一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：Calu-1 人肺癌细胞（与 A549（肺原发、58 岁男、KRAS 突变）、SW620（结直肠转移、51 岁男）同属人类肿瘤细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、BEAS-2B（正常支气管上皮），核心特色为 “47 岁男性肺表皮瘤 Ⅲ 期肋膜转移 + H-ras 癌基因 + 中等增殖 + 肺转移灶超微结构特色”，是肺癌晚期转移机制、ras 亚型（H-ras）功能、肺表皮瘤诊疗研究的关键模型；可与 A549（肺原发）、BEAS-2B（正常支气管）、SW620（结直肠转移）组成 “肺肿瘤原发 / 转移（A549/Calu-1）+ 正常对照 + 跨器官转移（肺 – 结直肠）” 体系，探索肺癌从 Ⅲ 期到肋膜转移的恶性进展，同时因 H-ras 表达，可与 A549 的 KRAS 突变形成 “不同 ras 亚型” 对比实验，研究 ras 家族致癌差异）
- 细胞别称：CaLu-1; CALU-1; CALU 1; Calu 1; CALU1; Calu1；人肺癌细胞（别称以 “Calu-1” 为核心，大小写、连接符与空格差异为常见书写变体，“CaLu-1”“CALU-1” 等均为国际通用表述，统一标注便于实验记录检索；“人肺癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，贴合 “肺癌细胞 + 字母数字组合” 体系，避免与结直肠（SW 系列）、胃（SNU 系列）等其他器官癌细胞混淆，同时通过 “肺表皮瘤” 补充病理亚型，进一步精准定位）
- 性别年龄：男；47 岁（明确的中年男性背景，填补肺癌细胞模型中 “45-50 岁中年转移灶” 空白，与 A549（58 岁男）形成 “中年 – 中老年” 男性年龄梯度，与 SW620（51 岁男）形成 “同龄男性不同器官转移” 对照，与 HT-29（44 岁女）形成 “中年男 – 中年女” 性别对照；47 岁处于肺癌 Ⅲ 期高发且易出现局部转移（肋膜转移）的临床阶段，可用于中年男性肺癌晚期转移机制研究，适合模拟临床中年男性肺表皮瘤 Ⅲ 期肋膜转移的研究场景）
- 组织来源：器官：肺；肿瘤分期：Ⅲ 期；疾病：表皮瘤；取材转移灶：肋膜（核心特色为明确的肺表皮瘤 Ⅲ 期肋膜转移灶来源，保留肺癌晚期转移特有的 “局部侵犯（肋膜定植）、ras 癌基因激活、超微结构适应性改变” 特性；区别于 A549 的肺原发灶、SW620 的结直肠淋巴结转移，可用于肺癌 Ⅲ 期肋膜转移机制研究（如肿瘤细胞穿透胸膜屏障）、肺表皮瘤与腺癌（A549 推测亚型）的病理差异对比，同时为临床肺表皮瘤 Ⅲ 期转移患者的诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 A549、SW620 一致，核心特色为中等增殖速度（~37 小时倍增时间，慢于 A549 的 22 小时，快于 SW1116 的 96-144 小时）；对数生长期为接种后 24-60 小时，贴壁强度低于 A549、与 SW620 相近，细胞间连接较紧密，呈单层均匀分布（因转移灶特性，排列略松散于 A549）；传代需每 24 小时镜检 1 次，待密度达 70%-80% 时按 1:2-1:3 传代（低于 A549 的 1:3-1:4），适合开展肺癌转移相关功能实验（如 Transwell 侵袭、肋膜细胞共培养）及 ras 亚型对比实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞展开后呈多边形，排列呈铺路石样，胞质丰富，含肺表皮瘤特有的分泌颗粒（光镜下可见），核浆比略大于 A549（转移细胞特征），具备肺表皮瘤细胞典型上皮形态；与 A549（肺腺癌上皮样、排列紧密）相比，细胞间隙略宽，与 SW620（结直肠转移上皮样、排列松散）相比，形态更规整；可通过 “上皮样 + 肺转移背景” 结合 H-ras 表达快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺特异性标志物（如 TTF-1，Calu-1 低表达，区别于 A549 的高表达）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “肋膜转移特性、H-ras 表达、超微结构特色” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如增殖速度异常（＜30 小时或＞45 小时）、H-ras 表达下降、超微结构中微绒毛减少）
- 背景简介：Calu-1 细胞核心特性及应用如下：①超微结构与分子特色：超微结构含众多微绒毛（利于细胞黏附转移）、显著粗面内质网（增强蛋白合成，如转移相关酶）、溶酶体（参与细胞侵袭）、脂包含体（肺表皮瘤代谢特征），无病毒颗粒，体现转移灶细胞的结构适应性；含 H-ras 癌基因（与 A549 的 KRAS 突变形成 ras 家族亚型差异），是研究 H-ras 致癌机制的理想模型；②应用场景：广泛用于肺癌肋膜转移机制（如胸膜侵袭信号通路）、ras 亚型功能差异（H-ras vs KRAS）、肺表皮瘤病理特征研究，同时可与 A549 搭配开展 “原发 / 转移 + 不同 ras 亚型” 对比实验，探索 ras 突变与肺癌转移的关联）
