一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：Calu-3 人肺癌腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 Calu-1（中年肺表皮瘤转移、47 岁男）、A549（中老年肺腺癌原发、58 岁男）同属肺癌细胞，区别于 BEAS-2B（正常支气管上皮）、SW620（结直肠转移），核心特色为 “25 岁年轻白人男性胸水腺癌转移 + 易成团慢贴壁 + 化疗后背景”，是年轻肺癌患者发病机制、化疗耐药、成团生长机制研究的稀缺模型；可与 Calu-1（中年转移）、A549（中老年原发）、BEAS-2B（正常）组成 “肺癌细胞 – 年龄梯度（25 岁→47 岁→58 岁）+ 原发 / 转移 + 病理亚型（腺癌 / 表皮瘤）+ 正常对照” 体系，探索年龄与肺癌恶性程度、治疗响应的关联，同时因化疗后背景，可用于年轻肺癌患者化疗耐药机制研究）
- 细胞别称：CaLu-3; CALU-3; Calu 3; Calu3; CALU3；人肺腺癌细胞（别称以 “Calu-3” 为核心，与 Calu-1 的 “Calu-1” 形成 “同前缀 – 不同编号” 的肺癌细胞系列关联，大小写、连接符与空格差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；“人肺腺癌细胞” 明确标注器官、病理亚型，贴合 “肺癌细胞 + 字母数字 + 病理亚型” 体系，避免与 Calu-1 的 “肺表皮瘤” 及结直肠癌细胞混淆，精准定位腺癌亚型）
- 性别年龄：男；25 岁（明确的年轻白人男性背景，填补肺癌细胞模型中 “20-30 岁年轻患者” 空白，与 Calu-1（47 岁男）形成 “年轻 – 中年” 男性年龄梯度，与 A549（58 岁男）形成 “年轻 – 中老年” 梯度，与 HT-29（44 岁女）形成 “年轻男 – 中年女” 性别年龄双重对比；25 岁远低于肺癌高发年龄（50 岁以上），且为胸水转移灶，可用于年轻男性肺癌早发转移机制（如遗传因素、生活习惯影响）、化疗敏感性差异研究，适合模拟临床年轻白人男性肺腺癌化疗后胸水转移的研究场景）
- 组织来源：肺；转移灶；胸水腺癌（核心特色为明确的肺腺癌胸水转移灶来源，保留肺癌胸水转移特有的 “液体微环境适应、低贴壁性、化疗耐药” 特性；区别于 Calu-1 的肋膜转移、A549 的肺原发，可用于肺癌胸水转移机制研究（如肿瘤细胞在胸水中的存活、定植）、肺腺癌化疗后转移复发研究，同时为临床年轻肺癌患者胸水转移的诊疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（纯贴壁生长模式与 Calu-1、A549 一致，但核心特色为 “易成团 + 贴壁时间长 + 慢增殖”：①成团特性：传代后易形成 5-10 细胞小团（非单个均匀分布），贴壁后团内细胞逐渐展开；②贴壁时间：需 24-48 小时才能完全贴壁（Calu-1 仅需 12-24 小时），24 小时内移动易导致未贴壁细胞脱落；③增殖速度：35-45 小时倍增时间（与 Calu-1 的 37 小时相近，慢于 A549 的 22 小时）；对数生长期为接种后 48-96 小时，贴壁强度低于 Calu-1、远低于 A549，细胞间连接松散（因成团生长）；传代需每 36 小时镜检 1 次，待密度达 70% 时按 1:2 传代（低于 Calu-1 的 1:2-1:3），传代时需轻柔吹散细胞团（避免过度吹打导致损伤），适合开展成团生长相关转移实验及化疗耐药研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞展开后呈多边形，未完全贴壁时呈圆形细胞团，贴壁后呈松散铺路石样，胞质丰富，含肺腺癌细胞特有的分泌颗粒（光镜下可见），核浆比略大于 Calu-1（年轻转移细胞特征）；与 Calu-1（肺表皮瘤上皮样、排列较规整）相比，成团生长且排列更松散，与 A549（肺腺癌上皮样、排列紧密）相比，贴壁更慢且密度更低；可通过 “上皮样 + 易成团 + 慢贴壁” 形态快速鉴别，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过肺腺癌特异性标志物（如 TTF-1，Calu-3 高表达）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “易成团、慢贴壁、化疗耐药” 核心特征，建议传代次数不超过 10 代（少于 Calu-1 的 12 代），防止长期传代导致特性漂移，如成团性减弱（单个细胞占比＞70%）、贴壁时间缩短（＜24 小时）、化疗耐药性下降）
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- 贴壁与成团管理：传代后 24-48 小时内严禁移动培养瓶（包括观察时的轻微晃动），培养箱内托盘需固定，避免震动导致未贴壁细胞团脱落；48 小时后镜检观察贴壁情况，未完全展开细胞团比例≤40% 为正常，若超过 60% 需检查血清批次（是否含贴壁促进因子）及培养箱温度（波动需＜±0.5℃）；
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- 传代操作把控：因易成团，传代时用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 4-5 分钟（长于 Calu-1 的 2-3 分钟），镜下见细胞团间隙增大、部分散为单个细胞即可终止，用含血清培养基轻柔吹打（避免高速吹打破坏细胞），确保细胞团分散为 2-3 细胞小团（无需完全单细胞化，保留适度成团性）；
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- 生长速度适应：该细胞生长慢（35-45 小时倍增）为正常现象，无需频繁换液，传代后 48 小时内不换液，48 小时后按 3 天 1 次换液，换液时用移液管沿瓶壁缓慢加入新鲜培养基，避免冲击细胞团。
- 背景简介：Calu-3 细胞是从 25 岁白人男性肺腺癌患者胸水分离建系，患者曾用环磷酰胺、博来霉素、阿霉素化疗，核心特性及应用如下：①年轻化疗后背景：25 岁年轻患者 + 三种化疗药暴露史，是年轻肺癌化疗耐药机制研究的专属模型，可用于探索年轻患者化疗耐药的分子特征（如 ABC 转运蛋白高表达）；②功能特色：裸鼠成瘤能力强（高分化腺癌 I 级），可作为转染宿主（适合基因编辑实验），易成团特性模拟胸水转移灶细胞的体内聚集状态；③应用场景：广泛用于年轻肺癌胸水转移机制、化疗耐药（环磷酰胺等）、基因转染相关研究，同时可与 Calu-1 搭配开展 “不同年龄转移肺癌” 对比实验，探索年龄对转移特性的影响）
