一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：12Z 人子宫内膜异位细胞
细胞别称：12z; 12-Z; Z12; Z-12; Z12 Eo; EEC12Z
种属来源：人
组织来源：子宫（源于子宫内膜异位组织，具备子宫内膜异位细胞的生物学特性）
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样（单层贴壁生长，细胞呈多边形，排列紧密，符合上皮细胞典型形态）
细胞代数：10 代以内
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或 1mL 冻存管
支原体检测：无
培养基：DMEM/F-12 培养基 + 10% FBS+ PS（常规复合基础培养基，需按配方精准配制，确保营养均衡）
培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规人体细胞培养条件）
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
细胞货期：现货，1 周左右
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
培养核心操作
1. 传代操作
- 当细胞密度达 70%-80%（上皮细胞单层铺满瓶壁，无明显堆叠，多边形形态完整）时，弃去旧培养基，用无菌 PBS 轻柔冲洗细胞表面 1 次，避免损伤紧密排列的细胞层。
- 加入胰酶温和消化，待细胞边缘收缩、间隙增大（约 2-3 分钟，需密切观察，防止过度消化导致细胞破碎）后，立即加入含 10% FBS 的 DMEM/F-12 培养基终止消化（血清可快速中和胰酶活性）。
- 用移液器轻柔吹打细胞至单细胞悬液，按 1:3-1:5 比例接种到新培养瓶，全程动作缓慢，维持子宫内膜异位细胞的上皮形态与增殖特性。
2. 换液操作
- 每 2-3 天更换 1 次新鲜培养基，换液时先缓慢倾倒旧培养基（避免直接冲击细胞层导致细胞脱落），再用 PBS 冲洗 1 次，最后加入足量 “DMEM/F-12+10% FBS+PS” 培养基，确保营养满足细胞需求。
- 若发现培养基较快变黄（代谢旺盛），可适当缩短换液间隔，避免代谢废物堆积抑制细胞活性，影响实验结果。
3. 冻存操作
- 选取对数期（增殖旺盛、上皮形态均一、无杂细胞）的细胞，胰酶消化后 1000rpm 离心 5 分钟，弃上清收集细胞沉淀。
- 用无血清冻存液重悬细胞至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml，分装到冻存管后，按 “4℃静置 30 分钟→-20℃放置 2 小时→-80℃过夜→转入液氮” 的梯度降温，减少低温对细胞的损伤，保留其生物学特性。
4. 复苏操作
- 从液氮中取出冻存管，立即放入 37℃水浴速融（1-2 分钟内完全融化，避免冰晶反复冻融破坏细胞），迅速将细胞悬液转移至离心管。
- 加入 5 倍体积新鲜 “DMEM/F-12+10% FBS+PS” 培养基稀释，1000rpm 离心 5 分钟弃上清，用预热至 37℃的培养基重悬细胞后接种，24 小时后观察细胞贴壁情况，48 小时后按常规换液。
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