一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：B16F10-OVA-FLUC-puro 小鼠黑色素瘤细胞 (OVA/Fluc 双标)
种属来源：小鼠
组织来源：皮肤
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样混有梭形细胞
细胞代数：p3-p8（极低传代范围，能最大程度维持 OVA 抗原表达、荧光素酶（Fluc）活性及黑色素瘤细胞特有的生物学特征）
生物安全等级：1 级
背景与筛选验证
背景介绍
B16F10-OVA-FLUC-puro 细胞稳定双表达 OVA（卵清蛋白）抗原与萤火虫荧光素酶（Fluc），性状稳定，既可作为 Fluc 活性检测的阳性对照、OVA 抗原相关免疫实验的工具细胞，也适用于小鼠黑色素瘤体内成像实验（如皮下成瘤、肺转移模型的荧光追踪及肿瘤免疫治疗研究）。
该细胞通过慢病毒转染携带 Luc 基因，亲本 B16-F10 细胞为 B16-F0 细胞的亚系，保留黑色素瘤高转移、高免疫原性相关特性，是研究肿瘤免疫应答、免疫治疗药物筛选的经典细胞株。
puro 药筛浓度
B16F10-OVA-LUC 细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 1.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 0.5μg/ml 浓度 puro 维持。低浓度维持可保障 OVA 抗原与 Fluc 基因稳定表达，同时不影响细胞贴壁生长、形态特征及黑色素瘤相关功能。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、OVA/Fluc 双标特性及肿瘤免疫实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株双标特性、黑色素瘤属性稳定可靠。
培养与冻存
- 培养基：90% RPMI-1640 培养基（简称 “1640”）+10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+1.0μg/ml puro（仅药筛阶段按此浓度添加，常规培养建议用 0.5μg/ml puro 维持，适配贴壁生长的小鼠黑色素瘤细胞营养需求）；
- 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整；避免强光直射，减少 Fluc 活性潜在影响，同时保障细胞形态稳定；操作时动作轻柔，避免频繁移动影响细胞贴壁）；
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存；冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 OVA/Fluc 双标特性；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后冻存，减少复苏损伤；复苏后优先观察细胞贴壁情况、形态特征及 Fluc 活性。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率，保障接收后细胞活性与双标特性稳定。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；因细胞传代范围限定 p3-p8 且用于肿瘤免疫研究，建议收到后尽快开展实验，避免过度传代导致 OVA 抗原表达或 Fluc 活性下降；开展免疫实验时，需结合 OVA 抗原特性设计检测方案（如 T 细胞应答实验）。
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