一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：BEAS-2B 人支气管上皮样细胞（STR 鉴定正确）（与 SK-MES-1（肺鳞癌胸水转移、65 岁男）、HFL-1（正常肺成纤维、胎儿男）同属肺来源细胞，区别于 PC-9（肺腺癌）、NCI-H520（肺鳞癌原发），核心特色为 “正常支气管上皮 + 腺病毒 12-SV40 转化 + 生物安全等级 2 + 保留分化能力”，是肺癌微环境研究、上皮分化机制、正常 – 肿瘤细胞功能对比的关键正常对照模型；可与 SK-MES-1（肺鳞癌转移）、HFL-1（正常肺成纤维）、PC-9（肺腺癌）组成 “肺细胞 – 正常 / 肿瘤（上皮 / 成纤维）+ 细胞类型（支气管上皮 / 肺成纤维）+ 正常对照” 体系，探索肺癌发生中支气管上皮细胞的转化机制及微环境（上皮 – 成纤维）相互作用，同时因病毒转化特性，适合开展病毒致癌相关实验）
- 细胞别称：Beas-2B; BEAS 2B; BEAS2B; Beas2B; Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B；人支气管上皮样细胞；人支气管上皮样细胞（别称以 “BEAS-2B” 为核心，“Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B” 明确标注 “支气管上皮 + 病毒转化” 属性，与 “SK-MES-1”“PC-9” 等肺癌细胞前缀形成清晰区分；大小写、空格差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人支气管上皮样细胞” 精准定位 “正常支气管 + 上皮细胞类型”，避免与肺成纤维细胞（HFL-1）、肺癌细胞（SK-MES-1）混淆，贴合 “正常肺上皮细胞 + 字母数字 + 细胞类型” 的命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：未明确（STR 位点 Amelogenin：X,Y 明确为男性核型，建议结合临床支气管上皮细胞研究常用年龄（成人）推测为成人男性，与 SK-MES-1（65 岁男成人）形成 “成人男正常 – 老年男肿瘤” 年龄性别对照，与 HFL-1（胎儿男）形成 “成人男 – 胎儿男” 年龄梯度，与 HT-29（44 岁女成人肠癌）形成 “成人男正常肺 – 中年女肿瘤肠” 性别器官双重对比；成人来源适合模拟临床成人支气管上皮的生理状态，用于成人肺癌与正常上皮的差异研究）
- 组织来源：肺；具体部位：支气管；细胞性质：正常；细胞类型：上皮；转化方式：腺病毒 12-SV40 病毒杂交病毒转化（明确为正常支气管上皮病毒转化来源，保留正常上皮特有的 “鳞关分化能力、上皮标志物表达” 特性，同时因病毒转化具备永生化特征（区别于 HFL-1 的有限细胞系）；区别于 SK-MES-1 的肺鳞癌胸水转移灶、PC-9 的肺腺癌，可用于肺癌发生机制研究（如病毒转化与肺癌的关联）、支气管上皮分化功能研究，同时为临床肺癌诊断标志物（如上皮标志物）验证提供正常对照依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 SK-MES-1、PC-9 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 病毒转化永生化 + 保留分化能力”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖中等（结合病毒转化及正常上皮特性，推测倍增时间 28-36 小时，快于 SK-MES-1 的 50 小时，慢于 PC-9 的 35-50 小时），因病毒转化具备永生化特征（无有限传代限制，区别于 HFL-1 的有限细胞系）；②贴壁特性：贴壁强度低于 SK-MES-1（鳞癌转移细胞）、高于 PC-9（腺癌），细胞呈典型上皮样铺路石样排列（支气管上皮特征，无肿瘤细胞的不规则排列）；对数生长期为接种后 24-72 小时，传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 80% 时按 1:3-1:4 传代（高于 SK-MES-1 的 1:2），传代时需避免过度消化（防止破坏上皮细胞间连接），适合开展上皮分化、病毒转化相关实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，无肿瘤细胞特有的角质小体或黏液颗粒，核浆比小于 SK-MES-1（鳞癌），体现正常上皮与肿瘤细胞的形态差异；与 SK-MES-1（鳞癌上皮样、含角质小体）相比，排列更规整且无肿瘤相关形态特征，与 HFL-1（成纤维细胞样、梭形）相比，呈典型上皮细胞形态；可通过 “上皮样 + SV40 抗原阳性 + 无肿瘤形态” 快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过支气管上皮特异性标志物（如 CK18、TTF-1 低表达）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “病毒转化特性、鳞关分化能力、正常上皮形态” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代（多于 HFL-1 的 10 代，因病毒转化永生化），防止长期传代导致特性漂移，如分化能力下降（鳞关分化阳性率＜50%）、SV40 抗原表达减弱、细胞形态向梭形转变）
