一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：293T-FLUC-eGFP-puro 人胚肾细胞（FLUC/eGFP 双标）
细胞别称：293T-FLUC-EGFP；人胚肾细胞株 – 荧光素酶标记 – 绿色荧光蛋白；人胚肾细胞 – FLUC-EGFP
种属来源：人
组织来源：肾
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持 FLUC/eGFP 双荧光标记稳定性及 293T 细胞高转染特性）
生物安全等级：1 级
背景与筛选验证
背景介绍
293T-FLUC-eGFP-puro 细胞稳定共表达萤火虫荧光素酶（FLUC）与增强型绿色荧光蛋白（eGFP），性状稳定，培养时无需抗生素常规维持。既可作为双荧光活性检测的阳性对照，也可用于活体动物成像实验，同时保留 293T 细胞高转染优势，适用于基因转染、病毒包装相关研究。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 293T 细胞为 293 [HEK-293] 细胞株插入 SV40 T-antigen 温度敏感基因形成的衍生株，核心特性为高转染效率，是分子生物学实验中常用的工具细胞株。
puro 药筛浓度
293T-FLUC-EGFP 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障双荧光基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长及高转染特性。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、双荧光表达及转染相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：ATCC; CRL-3216、DSMZ; ACC-635（细胞来源可追溯，确保细胞株高转染特性与双荧光标记稳定性）。
培养与冻存
- 培养基：90% DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+0.5μg/ml puro（常规培养直接按此浓度添加，适配贴壁生长的 293T 细胞营养需求，无需额外调整）；
- 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；避免强光直射，减少 eGFP 光漂白，保障双荧光观测效果；操作时动作轻柔，避免剧烈晃动导致细胞脱落）；
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存前确保细胞处于对数生长期，保留双荧光特性与高转染能力；可适当提高冻存密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml，减少复苏损伤，复苏后优先观察细胞贴壁状态与双荧光表达）。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；因细胞具备高转染特性，开展病毒包装或基因转染实验时，可结合双荧光标记快速验证转染效率。
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