- STR 位点信息：未明确标注（建议实验前参考保藏机构（ATCC HTB-54）提供的 STR 图谱进行身份验证，核心鉴别可通过 H-ras 表达检测（如 Western Blot）及肺表皮瘤特异性标志物（如 CK5/6）检测，确保细胞身份无误，避免与其他肺癌细胞（如 A549）混淆）
- 生物安全等级：1（与 A549、SW620、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因是转移灶细胞，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免细胞残留污染）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（中等增殖特性导致复苏活性稳定），且 H-ras 表达、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 60%-70%，标注 “肺表皮瘤 Ⅲ 期肋膜转移灶，含 H-ras 癌基因”，提醒用户利用转移及分子特性开展实验）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞增殖、H-ras 信号通路及超微结构完整性，保障与 A549、SW620 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; HTB-54，ECACC; 93120818；中国科学院分子细胞科学卓越创新中心（国际权威机构（ATCC、ECACC）与国内顶尖机构双重保藏，细胞来源可追溯性强，肺表皮瘤 Ⅲ 期转移特性、H-ras 表达及超微结构经过严格验证，与 A549（多国际机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：89% McCoy’s 5A+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 McCoy’s 5A 培养基，与 A549 的 DMEM、SW620 的 L15 显著不同；McCoy’s 5A 含独特氨基酸配比及微量元素，适配肺表皮瘤转移细胞的代谢需求，支持其 H-ras 蛋白合成及超微结构维持；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中 ras 通路抑制剂影响 H-ras 活性；③1% PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞致瘤性及转移特性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 A549 的常规 CO₂培养条件一致，区别于 SW620 的 100% 空气；培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与 A549、GES-1 等常规细胞的培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “肺原发 / 转移” 对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配贴壁及转移特性：①选择对数生长期细胞（密度 70%，增殖活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟（长于 A549 的 1.5-2 分钟，因贴壁强度略低），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免破坏超微结构（如微绒毛）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2.5×10⁶cells/mL（高于 A549 的 3×10⁶cells/mL，补偿转移细胞冻存损失）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 McCoy’s 5A 培养基重悬，直接接种于 5% CO₂环境，避免 DMSO 对 H-ras 蛋白功能及超微结构的影响）
- 倍增时间：~37 hours（增殖速度中等，慢于 A549 的 22 小时（快），快于 SW1116 的 96-144 小时（慢），对数生长期为接种后 24-60 小时，需每 24 小时镜检 1 次细胞密度，传代间隔 3-4 天；实验设计需适配中周期，如药物处理时间建议 48-72 小时，H-ras 信号通路实验需在对数生长期中期开展（接种后 36 小时左右））
