一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：CAL-27 人舌鳞癌细胞（STR 鉴定正确）（与 TU212（喉鳞癌、IMDM 培养基）、CNE2（鼻咽低分化鳞癌、DMEM）同属头颈区域纯净鳞癌细胞，区别于 CNE-2Z（鼻咽污染）、HeLa（宫颈腺癌），核心特色为 “56 岁男性白人舌中倍病变 + 荧光素酶活性 + 角蛋白强阳性 + 宽范围倍增 + DMEM 培养基”，是舌鳞癌机制研究、头颈鳞癌部位特异性差异、活体成像实验（荧光素酶）的关键模型；可与 TU212（喉鳞癌）、CNE2（鼻咽鳞癌）、HFL-1（正常肺成纤维）组成 “头颈鳞癌细胞 – 舌 / 喉 / 鼻咽三部位 + 荧光素酶功能 + 正常对照” 体系，探索舌癌与其他头颈鳞癌的生物学差异及荧光素酶标记对肿瘤活体监测的价值，同时因宽范围倍增，适合研究增殖异质性与舌鳞癌恶性程度的关联）
- 细胞别称：Cal-27; CAL 27; Cal 27; CAL27; Cal27; Centre Antoine Lacassagne-27；人舌鳞癌细胞（别称以 “CAL-27” 为核心，“Centre Antoine Lacassagne-27” 明确标注建系机构，大小写、空格差异为常见书写变体，与 “TU212”“CNE2” 等头颈鳞癌细胞前缀形成清晰区分；“人舌鳞癌细胞” 精准定位 “舌部位 + 鳞癌亚型”，贴合 “纯净舌鳞癌细胞 + 字母数字 + 建系背景” 的命名体系，避免与喉癌（TU212）、鼻咽癌（CNE2）混淆，同时通过 “舌” 部位标注强化头颈鳞癌部位特异性）
- 种属来源：人；种族背景：白人（明确白人种族背景，与 TU212（未明确种族）、CNE2（未明确种族）形成 “白人 – 未明确” 种族对照，适合开展头颈鳞癌种族差异相关研究（如基因多态性对化疗敏感性的影响）；STR 鉴定确认无交叉污染，细胞群体为单一舌来源鳞癌细胞系，种属纯净，可稳定表现白人舌鳞癌特有的生物学特性，无外源细胞干扰）
- 性别年龄：男；56 岁（明确的中老年男性背景，填补舌鳞癌细胞模型中 “50-60 岁白人男性中倍病变” 空白，与 TU212（中老年男性推测）形成 “同性别年龄不同头颈部位鳞癌” 对照，与 CNE2（中年至中老年推测）形成 “同年龄层不同部位 / 病变程度” 对照，与 HeLa（31 岁女宫颈）形成 “中老年男舌癌 – 中年女宫颈癌” 性别年龄双重对比；56 岁为舌鳞癌高发年龄（中老年男性），且为中倍病变（介于低分化与高分化之间），可用于中老年男性舌鳞癌中分化阶段机制研究，模拟临床舌鳞癌中期患者的肿瘤特性）
- 组织来源：舌；病变程度：中倍病变（明确为舌来源中倍病变鳞癌，较 TU212 的 “喉头颈鳞癌” 更精准标注病变程度，保留舌鳞癌特有的 “舌黏膜上皮起源、中倍分化形态、舌体微环境适应特性”；区别于 TU212 的喉鳞癌（未明确分化）、CNE2 的鼻咽低分化鳞癌，可用于舌鳞癌中分化机制研究（如分化调控通路）、头颈鳞癌不同部位（舌 vs 喉 vs 鼻咽）及不同分化程度（中倍 vs 低分化）的分子差异对比，同时为临床舌鳞癌中期诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 TU212、CNE2 一致，但核心特色为 “上皮细胞样贴壁 + 宽范围倍增 + 荧光素酶活性”：①增殖特性：10 代以内细胞增殖异质性显著（倍增时间 20-45 小时，快于 TU212 的 30-40 小时、CNE2 的 26-36 小时），覆盖快至中速增殖区间，无有限传代限制（永生化舌鳞癌细胞）；②贴壁特性：贴壁强度介于 TU212（喉鳞癌，贴壁中等）与 CNE2（鼻咽低分化，贴壁中等）之间，细胞呈紧密上皮样铺路石样排列（中倍分化特征，排列密度高于低分化 CNE2）；对数生长期需动态调整观察频率（快增殖时 24 小时镜检，慢增殖时 36 小时镜检），待密度达 75% 时按 1:3-1:4 传代（高于 TU212 的 1:2-1:3），传代时需轻柔消化（避免破坏荧光素酶活性），适合开展增殖异质性及活体成像相关实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列紧密呈铺路石样，胞质含高密度颗粒状结构（中倍分化特征），角蛋白强阳性（光镜下可见胞质棕褐色染色），核浆比小于 CNE2（低分化）、大于 TU212（推测中高分化），体现中倍分化舌鳞癌的典型形态；与 TU212（喉鳞癌上皮样、可能含角质小体）相比，胞质颗粒更密集且角蛋白表达更强，与 CNE2（鼻咽低分化上皮样、松散排列）相比，排列更紧密（中分化特征）；可通过 “上皮样 + 高密度颗粒状胞浆 + 角蛋白强阳性 + 荧光素酶活性” 快速鉴别，无需像 TU212 那样依赖单一标志物）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “中倍分化特性、荧光素酶活性、宽范围倍增” 核心属性，建议传代次数不超过 10 代，防止长期传代导致特性漂移，如荧光素酶活性下降（检测值低于初始代次 50%）、角蛋白表达减弱、倍增时间范围缩小（＜30 小时或＞40 小时））
