一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：5-8F 人高转移鼻咽癌细胞系（与 C918（眼脉络黑色素瘤、多角形）、SK-MES-1（肺鳞癌胸水转移）同属贴壁生长肿瘤细胞，区别于 MET-5A（皮肤正常间皮）、BEAS-2B（肺正常上皮），核心特色为 “鼻咽来源高转移癌细胞 + 上皮细胞样贴壁 + DMEM 培养基 + 10 代以内低代数”，是鼻咽癌转移机制研究、跨器官肿瘤转移对比、肿瘤转移相关实验（如侵袭迁移）的关键模型；可与 C918（眼黑色素瘤）、SK-MES-1（肺鳞癌转移）、HFL-1（肺正常成纤维）组成 “多器官转移肿瘤（鼻咽 / 眼 / 肺）+ 正常细胞” 体系，探索不同器官高转移肿瘤的生物学差异及转移能力对肿瘤特性的影响，同时因高转移特性，适合开展转移相关基因筛选、抗转移药物验证实验）
- 细胞别称：58F; SUNE-1-5-8F; 人高转移鼻咽癌细胞（别称以 “5-8F” 为核心，“SUNE-1-5-8F” 明确标注其源自 SUNE-1 鼻咽癌细胞系的高转移亚株，大小写、连接符差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人高转移鼻咽癌细胞” 精准定位 “鼻咽器官 + 高转移特性 + 癌细胞类型”，与 C918 的 “眼脉络黑色素瘤”、SK-MES-1 的 “肺鳞癌” 形成器官 – 肿瘤类型双重区分，贴合 “高转移肿瘤细胞 + 数字 / 字母组合 + 器官 – 肿瘤类型” 的命名体系，避免与其他转移肿瘤细胞混淆）
- 性别年龄：未明确（建议实验前通过后续补充的 STR 位点 Amelogenin 基因（若检测）或 SRY 基因 PCR 验证性别，参考临床鼻咽癌高发年龄（30-50 岁）及高转移特性（多发生于疾病中晚期），推测为中年个体，与 C918（中老年推测）形成 “中年 – 中老年” 年龄对照，与 SK-MES-1（65 岁男成人肺鳞癌）形成 “中年 – 老年” 年龄梯度，与 HFL-1（胎儿男正常）形成 “中年肿瘤 – 胎儿正常” 年龄差异；中年背景适合模拟临床鼻咽癌高转移高发人群的肿瘤特性，用于年龄相关鼻咽癌转移机制研究）
- 组织来源：鼻咽；肿瘤类型：鼻咽癌；转移特性：高转移（明确为鼻咽来源高转移鼻咽癌，保留鼻咽癌特有的 “上皮细胞样形态、EB 病毒相关潜能、高侵袭转移能力” 特性；区别于 C918 的眼脉络黑色素瘤、SK-MES-1 的肺鳞癌胸水转移灶，可用于鼻咽癌高转移机制（如鼻咽黏膜侵袭、淋巴道转移）、鼻咽癌与其他器官转移肿瘤的病理差异对比，同时为临床鼻咽癌高转移患者的诊疗方案优化（如抗转移治疗）提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 C918、SK-MES-1 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 高转移增殖特征”：①增殖特性：未明确倍增时间，结合高转移肿瘤常规增殖规律，推测倍增时间 24-32 小时（快于 C918 的 24-36 小时、SK-MES-1 的 50 小时），无有限传代限制（永生化高转移肿瘤细胞，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度预计介于 C918（眼黑色素瘤，贴壁中等）与 SK-MES-1（鳞癌转移，贴壁较强）之间，细胞呈紧密上皮样铺路石样排列（非 C918 的多角形散在分布）；对数生长期需通过实验验证（建议接种后 24-60 小时监测细胞密度），传代需在细胞密度达 80% 时按 1:3-1:4 传代（高于 SK-MES-1 的 1:2），传代时需轻柔消化（避免过度吹打影响细胞转移相关蛋白表达），适合开展高转移相关实验（如 Transwell 侵袭、划痕迁移））
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列紧密呈铺路石样，胞质丰富，无 C918 的黑色素颗粒及 SK-MES-1 的角质小体，核浆比大于 MET-5A（正常间皮），体现高转移肿瘤细胞与正常细胞的形态差异；与 C918（多角形、散在分布）相比，形态规整且呈上皮细胞连接，与 SK-MES-1（上皮样、含角质小体）相比，无角质小体且排列更紧密（高转移细胞特征）；可通过 “上皮样 + 鼻咽癌特异性标志物（如 CK19）阳性” 快速鉴别，同时与 CNE-2 鼻咽癌低转移细胞系（上皮样）通过转移相关标志物（如 MMP9）表达差异进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “高转移特性、上皮形态、转移相关蛋白表达” 核心属性，建议传代次数严格控制在 10 代以内，防止长期传代导致特性漂移，如转移能力下降（Transwell 穿膜细胞数减少 30% 以上）、上皮形态向梭形转变、转移相关基因（如 CXCR4）表达下降）
- 背景简介：5-8F 细胞系为 SUNE-1 鼻咽癌细胞系筛选获得的高转移亚株，核心特性及应用如下：①高转移特色：具备强淋巴道及血道转移能力（临床鼻咽癌常见转移途径），是研究鼻咽癌转移机制的理想模型，可用于探索转移相关信号通路（如 PI3K-AKT、EMT 通路）；②应用场景：广泛用于鼻咽癌高转移机制研究（如鼻咽癌细胞与间质细胞的相互作用）、抗转移药物筛选（如抑制 MMPs 活性的药物）、跨器官转移肿瘤对比实验（与 C918、SK-MES-1），同时可与低转移鼻咽癌细胞系（如 6-10B）搭配开展 “转移能力差异” 对比实验，探索转移相关分子标志物）
- STR 鉴定：未明确具体位点信息（建议参考随货 STR 鉴定报告或通过 PCR 检测核心 STR 位点（如 Amelogenin、CSF1PO、D13S317 等），重点关注 Amelogenin 基因以确认性别，排除细胞交叉污染（如与 SUNE-1 母系细胞或其他器官肿瘤细胞混淆）；可将检测结果与 C918、SK-MES-1 的 STR 图谱对比，明确 5-8F 的独特位点，确保实验用细胞身份准确）