- 背景介绍：BEAS-2B 细胞从非癌个体正常支气管上皮病理切片分离，经腺病毒 12-SV40 病毒杂交病毒感染克隆建立，核心特性及应用如下：①正常与转化特色：保留正常支气管上皮的鳞关分化能力（可对血清反应进行分化），角蛋白（上皮标志物）及 SV40 抗原（病毒转化标志物）双阳性，是研究病毒转化与上皮分化的理想模型；②应用场景：广泛用于肺癌微环境研究（如与 SK-MES-1 共培养探索上皮 – 肿瘤相互作用）、支气管上皮分化机制（如血清诱导分化）、病毒致癌实验（如 Ad12-SV40 病毒对上皮细胞的转化影响），同时可作为肺癌研究的正常上皮对照，评估肿瘤细胞与正常上皮的分子差异）
- STR 位点信息：Amelogenin：X,Y（明确男性核型，与性别推测一致，无性别矛盾问题，验证细胞身份，排除交叉污染，与 SK-MES-1（X,Y）、HFL-1（推测 XY）形成性别核型对照）; D8S1179：13, 15；D21S11：28, 30（与 SK-MES-1 的 29,30 差异）；D7S820：10, 13（与 SK-MES-1 的 8 纯合子差异显著）；CSF1PO：9, 12（与 SK-MES-1 的 12 纯合子差异）；D3S1358：15, 17（与 SK-MES-1 的 16 纯合子差异）；TH01：7, 9.3（与 SK-MES-1 一致）；D13S317：13（纯合子，与 SK-MES-1 的 11 纯合子差异）；D16S539：12（纯合子，与 SK-MES-1 的 13 纯合子差异）；D2S1338：22, 23（与 SK-MES-1 的 19 纯合子差异）；D19S433：13.2, 15.2（罕见等位基因，核心鉴别位点）；vWA：17, 18（与 SK-MES-1 的 14 纯合子差异）；THOX：6, 11（推测为 TPOX，与 SK-MES-1 的 8 纯合子差异）；D18S51：18, 19（与 SK-MES-1 的 17 纯合子差异）；D5S818：12, 13（与 SK-MES-1 的 11 纯合子差异）；FGA：20, 24（与 SK-MES-1 一致）；（STR 位点含罕见等位基因（D19S433：13.2,15.2）及多个杂合子，与 SK-MES-1、PC-9 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC CRL-9609 数据比对，确认细胞身份及正常支气管上皮属性）
- 生物安全等级：2（高于 SK-MES-1、HFL-1、PC-9 的安全等级 1，操作时需遵循生物安全二级实验室防护规范（配备负压通风、个人防护装备（防护服、护目镜））；因含腺病毒 12-SV40 病毒转化序列，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 60 分钟处理（灭活病毒序列），避免病毒序列扩散；实验操作需在生物安全柜内进行，防止细胞气溶胶传播）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时上皮细胞呈多边形，需轻柔吹打避免细胞团块形成，确保计数准确；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（病毒转化细胞复苏活性高），且上皮样形态、SV40 抗原表达无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%（高于 SK-MES-1 的 60%-70%），标注 “正常支气管上皮病毒转化，生物安全等级 2，保留分化能力”，提醒用户关注生物安全防护及分化特性）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、分化能力及 SV40 抗原表达，保障与 SK-MES-1、HFL-1 平行实验（如共培养）的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-9609，ECACC; 95102433（国际权威机构（ATCC、ECACC）双重保藏，细胞来源可追溯性强，正常支气管上皮特性、病毒转化属性及分化能力经过严格验证，与 SK-MES-1 的多机构保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 DMEM 培养基，与 SK-MES-1 的 DMEM 一致，区别于 HFL-1 的 F12K；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配支气管上皮细胞的营养配比，支持其增殖、分化能力及 SV40 