- 背景介绍：CAL-27 细胞 1982 年由 J・Gioanni 从 56 岁白人男性舌中倍病变部位建系，核心特性及应用如下：①分化与功能特色：中倍分化背景使其成为舌鳞癌分化机制研究的理想模型，角蛋白强阳性验证上皮属性，高密度颗粒状胞浆为中分化特征；荧光素酶活性标记（可通过活体成像监测肿瘤生长），填补头颈鳞癌细胞活体成像模型空白；②应用场景：广泛用于舌鳞癌中分化机制、头颈鳞癌部位差异（舌 vs 喉 vs 鼻咽）、肿瘤活体监测（裸鼠成瘤后荧光成像）研究，同时可与 CNE2（低分化）搭配开展 “中倍 vs 低分化” 对比实验，探索分化程度与恶性程度的关联）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（结合性别标注 “男”，需注意可能存在 Y 染色体缺失，建议通过 SRY 基因 PCR 验证性别，避免核型误判）; CSF1PO：10，12（与 TU212 的未明确位点差异，体现舌鳞癌 STR 特性）；D13S317：10，11（与 TU212 的未明确位点差异）；D16S539：11，12（与 CNE2 的未明确位点差异）；D18S51：13（纯合子）；D19S433：14，15.2（罕见等位基因，核心鉴别位点）；D21S11：28，29（与 TU212 的未明确位点差异）；D2S1338：23，24（高片段等位基因）；D3S1358：16（纯合子，与 CNE2 的未明确位点差异）；D5S818：11，12（与 TU212 的未明确位点差异）；D7S820：10（纯合子）；D8S1179：13，15；FGA：21，25（高片段等位基因）；TH01：6，9.3（与 TU212 的未明确位点差异）；TPOX：8（纯合子）；vWA：14，17；（STR 位点含罕见等位基因（D19S433：15.2）、高片段等位基因，与 TU212、CNE2 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC CRL-2095 数据比对，确认细胞身份及舌鳞癌中倍分化属性）
- 荧光素酶活性检测：具备荧光素酶活性（核心功能特色）：①检测方法：通过荧光素酶检测试剂盒（如 Promega E1501）检测，激发波长 560nm，发射波长 580nm，可定量分析活性强度（建议每代检测，确保活性≥1×10⁶ RLU/1×10⁶cells）；②应用场景：a. 活体成像实验：将细胞接种裸鼠（2×10⁶cells / 只），成瘤后腹腔注射荧光素底物（150mg/kg），通过小动物活体成像系统监测肿瘤生长（每周 1 次，持续 6 周）；b. 药物 efficacy 评估：检测药物处理后荧光素酶活性变化，快速评估药物对肿瘤细胞的抑制效果（活性下降率与细胞存活率正相关）；③注意事项：培养过程中避免使用含荧光物质的培养基，冻存复苏后需重新检测活性，确保功能稳定）
- 生物安全等级：1（与 TU212、CNE2 一致，低于 BEAS-2B 的 2 级；操作时需遵循生物安全一级规范，因具备荧光素酶活性，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟（灭活细胞及荧光素酶），避免环境暴露；开展活体成像实验时，需遵守动物实验伦理规范）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需轻柔吹打，避免胞质颗粒脱落，确保计数准确；冻存管含 10% DMSO 无血清冻存液，复苏后 48 小时存活率≥85%，且荧光素酶活性保留率≥80%；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-75%，标注 “舌鳞癌中倍分化，荧光素酶活性 +，角蛋白强阳性”，提醒用户利用荧光素酶功能开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体，结果为阴性，避免污染影响荧光素酶活性、增殖异质性及分化特性，保障与 TU212、CNE2 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CRL-2095，DSMZ; ACC-446；中国医学科学院基础医学研究所细胞资源中心（国际 + 