- 生物安全等级：1（参考同类肿瘤细胞（C918、SK-MES-1）的安全等级，预计为 1 级，低于 BEAS-2B 的 2 级、HGC-27 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因是高转移细胞，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染；若涉及 EB 病毒相关实验，需按病毒实验防护要求操作）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（高转移肿瘤细胞复苏活性稳定），且上皮样形态、高转移特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%（高于 C918 的 60%-70%），标注 “人高转移鼻咽癌细胞系，建议检测转移相关标志物”，提醒用户利用高转移特性开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、转移能力及药物筛选实验结果，保障与 C918、SK-MES-1 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：未明确标注（建议实验前咨询供应商获取保藏机构信息（如 ATCC、ECACC 或国内鼻咽癌细胞库），通过保藏机构数据库查询细胞详细背景（如性别年龄、转移能力验证数据），补充完善细胞基础信息，提升实验可追溯性与结果重复性）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+P/S（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 DMEM 培养基，与 C918 的 RPMI-1640、SK-MES-1 的 DMEM 一致但应用场景不同；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配高转移鼻咽癌细胞的营养配比，支持其快速增殖及转移相关蛋白（如 MMP2、MMP9）合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中转移抑制因子（如某些细胞因子）影响细胞高转移特性；③P/S 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞高转移表型及侵袭能力）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 C918、SK-MES-1 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与其他细胞培养条件兼容性高，仅需注意单独放置，避免交叉污染，便于多细胞株并行开展 “跨器官转移肿瘤对比” 实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配上皮细胞形态与高转移特性：①选择对数生长期细胞（密度 80%，转移能力最佳、增殖活性稳定），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（短于 C918 的 2-3 分钟，因贴壁强度略低），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 3×10⁶cells/mL（高于 C918 的 2.5×10⁶cells/mL，补偿高转移细胞冻存损失）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对转移相关蛋白（如整合素 β1）活性的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、支原体检测及细胞形态验证（上皮样、高转移特征），确保核心培养特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，建议与 C918（1 周货期）同步下单，保障 “跨器官转移肿瘤” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞贴壁状态，48 小时内首次换液（使用 90% DMEM+10% FBS+P/S 培养基），确保细胞适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及高转移特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 C918、SK-MES-1 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验过程中需妥善处理含高转移细胞的培养基，避免环境暴露，实验数据发表前需明确标注细胞转移能力验证结果）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①高转移实验设计：开展转移相关实验时，Transwell 侵袭实验建议培养 24 小时（C918 需 36 小时），Matrigel 基质胶稀释比例 1:8（适配高侵袭能力），计数穿膜细胞时选择 5 个随机视野取平均值；划痕迁移实验需在接种后 24 小时（细胞融合度达 90%）进行划痕，分别在 0、24、48 小时拍照，计算划痕愈合率，验证高迁移特性；②转移标志物验证：首次培养时，建议通过 Western Blot 检测转移相关蛋白（MMP2、MMP9、CXCR4）表达，或通过免疫荧光检测 EMT 标志物（E-cadherin 低表达、N-cadherin 高表达），确认高转移表型；可设置阳性对照（如 SK-MES-1）、阴性对照（如低转移鼻咽癌细胞系 6-10B），确保实验特异性；③跨器官转移对比实验：搭配 C918（眼黑色素瘤）、SK-MES-1（肺鳞癌转移）开展实验时，可：a. 检测鼻咽癌标志物（CK19、EBV-LMP1，5-8F 高表达）与其他肿瘤标志物（HMB-45、CK5/6）的差异，验证肿瘤亚型特性；b. 对比三株细胞的转移能力（Transwell 穿膜数：5-8F＞C918＞SK-MES-1），分析器官来源对转移能力的影响；c. 检测转移相关信号通路（PI3K-AKT、MAPK）的活性差异，探索不同器官转移肿瘤的分子机制区别；④长期培养监测：每 3 代检测细胞形态（是否维持上皮样、紧密排列）、转移能力（Transwell 实验）及转移标志物表达，若发现转移能力下降或标志物异常，需立即更换低代数种子细胞；⑤培养基适配性：若实验室无 DMEM 培养基，可尝试用 DMEM/F12（1:1）培养基替代，但需提前进行小体积适应性培养（如 6 孔板接种 5×10⁴cells），观察 2-3 代，确认细胞高转移特性、形态无显著改变后再批量使用。
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