一、细胞基本属性

• 细胞名称：Bend.3 小鼠微血管内皮细胞
• 细胞别称：bEND.3; b.End3; Bend.3; bEnd3; brain-derived Endothelial cells.3；小鼠微血管内皮细胞
• 种属来源：小鼠
• 年龄性别：6 周龄（明确年龄段，可更好匹配特定发育阶段的细胞功能研究）
• 组织来源：脑微血管（源于脑血管内皮组织，保留微血管内皮细胞核心特性）
• 生长特性：贴壁生长（培养时需保证培养瓶表面适宜贴附，传代可采用常规胰酶消化，避免过度消化破坏细胞间连接）
• 细胞形态：上皮细胞样（符合内皮细胞典型形态，可通过形态观察初步判断细胞状态）
• 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能稳定保留内皮细胞功能特性，减少传代导致的表型漂移）
• 背景介绍：
  1. 细胞经表达多瘤病毒中 T 抗原的 NTKmT 逆转录病毒转染转化；
  2. 内皮细胞特性已通过两项指标确认：①表达血管性血友病因子（von Willebrand factor）；②可摄入荧光标记的低密度脂蛋白（LDL）；
  3. 细胞对细胞因子及脂多糖（LPS）敏感：可被肿瘤坏死因子 α（TNF-α）、白介素 1（IL-1）或 LPS 诱导表达淋巴细胞派尔集合淋巴结高内皮细胞受体、粘膜血管定居因子（MAdCAM-1）及内皮细胞选择素（E-selectin），且诱导作用具有浓度和时间依赖性
• 生物安全等级：1（常规生物安全实验室即可操作，遵循无菌培养规范）
• 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或 1mL 冻存管包装
• 支原体检测：无（确保细胞无支原体污染，不干扰内皮细胞功能相关实验结果）
• 保藏机构：ATCC; CRL-2299；BCRC; 60515；ECACC; 96091929（权威机构保藏，细胞来源可靠，生物学特性经过验证）
• 培养基：90% DMEM（基础培养基）+10% FBS（胎牛血清，提供细胞生长所需营养）+PS（青霉素 – 链霉素双抗，预防细菌污染）
• 培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度 37℃（建议培养箱湿度维持 70%-80%，防止培养基过快蒸发导致渗透压改变）
• 冻存条件：无血清冻存液，液氮（-196℃）储存（冻存时采用梯度降温法：4℃冰箱 30 分钟→-80℃冰箱过夜→液氮长期保存，降低细胞冰晶损伤）
• 倍增时间：~24-32 小时（增殖速度适中，需根据倍增时间合理规划传代周期，避免细胞过度融合）
• 抗原表达情况：ICAM-1 +（细胞间黏附分子 1 阳性）; VCAM-1 +（血管细胞黏附分子 1 阳性）; MAdCAM-1 +（粘膜血管定居因子阳性）（黏附分子表达是内皮细胞参与免疫黏附、炎症反应的关键特征）
• 基因表达情况：表达血管性血友病因子（von Willebrand factor）、ICAM-1、VCAM-1、MAdCAM-1；且可被诱导表达内皮细胞选择素（E-selectin）（基因表达谱符合脑微血管内皮细胞功能定位，支持其用于血管生物学研究）
• 细胞货期：现货，1 周左右
• 发货方式：复苏发货（免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递（复苏细胞到货后需立即放入培养箱，24 小时后观察贴壁及生长状态；冻存细胞收到后需尽快转入液氮，避免干冰耗尽导致细胞解冻）
• 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
• 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主（注：该细胞是脑微血管内皮细胞研究的经典模型，适合用于血脑屏障机制、脑血管炎症反应、内皮细胞黏附功能等实验；因对细胞因子 / LPS 敏感，诱导实验需严格控制刺激物浓度与作用时间，确保结果重复性）