A-427人肺癌细胞（STR鉴定正确）

一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）

• 细胞名称：A-427 人肺癌细胞
  核心特色：肺来源肺癌（腺癌倾向）+ 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + MEM+10% FBS+1% PS+1% NEAA 复合培养基（NEAA 必需）+~40-70 小时倍增 + KRAS p.Gly12Asp 杂合突变（c.35G>A，ClinVar=VCV000012582）+ 裸鼠成瘤（腺癌样未分化肿瘤）+ 多机构保藏（ATCC; CRL-7906/HTB-53、DSMZ; ACC-234），可与 HCC827（肺腺癌 / EGFR 突变 / 1640 复合培养基）、NCI-H1299（非小细胞肺癌 /p53 缺失 / RPMI-1640）组成对比体系，用于肺癌 KRAS 突变机制、肺癌亚型（KRAS 突变 vs EGFR 突变）差异、复合培养基适配性及 KRAS 靶向研究。
• 细胞别称：A427；人肺癌细胞
  标注 “肺癌（腺癌倾向）+KRAS Gly12Asp 突变 + 贴壁 + MEM+1% NEAA”，区别于 EGFR 突变肺癌（HCC827）、p53 缺失肺癌（NCI-H1299），规避驱动基因突变及培养基选择混淆。
• 种属来源：人（无交叉污染，种属纯净，保障肺癌细胞贴壁能力、上皮形态、复合培养基适应及 KRAS 突变稳定性，适配肺癌 KRAS 靶向研究、驱动基因功能实验场景）
• 组织来源：肺（肺癌，腺癌倾向），由 Giard DJ 建立，源自 52 岁男性白人患者，保留肺癌恶性特征及腺癌分化倾向，核心优势为 “明确 KRAS 热点突变 + NEAA 依赖培养基 + 裸鼠成瘤”，适配 KRAS 突变肺癌发病机制、靶向药物筛选实验。
• 生长特性：贴壁生长（纯贴壁，操作简便）
  0.25% 胰酶 37℃孵育 4-6 分钟消化（上皮细胞贴壁中等紧密，消化时间长于短倍增肺癌细胞），汇合度 80%-90% 时按 1:2-1:3 传代，24 小时内贴壁稳定；需严格添加 1% NEAA（缺失易导致细胞形态异常、增殖缓慢），适合 KRAS 相关功能及药物敏感性实验。
• 细胞形态：上皮细胞样（呈多边形，胞质均匀，排列紧密，具肺癌腺癌典型上皮形态，与 HCC827 的上皮样（EGFR 突变）、NCI-H1299 的上皮样（p53 缺失）相比，可通过 “KRAS 突变 + MEM+NEAA” 快速鉴别，适配肺癌形态学验证及驱动基因特征关联实验）
• 背景简介：人肺癌细胞系，贴壁生长呈上皮细胞样，MEM+10% FBS+1% PS+1% NEAA 培养基可稳定培养；含 KRAS 热点杂合突变，裸鼠接种可形成腺癌样未分化肿瘤；无 EGFR 突变（HCC827）或 p53 缺失（NCI-H1299）特征，是研究 KRAS 突变肺癌、腺癌分化机制及靶向治疗的理想模型，可与其他驱动突变肺癌细胞对比探索突变对药物敏感性的影响。
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管，复苏后存活率≥85%，24 小时贴壁率≥90%，需通过 Sanger 测序验证 KRAS p.Gly12Asp 突变（杂合子比例≥45%）。
• 支原体检测：无（建议每 2 代 PCR 复测，避免污染影响 KRAS 相关实验及成瘤数据）
• 保藏机构：ATCC; CRL-7906、ATCC; HTB-53、DSMZ; ACC-234（国际权威保藏，肺癌属性、KRAS 突变及成瘤性经验证，可追溯性强，适配驱动基因实验细胞来源合规性要求）
• 培养基：MEM+10% FBS+1% PS+1% NEAA（1% NEAA 为必需成分，不可省略；血清选低内毒素≤10EU/mL，NEAA 需新鲜添加（每换液 1 次补加 1 次），开封后 2 周内用完，保障 KRAS 突变活性及细胞形态稳定，区别于 HCC827 的 1640 复合培养基、NCI-H1299 的基础 RPMI-1640）
• 培养条件：95% 空气 + 5% 二氧化碳，37℃，湿度 70%-80%，每 48 小时换液 1 次（沿瓶壁缓慢加液，避免冲击贴壁细胞）；培养箱温度波动需≤±0.5℃，防止温度变化影响 KRAS 蛋白表达。
• 冻存条件：无血清冻存液液氮储存（2×10⁶cells/mL），冻存液需额外添加 1% NEAA；4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜；复苏时 37℃水浴 1 分钟溶解，离心后用含 NEAA 的新鲜培养基重悬，减少对细胞的损伤。
• 突变与致瘤特征：① 驱动突变：KRAS p.Gly12Asp 杂合突变（可通过 Sanger 测序或数字 PCR 验证，肺癌 KRAS 热点突变，适配 KRAS 靶向药物（如 Sotorasib）筛选）；② 倍增与成瘤：~40-70 小时倍增（适配肺癌增殖异质性研究），裸鼠成瘤阳性（形成腺癌样未分化肿瘤，适配体内药效实验）
• 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运费，贴壁细胞运输脱落风险低，运输后需立即镜检，24 小时内验证贴壁状态）；冻存发货（加干冰运费），顺丰快递。
• 供应限制：仅限科学研究，禁止临床或人体使用。
• 特别说明：① 首次培养需通过测序验证 KRAS p.Gly12Asp 突变（杂合子峰图清晰），镜检确认上皮形态占比（≥85%），同步验证 1% NEAA 添加效果（细胞活力≥80%）；② NEAA 浓度不可随意调整（低于 0.5% 易导致细胞功能异常），建议使用 100×NEAA 母液精准稀释；③ 适配肺癌 KRAS 突变机制研究（如 RAS-MAPK 通路激活检测）、KRAS 靶向药物筛选（Sotorasib、Adagrasib）、肺癌驱动突变（KRAS vs EGFR）差异对比（与 HCC827），也可作为 NEAA 依赖模型优化肺癌复合培养基培养参数。