- 致瘤性：Yes, in steroid treated hamsters.（明确的类固醇处理地鼠致瘤能力，因是转移灶细胞，致瘤特性可能更显著（如成瘤速度快于原发灶 A549）；建议选择 6-8 周龄类固醇处理地鼠（如地塞米松预处理），接种密度为 1×10⁷cells / 只（与 A549 一致），接种后每 3 天测量肿瘤体积（长 × 宽 ²/2），28 天后观察肿瘤病理特征（如表皮瘤典型结构），同时检测肿瘤组织中 H-ras 表达，验证体内外特性一致性，适合开展肺癌转移灶体内药物 efficacy 评估）
- 基因表达情况：Blood Type A; Rh+（血型抗原 A 型、Rh 阳性，与 A549（未明确血型）、SW620（A 型 Rh+）血型一致，可通过血型鉴定实验辅助验证细胞身份，避免与其他肺癌细胞交叉污染；血型抗原与肿瘤免疫相关，可用于肺癌转移灶免疫逃逸机制研究（如 ABO 血型与免疫细胞浸润的关联），同时为细胞身份多重验证提供依据）; HLA A10, A11, B15, Bw35（HLA 分型明确，可用于肿瘤免疫相关实验（如 T 细胞识别、免疫治疗靶点筛选），与 A549（未明确 HLA 分型）形成免疫表型差异对比，适合开展肺癌不同亚型的免疫原性研究）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 McCoy’s 5A 培养基适应性培养、H-ras 表达检测（Western Blot）及超微结构验证（电镜观察微绒毛），确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 A549（1 周货期）同步下单，保障 “肺原发 / 转移” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中使用固定支架防止培养瓶晃动，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，24 小时后观察细胞状态，36 小时内首次换液，确保细胞快速适应环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及 H-ras 表达特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 A549、SW620 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因具备晚期转移特性及 H-ras 致癌基因，实验过程中需妥善处理含该细胞的培养基，避免环境暴露，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①H-ras 实验设计：开展 ras 亚型对比实验时，可通过 Western Blot（一抗：anti-H-ras 抗体，货号：ab16796）检测 Calu-1 的 H-ras 表达，与 A549 的 KRAS 表达（一抗：anti-KRAS 抗体，货号：ab180772）对比，分析两株细胞的 ras 通路活性（如 p-RAF、p-ERK 表达）差异；药物筛选可选择 H-ras 特异性抑制剂（如 Tipifarnib，浓度梯度 0.01-1μM），处理 48 小时后用 CCK-8 法检测活性，计算 IC50 值，与 A549 的 KRAS 抑制剂敏感性对比；②超微结构研究：观察微绒毛、粗面内质网等结构时，需收集对数生长期细胞，用 2.5% 戊二醛固定，经锇酸后固定、梯度脱水、环氧树脂包埋，超薄切片后通过透射电镜观察，可与 A549 的超微结构对比，分析转移灶的结构适应性改变；③肺癌转移实验：开展肋膜转移模拟实验时，可将 Calu-1 细胞与大鼠胸膜间皮细胞（如 RPMI-2650）共培养，通过 Transwell 共培养体系观察细胞侵袭能力，同时检测侵袭相关基因（如 MMP2、MMP9）的表达，验证转移特性；④“原发 / 转移” 对比实验：搭配 A549 开展实验时，可：a. 检测转移相关基因（如 CXCR4，Calu-1 高表达）、ras 通路基因（H-ras vs KRAS）的差异，分析肺癌进展的分子机制；b. 对比两株细胞对化疗药（如紫杉醇）的 IC50 值（Calu-1 因转移特性可能 IC50 更高），评估转移对药物敏感性的影响；c. 检测肺表皮瘤标志物（如 CK5/6，Calu-1 高表达）与腺癌标志物（如 TTF-1，A549 高表达）的差异，验证病理亚型特性；⑤长期培养监测：每 5 代检测 H-ras 表达（Western Blot）、倍增时间（需在 37 小时左右）及细胞形态，若发现 H-ras 表达下降或形态改变，需立即更换低代数种子细胞；⑥培养基适配性：若实验室无 McCoy’s 5A 培养基，可尝试用 RPMI-1640 培养基替代，但需提前进行适应性培养（传代 2-3 次），并检测 H-ras 表达及增殖速度，确保特性无显著改变。
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