒转染 Tert 基因实现永生化（突破原代干细胞传代限制），核心优势为 “永生化 + 多向分化 + 明确标志物”，适配长期干细胞功能实验、分化机制及组织修复模型构建。
• 生长特性：贴壁生长（纯贴壁，干细胞贴壁强度中等）
  0.25% 胰酶 37℃孵育 4-6 分钟消化（成纤维样干细胞贴壁略弱于普通成纤维细胞），汇合度 70%-80% 时按 1:2-1:3 传代（永生化细胞增殖稳定，传代间隔一致，无原代干细胞衰老问题）；传代后 24 小时内贴壁稳定，需维持细胞密度≥1×10⁴cells/cm²（密度过低易丢失干细胞特性），适合开展多向分化诱导、干细胞功能调控等实验。
• 细胞形态：成纤维细胞样（呈长梭形，胞体舒展，排列呈放射状，与 BJ/CCC-HPF-1 的 “成纤维细胞样” 形态一致，但可通过 “多向分化能力 + 特异性标志物” 区分），适配干细胞形态学观察及纯度初步验证（成纤维样形态占比≥95%）。
• 背景简介：人脂肪来源永生化间充质干细胞，贴壁生长呈成纤维细胞样，需 IM-H289-1 专用培养基稳定培养；经慢病毒转染 Tert 基因实现永生化，保留多向分化潜能（诱导后可分化为脂肪细胞、成骨细胞、软骨细胞、心肌细胞、上皮细胞等）；特异性标志物符合间充质干细胞标准（CD29/44/73/90/105 阳性，CD14/34/45 阴性），细胞纯度≥90%；无 BJ/CCC-HPF-1 的 “仅成纤维功能、无多向分化” 特征，是研究脂肪干细胞永生化机制、间充质干细胞多向分化及组织工程种子细胞的理想模型。
• 细胞鉴定：① 标志物鉴定：CD44 免疫荧光染色阳性，CD45 免疫荧光染色阴性；完整标志物谱：阳性指标（CD29、CD44、CD73、CD90、CD105），阴性指标（CD14、CD34、CD45），对应参考图片 “kappframework-XskWzC (1)(1).png”；② 纯度鉴定：细胞纯度高于 90%（排除杂细胞污染）；③ 功能鉴定：具三系分化能力（适配逸漠专用试剂盒：成骨诱导 IMC-011、成脂诱导 IMC-012、成软骨诱导 IMC-013），分化结果参考图片 “kappframework-dktMAE (1)(1).png”。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管，复苏后存活率≥85%，24 小时贴壁率≥90%，需通过免疫荧光验证标志物阳性率（≥85%）、三系分化预实验确认功能（分化率≥70%）。
• 支原体检测：无（经 PCR 法或培养法检测，确认无支原体污染，避免影响干细胞永生化特性及多向分化能力）
• 培养基：人脂肪干细胞永生化细胞专用培养基（IM-H289-1，不可替换为普通成纤维细胞培养基）；专用培养基含干细胞维持成分，保障永生化特性及多向分化潜能，区别于 BJ 的 MEM、CCC-HPF-1 的 DMEM，开封后 2 周内用完，避免成分降解。
• 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃，湿度 70%-80%；每 48 小时换液 1 次（沿瓶壁缓慢加液，避免冲击贴壁细胞）；培养箱温度波动需≤±0.5℃，防止影响干细胞标志物表达及分化能力。
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮（-196℃）中长期储存；冻存前需选取对数生长期细胞（干细胞特性最稳定），添加 10% FBS 提升复苏存活率；梯度降温流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→转入液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟溶解，离心后用 IM-H289-1 专用培养基重悬。
• 细胞代数：10 代以内（低代数保障永生化稳定性及多向分化能力，传代超过 15 代需重新验证标志物及分化功能）
• 细胞货期：现货，下单后 1 周左右完成质检（标志物、纯度、分化能力预实验）并发货。
• 运输方式：复苏发货（T25 培养瓶包装，免运输费用，运输后静置 24 小时再镜检，避免干扰干细胞贴壁）；冻存发货（1mL 冻存管包装，需额外支付干冰运输费用），默认顺丰快递。
• 供应限制：仅限于科学研究使用（包括脂肪干细胞永生化机制、间充质干细胞多向分化调控、组织工程种子细胞研究等），绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用，亦不可用于临床诊断或非科研用途。
• 特别说明：① 首次培养需验证核心功能：免疫荧光检测标志物（阳性率≥85%、阴性率≤5%）、三系分化实验（用 IMC-011/012/013 试剂盒，分化率≥70%），确保干细胞属性；② 严禁使用普通培养基（如 MEM/DMEM）替代 IM-H289-1，否则易导致干细胞特性丢失（如分化能力下降、标志物异常）；③ 适配脂肪干细胞永生化机制研究（Tert 基因功能）、间充质干细胞多向分化通路筛选（如成脂分化 PPARγ 通路）、组织工程修复模型构建（与支架材料共培养），也可作为永生化干细胞模型优化干细胞长期培养及冻存参数。