一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：A20-NLUC-puro 小鼠 B 细胞淋巴瘤细胞 (NLUC 标记)
种属来源：小鼠（注：原信息标注 “人”，结合细胞名称 “A20”（经典小鼠 B 细胞淋巴瘤细胞系）修正，以确保细胞来源准确性）
组织来源：淋巴瘤（B 细胞来源）
生长特性：悬浮生长（无贴壁特性，需按悬浮细胞操作规范培养）
细胞形态：淋巴母细胞样
细胞代数：未明确标注，建议优先选择低传代细胞（如 p3-p10），以更好维持纳米荧光素酶（NLUC）活性及 B 细胞淋巴瘤细胞特有的生物学特征
生物安全等级：未明确标注，参考同类小鼠淋巴瘤细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 NLUC 基因稳定表达的同时不影响细胞悬浮生长状态
背景与筛选验证
背景介绍
A20-NLUC-puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶（NLUC，具有荧光信号强、背景噪声低、检测灵敏度高的优势），性状稳定，可用作 NLUC 活性检测的阳性对照，也适用于小鼠 B 细胞淋巴瘤体内成像实验（如皮下成瘤、腹腔扩散模型的高精准荧光追踪）。该细胞保留 A20 细胞的核心特性 —— 典型小鼠 B 细胞淋巴瘤特征，是研究 B 细胞淋巴瘤发病机制、免疫治疗效果评估（如 CAR-T 细胞治疗、PD-1 抑制剂筛选）的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及淋巴瘤相关实验结果，保障数据准确性）；
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与小鼠 B 细胞淋巴瘤属性可靠。
培养与冻存
- 培养基配方：RPMI-1640 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+1% PS（青霉素 – 链霉素双抗）+0.05mM β- 巯基乙醇；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml）；其中 β- 巯基乙醇为细胞生长必需添加因子，可维持细胞活性，不可省略。
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
操作注意事项：
- 无需胰酶消化，换液时直接收集细胞悬液，1000-1200rpm 离心 5 分钟，弃上清后用含 β- 巯基乙醇的新鲜培养基重悬；
- 维持细胞密度在 1×10⁵-1×10⁶cells/ml，密度过低易导致细胞生长缓慢，过高则可能引发营养耗尽或细胞凋亡；
- NLUC 对光稳定性较好，但仍建议避免长时间强光直射，减少潜在荧光信号损耗。
- 冻存条件：冻存液：无血清冻存液；
操作要点：收集对数生长期的细胞悬液，离心后用含 0.05mM β- 巯基乙醇的冻存液重悬，调整细胞密度至 2×10⁶-5×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存）；复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化，离心后用含 β- 巯基乙醇的新鲜培养基重悬，避免冻存液残留对细胞的毒性影响，复苏后优先观察细胞活性及 NLUC 活性。
货期与发货
细胞货期：现货，1 周左右；
发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用防震包装减少震荡，避免细胞因剧烈晃动受损，保障接收后细胞活性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展实验时，需重点保障培养基中 β- 巯基乙醇的浓度精准，结合其 B 细胞淋巴瘤特性设计免疫治疗相关实验，利用 NLUC 的高灵敏度特性，实时监测体内肿瘤生长与治疗效果，提升实验数据的精准度。
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