一、细胞基本属性(客服:小烽:18030101858)
细胞名称:C6-NLUC-Puro 大鼠脑胶质瘤细胞 (NLUC 标记)
种属来源:大鼠
组织来源:胶质瘤,脑
生长特性:贴壁生长
细胞形态:成纤维细胞样
细胞代数:10 代以内(低传代,能更好维持纳米荧光素酶(NLUC)活性及脑胶质瘤细胞生物学特性)
生物安全等级:未明确标注,参考同类大鼠肿瘤细胞标准,建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度:该细胞 puro(嘌呤霉素)药筛浓度为 1.0μg/ml,用于去除未转染细胞;培养过程中建议使用 0.5μg/ml puro 维持,保障 NLUC 基因稳定表达的同时不影响细胞贴壁生长状态
背景与筛选验证
背景介绍
C6-NLUC-Puro 细胞稳定表达纳米荧光素酶(NLUC,具有荧光信号强、背景噪声低、检测灵敏度高的优势),性状稳定,可用作 NLUC 活性检测的阳性对照,也适用于大鼠脑胶质瘤体内成像实验(如脑原位移植、尾静脉转移模型的高精准荧光追踪)。该细胞保留 C6 细胞的核心特性 —— 典型大鼠脑胶质瘤特征,是研究脑胶质瘤发病机制、血脑屏障穿透药物筛选(如靶向胶质瘤的小分子药物评估)的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格:1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装;
支原体检测:无(无支原体污染,避免干扰细胞增殖、NLUC 活性及脑胶质瘤相关实验结果,保障数据准确性);
保藏机构:未明确标注,可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息,确保细胞株稳定性与大鼠脑胶质瘤属性可靠。
培养与冻存
- 培养基配方:F-12K 培养基 + 2.5% FBS(胎牛血清)+15% HS(马血清)+PS(青霉素 – 链霉素双抗);药筛或常规维持时,需额外添加对应浓度 puro(药筛 1.0μg/ml,维持 0.5μg/ml);其中马血清为细胞生长必需成分,不可替换或省略,需确保血清浓度精准。
- 培养条件:
- 气相:95% 空气 + 5% 二氧化碳;温度:37℃(常规 CO₂培养环境即可,无需特殊调整);
- 操作注意事项:
- 传代时用胰酶消化贴壁细胞,待成纤维细胞样形态变圆、间隙增大后终止消化,避免过度消化损伤细胞;
- 定期观察细胞密度,待密度达 70%-80% 时及时传代,防止过度密集导致 NLUC 活性下降或生长停滞;
- NLUC 对光稳定性较好,但仍建议避免长时间强光直射培养瓶,减少潜在荧光信号损耗。
- 冻存条件:
- 冻存液:无血清冻存液;
- 操作要点:冻存前确保细胞处于对数生长期,保留 NLUC 活性与胶质瘤特性;胰酶消化收集细胞后,离心重悬于冻存液,调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml;梯度降温(4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存);复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化,离心后用含完整血清成分的新鲜培养基重悬,避免冻存液残留对细胞的毒性影响,复苏后优先观察细胞贴壁情况、成纤维细胞样形态及 NLUC 活性。
货期与运输
细胞货期:现货,1 周左右;
运输方式:复苏发货(T25 瓶免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用),顺丰快递;运输复苏细胞时,需使用防震包装减少颠簸,降低贴壁细胞脱落概率,保障接收后细胞活性与血清适应能力稳定。
供应限制
仅限于科学研究,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考,具体操作步骤以随货产品说明书为主;开展脑胶质瘤相关实验时,可结合尾静脉成瘤验证结果设计转移模型,利用 NLUC 高灵敏度特性,动态监测肿瘤在体内的扩散与药物干预效果,提升实验数据的临床相关性。


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