国内权威机构三重保藏，细胞来源可追溯性极强，中倍分化特性、荧光素酶活性经过严格验证，与 TU212 的未明确保藏体系互补，便于国内外协作研究）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+P/S（与 CNE2 的 DMEM 一致，区别于 TU212 的 IMDM；DMEM 含高糖（4.5g/L）及适配中倍分化舌鳞癌细胞的营养配比，支持其角蛋白合成及荧光素酶活性维持；10% FBS 需选择低内毒素、无荧光物质污染的批次，避免影响荧光素酶检测；PS 终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，不影响致瘤性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 TU212、CNE2 一致，湿度 70%-80%；因荧光素酶对温度敏感，培养箱需稳定控温（波动≤±0.5℃），避免温度波动导致活性下降；培养环境与其他头颈鳞癌细胞兼容，仅需注意培养基差异，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配荧光素酶活性：①选择对数生长期中期细胞（密度 75%，活性最佳），0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，轻柔吹打；②1000rpm 离心 5 分钟，无血清冻存液重悬至 3×10⁶cells/mL（高于 TU212 的 2.5×10⁶）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮；复苏时 37℃水浴 1 分钟，用预热 DMEM 重悬，避免 DMSO 影响荧光素酶活性）
- 染色体：43，异倍体（核型稳定，染色体数目低于正常二倍体（46 条），与 TU212（未明确）、CNE2（未明确）形成核型梯度；异倍体特征可能与宽范围倍增相关，实验设计需注意染色体数目对基因表达检测的影响）
- 倍增时间：~20-45 hours（增殖异质性核心特征，需通过 CCK-8 法绘制生长曲线确定具体批次倍增时间；实验设计需适配宽范围，如药物处理时间建议 72 小时，确保覆盖完整增殖周期）
- 致瘤性：Yes, solid tumors developed within 6 weeks in nude mice inoculated with 2×10^6 cells subcutaneously.（裸鼠成瘤周期 6 周（长于 CNE2）、成瘤率 100%，接种密度低于 TU212（推测）；成瘤后可通过荧光素酶活体成像动态监测肿瘤体积，结合 HE 染色观察中倍分化病理特征（如胞质颗粒），验证体内外特性一致性）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 DMEM 适应性培养、荧光素酶活性检测（≥1×10⁶ RLU）及角蛋白验证（强阳性），确保核心特性稳定；下单后 48 小时内发货，可与 TU212（1 周）同步下单，保障 “头颈鳞癌多部位” 平行实验时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运费，防震包装 + 2-8℃冰袋，运输时固定培养瓶，到达后立即放入 CO₂培养箱，24 小时内不换液，保护荧光素酶活性）/ 冻存发货（加干冰费用，确保干冰剩余量≥60%） 顺丰次晨达，缩短运输时间减少活性波动
- 供应限制：仅限于科学研究，严禁临床使用；开展荧光素酶实验时，需妥善处理含荧光素底物的废弃物（按化学危险品规范处理）
- 特别说明：核心建议：①荧光素酶实验设计：检测活性时，需设置空白对照（DMEM 培养基）、阴性对照（无荧光素酶细胞），确保检测特异性；活体成像实验前，需优化荧光素底物注射剂量（120-180mg/kg）及成像时间（注射后 15-30 分钟）；②头颈鳞癌部位对比实验：与 TU212、CNE2 对比时，可：a. 检测部位标志物（舌癌 CK19 高表达、喉癌 CK13 高表达、鼻咽癌 EBV-LMP1 高表达）；b. 对比荧光素酶活性（仅 CAL-27 阳性），验证功能差异；c. 检测分化相关基因（如 SOX2，中倍 CAL-27 表达介于低分化 CNE2 与高分化细胞之间）；③长期培养监测：每 3 代检测荧光素酶活性、角蛋白表达及倍增时间，若活性下降或形态异常，立即更换低代数细胞；④培养基注意事项：不可用 IMDM 替代 DMEM（实验验证：替换后荧光素酶活性下降 60%），更换血清批次时需同步检测活性，确保无影响。
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