一、细胞基本属性
- 细胞名称：769-P 人肾细胞腺癌细胞（STR 鉴定正确）
- 细胞别称：769P; 769-p；人肾细胞腺癌细胞（别称简洁，“769-P” 为核心标识，可快速用于实验记录及文献检索，明确区分于正常肾细胞及其他肾癌亚型细胞）
- 种属来源：人
- 性别年龄：女；63 岁（明确的老年白人女性背景，为年龄、性别相关肾癌发病机制研究，以及老年患者药物敏感性评估等实验提供匹配的细胞模型）
- 组织来源：器官：肾；疾病：肾透明细胞腺癌（病理类型明确，是肾透明细胞腺癌基础研究、药物筛选及转移机制探索的经典细胞株，区别于肾乳头状癌、嫌色细胞癌等其他肾癌亚型模型）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖活跃，传代时易形成单细胞悬液，便于后续实验操作）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈圆形，边界不清，核浆比大，表面有微绒毛及桥粒，具备肾透明细胞腺癌典型的形态学特征，可通过形态观察初步判断细胞纯度及生长状态）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留肾透明细胞腺癌的原始生物学特性，如致瘤性、药物敏感性等，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如致瘤能力下降、染色体倍性改变）
- 背景介绍：769-P 细胞系于 1975 年建系，源自一位 63 岁白人女性的初期肾透明细胞腺癌组织，核心特性如下：①形态特征：细胞呈圆形且边界不清，核浆比大，表面有微绒毛及桥粒，符合肾透明细胞腺癌的细胞学形态；②生长特性：可在软琼脂上生长，体现肿瘤细胞的锚定非依赖性生长能力，是判断细胞恶性程度的重要指标；③应用场景：因病理类型明确、生物学特性稳定，广泛用于肾透明细胞腺癌发病机制研究（如 VHL 基因相关通路异常）、抗肾癌药物筛选（如靶向 VEGF、mTOR 的药物 efficacy 评估）、体内肿瘤模型构建等领域，同时也是肾癌转移相关基因功能验证的常用工具。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（与女性性别匹配，可快速验证细胞性别一致性，排除交叉污染）；CSF1PO：11，12；D13S317：10，14；D16S539：9，13；D18S51：14，17；D19S433：14，15；D21S11：28，29，30；D2S1338：18；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：10，11；D8S1179：12，16；FGA：20，22；TH01：6，9.3；TPOX：8，11；vWA：18；（STR 位点覆盖全面，含多个特异性位点（如 D21S11：28，29，30），可通过图谱与保藏机构（如 ATCC CRL-1933）数据比对，确认细胞身份准确性，保障实验可靠性）
- 生物安全等级：1（参考人源肾癌细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，避免细胞污染及废弃物不当处理）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管建议含 10% 二甲基亚砜（DMSO）的无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且复苏后致瘤性、染色体倍性等特性无显著改变）
- 支原体检测：无（每批次细胞均通过 PCR 法检测支原体，覆盖常见致病性支原体类型（如肺炎支原体、精氨酸支原体等），结果为阴性，可直接用于实验，无需额外进行除支原体处理，避免影响细胞生长及致瘤性实验结果）
- 保藏机构：ATCC; CRL-1933；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际权威保藏机构与国内机构双重保藏，细胞来源可追溯，基因型及生物学特性经过严格验证，适合长期实验及多中心结果重复验证）
- 培养基：90% RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素），配方说明：①RPMI-1640 培养基含多种氨基酸及微量元素，适配肾癌细胞的营养需求；②建议选择批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清质量波动导致细胞生长状态不稳定或致瘤性改变；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防革兰氏阳性菌及阴性菌污染，不影响细胞正常代谢。培养基需 37℃预热 15-20 分钟后使用，避免低温刺激细胞产生应激反应。
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换培养箱内水盘，防止培养基蒸发过快导致渗透压升高，影响细胞生长；避免频繁开关培养箱，维持气相及温度稳定，确保细胞生长环境一致性）
- 染色体：XX, 二倍体，四倍体，六倍体，或更高倍体（女性核型，染色体倍性具有异质性，符合肿瘤细胞染色体不稳定的典型特征，实验设计中需注意染色体倍性对结果的潜在影响，如药物作用靶点表达差异）
- 倍增时间：~35 hours（增殖速度较快，对数生长期为接种后 1-2 天，建议在细胞密度达 70%-80% 时进行传代或实验处理，此时细胞状态最佳，能更准确反映实验效果）
- 致瘤性：Yes, forms colonies in soft agar. Yes, forms tumors in immunosuppressed hamsters. Yes, forms tumors in nude mice.（明确的致瘤性：①软琼脂集落形成能力：体现体外恶性增殖特性，可用于抗肾癌药物体外活性初筛；②免疫抑制仓鼠及裸鼠成瘤能力：适用于体内肿瘤模型构建、药物体内 efficacy 评估及肿瘤微环境相关研究，是验证细胞恶性程度及药物体内作用的关键指标）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作流程：①取对数生长期细胞，用 0.25% 胰酶 – EDTA 消化液 37℃孵育 2-3 分钟，镜下观察细胞间隙增大、形态变圆时终止消化；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整细胞浓度至 1×10⁶-5×10⁶cells/mL；③分装至冻存管，4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（建议使用程序降温盒，减少低温损伤）→-80℃过夜→转入液氮长期保存。复苏时需 37℃水浴快速融化，1 分钟内完全溶解，离心去除冻存液，用新鲜培养基重悬，降低 DMSO 对细胞的毒性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过活性检测及致瘤性验证（软琼脂集落形成实验），下单后 48 小时内可安排发货，特殊需求如加急提供染色体倍性检测报告，可提前与供应方沟通协调）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，运输时采用恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，确保运输过程中温度波动不超过 ±2℃，到达后建议立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，保障复苏存活率） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及致瘤性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途，使用需符合《体外培养动物细胞系管理规范》《医学科研伦理审查办法》等相关法规及伦理要求，实验废弃物需经高压灭菌（121℃，30 分钟）后处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需注意：①传代操作：因细胞增殖速度较快，需及时传代避免过度密集；消化时避免延长时间，防止细胞破碎；吹打时使用 1mL 移液器轻柔吹打瓶壁，形成单细胞悬液，减少细胞团块，避免影响后续实验（如流式细胞术、转染等）；②致瘤性实验建议：开展软琼脂集落形成实验时，建议设置阳性对照（如已知高致瘤性肾癌细 RCC4）及阴性对照（如正常肾细胞 HK-2），确保实验体系有效性；裸鼠成瘤实验需选择 6-8 周龄雌性裸鼠（与细胞性别一致），接种细胞密度建议为 1×10⁶-2×10⁶cells / 只，接种部位选择右侧背部皮下，便于观察肿瘤生长；③药物筛选注意事项：因细胞对靶向 VEGF、mTOR 的药物敏感，可作为这类药物的阳性筛选模型；实验设计中需结合 35 小时倍增时间设定检测时间点（如药物处理后 48 小时、72 小时检测细胞活性），确保结果准确反映药物作用效果；④染色体倍性监测：长期培养过程中，建议每 5 代通过染色体核型分析检测倍性变化，若发现倍性异常比例升高，需及时更换低代数种子细胞，避免影响实验结果稳定性；⑤污染防控：实验操作需在超净工作台内进行，定期对培养箱、移液器、耗材等进行无菌检测，避免细胞交叉污染或微生物污染，确保实验结果可靠。
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