一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：B16F10-NLUC-puro 小鼠皮肤黑色素瘤细胞 (NLUC 标记)
种属来源：小鼠
组织来源：皮肤
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样混有梭形细胞
细胞代数：未明确标注，建议优先选择低传代细胞（如 p3-p10），以更好维持纳米荧光素酶（NLUC）活性及黑色素瘤细胞特有的形态与生物学特征
生物安全等级：未明确标注，参考同类小鼠肿瘤细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持，保障 NLUC 基因稳定表达的同时不影响细胞生长
背景与筛选验证
背景介绍
B16F10-NLUC-puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶（NLUC，具有荧光信号强、背景低、检测灵敏度高的优势），性状稳定，可用作 NLUC 活性检测的阳性对照，也适用于小鼠黑色素瘤体内成像实验（如肺转移模型、皮下成瘤模型的高精准荧光追踪）。
该细胞保留 B16F10 细胞的核心特性 —— 高转移性与黑色素瘤生物学特征，是研究黑色素瘤发病机制、转移规律及抗黑色素瘤药物筛选（如免疫治疗、靶向治疗评估）的经典细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及黑色素瘤相关实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与小鼠黑色素瘤属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方
RPMI-1640 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 1.0μg/ml，维持 0.5μg/ml），适配贴壁生长的黑色素瘤细胞营养需求，无需额外添加特殊因子。
2. 培养条件
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
- 操作注意事项：操作时动作轻柔，避免频繁移动培养瓶影响细胞贴壁；定期观察细胞形态，确保 “上皮细胞样混有梭形细胞” 的形态稳定（形态异常可能提示细胞特性改变）；待细胞密度达 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致 NLUC 活性下降。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 NLUC 活性与高转移性；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后存入液氮；复苏后优先观察细胞贴壁情况、形态特征及 NLUC 活性，确认细胞功能正常。
货期与发货
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率，保障接收后细胞活性与转移性稳定。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展体内实验时，建议直接参考成瘤验证中的参数（如小鼠品系、接种细胞量、荧光底物浓度与检测时间），可显著提升实验成功率；利用 NLUC 高灵敏度特性，可早期监测黑色素瘤的肺转移灶，精准评估药物对转移的抑制效果。
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