抗原合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中分化抑制因子影响鳞关分化能力；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响病毒转化特性及上皮形态）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 SK-MES-1、HFL-1 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；因生物安全等级 2，培养箱需定期消毒（如紫外线照射），避免交叉污染；与其他肺细胞培养条件兼容性高，仅需适配生物安全防护要求，便于多细胞株并行开展 “正常 – 肿瘤” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配上皮细胞特性与病毒转化属性：①选择对数生长期细胞（密度 80%，分化能力最佳、SV40 抗原表达稳定），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（短于 SK-MES-1 的 3-4 分钟，因贴壁强度略低），镜下见细胞收缩变圆即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（与 SK-MES-1 的 2.5×10⁶cells/mL 相近）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种于生物安全二级实验室的培养箱，避免 DMSO 对细胞分化相关蛋白（如角蛋白）及 SV40 抗原的影响）
- 染色体：47-48（近二倍体，染色体数目略高于正常二倍体（46 条），与 SK-MES-1（未明确）、HFL-1（正常二倍体推测）形成染色体倍性梯度；近二倍体特征符合正常上皮细胞经病毒转化后的核型特点，实验设计需注意染色体数目对基因表达检测的潜在影响，适合开展正常上皮转化相关的核型稳定性研究）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 培养基适应性培养、SV40 抗原检测（Western Blot 阳性）及分化能力验证（鳞关分化阳性），确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因生物安全等级 2，需提醒用户提前准备生物安全二级实验室条件，避免到货后延误培养）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用生物安全专用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后需立即在生物安全二级实验室开箱，放入 CO₂培养箱，24 小时后观察细胞状态，48 小时内首次换液，确保细胞快速适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态；冻存管需单独包装，标注 “生物安全等级 2，含病毒转化序列”，提醒运输及接收环节的安全防护） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及病毒转化特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 SK-MES-1、HFL-1 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因含腺病毒 12-SV40 病毒转化序列，需遵守病毒相关生物安全法规，实验前需提交生物安全审查备案，确保合规使用）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①生物安全防护：所有操作需在生物安全二级实验室进行，实验人员需穿戴防护服、护目镜、手套，使用一次性耗材（如移液管、培养瓶），实验后耗材及培养基需经 121℃高压灭菌 60 分钟处理，避免病毒序列扩散；②分化能力实验：开展鳞关分化实验时，可将细胞接种于含 2% FBS 的 DMEM 培养基（诱导分化），培养 72 小时后通过免疫荧光检测分化标志物（如 CK13，鳞上皮分化标志物），对比未诱导组（10% FBS）的表达差异，分析分化能力；③正常 – 肿瘤对比实验：搭配 SK-MES-1（肺鳞癌转移）开展实验时，可：a. 检测上皮标志物（CK18，BEAS-2B 高表达）、肿瘤标志物（如 MMP9，SK-MES-1 高表达）的差异，验证正常与肿瘤细胞特性；b. 对比两株细胞对化疗药（如顺铂）的 IC50 值（BEAS-2B 作为正常细胞 IC50 更低，对药物更敏感），评估药物对正常细胞的毒性；c. 检测病毒转化相关基因（如 SV40 T 抗原，BEAS-2B 阳性）的差异，分析病毒转化与肿瘤发生的关联；④长期培养监测：每 5 代检测 SV40 抗原表达（Western Blot）、分化能力（CK13 免疫荧光）及染色体数目（47-48 条），若发现 SV40 抗原表达下降或分化能力减弱，需立即更换低代数种子细胞；⑤培养基适配性：
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