一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：C666-1-GFP-puro 人鼻咽癌细胞 (GFP 标记)
种属来源：人
组织来源：鼻（注：结合 “鼻咽癌细胞” 类型，更精准表述为 “鼻咽部”，符合细胞来源解剖部位）
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
细胞代数：10 代以内（低传代，能更好维持绿色荧光蛋白（GFP）活性及鼻咽癌细胞生物学特性）
生物安全等级：未明确标注，参考同类人鼻咽癌细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
puro 药筛浓度（重要提醒）：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 2.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 1.0μg/ml puro 维持，保障 GFP 基因稳定表达
背景与筛选验证
背景介绍
C666-1-GFP-puro 细胞稳定表达绿色荧光蛋白（GFP，荧光信号直观易检测，可通过荧光显微镜或流式细胞仪追踪），性状稳定，可用作 GFP 阳性对照细胞，也适用于人鼻咽癌体内外实验（如体外药物敏感性检测、体内皮下成瘤 / 淋巴结转移模型的荧光追踪）。该细胞保留 C666-1 细胞的核心特性 —— 典型人鼻咽癌细胞特征，是研究鼻咽癌发病机制、抗肿瘤药物筛选（如放化疗联合治疗、靶向药物效果评估）的专用细胞株。
细胞培养核心信息
基础参数
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、GFP 活性及鼻咽癌相关实验结果，保障数据准确性）；
保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与人鼻咽癌细胞属性可靠。
培养与冻存
- 培养基配方：RPMI-1640 培养基 + 15% FBS（胎牛血清，高浓度血清为细胞生长必需，不可降低浓度）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）；药筛或常规维持时，需额外添加对应浓度 puro（药筛 2.0μg/ml，维持 1.0μg/ml），适配贴壁生长的鼻咽癌细胞营养需求。
- 培养条件：
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整，需确保培养箱温度、湿度稳定）；
- 操作注意事项：
- 传代时用胰酶温和消化贴壁细胞，待上皮细胞样形态边缘收缩、间隙增大后，立即加培养基终止消化，避免过度消化损伤细胞；
- 定期观察细胞密度，待密度达 70%-80% 时及时传代，防止过度密集导致 GFP 活性下降或细胞凋亡；
- GFP 对光敏感，避免长时间强光直射培养瓶，减少荧光信号淬灭；
- 换液频率约 2-3 天 / 次，根据培养基颜色（变黄前）及时换液，确保高浓度血清提供充足营养。
- 冻存条件：
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 GFP 活性与鼻咽癌细胞特性；胰酶消化收集细胞后，离心重悬于冻存液，调整细胞密度至 1×10⁶-2×10⁶cells/ml；梯度降温（4℃ 30 分钟→-20℃ 1 小时→-80℃过夜→液氮长期保存）；复苏时快速将冻存管放入 37℃水浴融化，离心后用含 15% FBS 与 1.0μg/ml puro 的新鲜培养基重悬，避免冻存液残留对细胞的毒性影响，复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 GFP 荧光强度。
货期与运输
细胞货期：现货，1 周左右；
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输复苏细胞时，需使用防震包装减少颠簸，降低贴壁细胞脱落概率，保障接收后细胞活性与荧光稳定性。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展鼻咽癌相关实验时，可结合其易发生淋巴结转移的特性设计转移模型，利用 GFP 荧光信号实时监测肿瘤生长与转移过程，精准评估药物干预效果，提升实验数据的临床相关性。
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