一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:A549-FLUC-puro 人非小细胞肺癌细胞 (FLUC 标记)
细胞别称:A549-LUC-PURO;人非小细胞肺癌细胞 – LUC-PURO;人非小细胞肺癌细胞株 – 荧光素酶标记
种属来源:人
组织来源:肺
生长特性:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞代数:10 代以内(低传代范围,可更好维持荧光素酶(FLUC)表达稳定性及人非小细胞肺癌细胞特有的生物学特征)
生物安全等级:1 级
背景与筛选验证
背景介绍
A549-FLUC-puro 细胞稳定表达萤火虫荧光素酶,性状稳定,培养时无需抗生素常规维持。既可作为萤火虫荧光素酶活性检测的阳性对照,也适用于人非小细胞肺癌体内成像实验(如肺原位成瘤、转移模型的荧光追踪)。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因,亲本 A549 细胞具备明确背景:由 D.J.Griad 通过肺癌组织移植培养建系,源自 58 岁白人男性患者;细胞能通过胞苷二磷酸胆碱途径合成高含量不饱和脂肪酸的卵磷脂,是研究非小细胞肺癌发病机制、药物筛选的经典细胞株。
药筛浓度
A549-LUC 细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 Luc 基因稳定表达,同时不影响细胞贴壁生长及非小细胞肺癌相关特性(原文 “bsd 药筛浓度” 为表述误差,实际为 puro 药筛)。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
- 支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、荧光素酶活性及非小细胞肺癌相关实验结果,保障数据准确性);
- 保藏机构:ATCC; CCL-185、ATCC; CRM-CCL-185、ATCC; CRL-7909、BCRC; 60074、BCRJ; 0033、DSMZ; ACC-107、ECACC; 86012804(细胞来源可追溯,确保细胞株稳定性与非小细胞肺癌特性可靠)。
培养与冻存
- 培养基:DMEM(达尔伯克改良伊格尔培养基)+10% FBS(胎牛血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗)+0.5μg/ml puro(常规培养直接按此浓度添加,适配贴壁生长的非小细胞肺癌细胞营养需求);
- 培养条件:气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳,温度 37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整;避免频繁移动培养瓶,防止影响细胞贴壁状态);
- 冻存条件:无血清冻存液,液氮储存(冻存前确保细胞消化充分且处于对数生长期,保留荧光素酶活性,减少冻存损伤,保障复苏后活性)。
货期与运输
- 细胞货期:现货,1 周左右;
- 发货方式:复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输过程需尽量减少颠簸,降低细胞脱落概率。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主。


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