- STR 位点信息：Amelogenin：X（与男性性别标注及 XX 染色体矛盾，推测为 STR 检测时 Y 染色体缺失或染色体易位导致（背景提及 “若干染色体易位”），建议实验前通过 SRY 基因 PCR 验证性别，避免影响年轻男性相关实验（如雄激素对化疗耐药的影响））; CSF1PO：11，12；D13S317：12（纯合子，与 Calu-1 的未明确位点形成差异）；D16S539：12，14；D18S51：14，17（与 Calu-1 的未明确位点部分同源）；D19S433：12，13；D21S11：28，30；D2S1338：19（纯合子，独特位点）；D3S1358：15，18；D5S818：11（纯合子）；D7S820：10，11；D8S1179：11，15；FGA：25（纯合子，高片段长度等位基因）；TH01：6，9.3；TPOX：8（纯合子）；vWA：16，17；（STR 位点含纯合子、高片段长度等位基因，与 Calu-1、A549 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与 ATCC HTB-55 数据比对，确认细胞身份及肺腺癌特性，同时染色体易位特征可通过核型分析验证）
- 生物安全等级：1（与 Calu-1、A549、BEAS-2B 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，因易成团导致细胞脱落风险高，实验操作需在生物安全柜内进行，避免细胞气溶胶扩散）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需将细胞团吹散为单个细胞（胰酶短暂消化），确保总数达标；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 72 小时存活率≥75%（因慢贴壁，复苏后需 72 小时才能评估存活），且易成团、慢增殖特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 50%-60%（低于 Calu-1 的 60%-70%），标注 “易成团、慢贴壁，24h 内勿移动”，提醒用户遵循特殊培养要求）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞成团生长、贴壁过程及化疗耐药实验结果，保障与 Calu-1、A549 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; HTB-55，BCRJ; 0264（国际权威机构（ATCC）与地区性机构（BCRJ）双重保藏，细胞来源可追溯性强，年轻胸水转移特性、化疗后背景经过严格验证，与 Calu-1（多机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% MEM+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 MEM 培养基，与 Calu-1 的 McCoy’s 5A、A549 的 DMEM 显著不同；MEM 含低葡萄糖（1g/L）及适配胸水转移细胞的氨基酸配比，支持其易成团生长、慢增殖及化疗耐药相关蛋白合成；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中黏附因子减弱成团性或影响化疗耐药性；③1% PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞致瘤性及转染效率）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（与 Calu-1、A549 的常规 CO₂培养条件一致，湿度维持在 75%-80%（高于常规细胞），减少培养基蒸发导致细胞团干涸；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞团脱落；与其他肺癌细胞培养条件完全一致，仅需适配成团特性调整操作（如传代时轻柔吹打），便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配成团与慢贴壁特性：①选择对数生长期后期细胞（密度 70%，细胞团大小 5-10 个细胞），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 3 分钟（短于传代孵育时间），轻柔吹打使细胞团分散为 2-3 细胞小团，避免完全单细胞化；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 3×10⁶cells/mL（高于 Calu-1 的 2.5×10⁶cells/mL，补偿慢贴壁导致的复苏损失）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化，离心后用预热的 MEM 培养基重悬，接种后立即放入培养箱，48 小时内不移动，避免 DMSO 对细胞黏附相关蛋白（如整合素）的影响）
- 染色体：56~63，XX，有若干染色体易位（染色体数目高于正常二倍体（46 条），为中异倍体，XX 核型与男性性别标注矛盾（推测 Y 染色体缺失或易位），染色体易位为转移细胞典型特征；与 Calu-1（未明确）、A549（60~66,XY）形成染色体倍性与核型梯度；染色体易位可能影响化疗耐药基因（如 ABC 家族）表达，实验设计需关注易位对靶点检测的影响）
- 倍增时间：~35-45 hours（增殖速度中等偏慢，与 Calu-1 的 37 小时相近，慢于 A549 的 22 小时，对数生长期为接种后 48-96 小时，需每 36 小时镜检 1 次细胞密度，传代间隔 4-5 天；实验设计需适配中长周期，如化疗药处理时间建议 72-96 小时，转染实验需提前 48 小时接种细胞）
- 致瘤性：Yes, forms well differentiated grade I adenocarcinoma in nude mice.（明确的裸鼠高成瘤能力，成瘤病理类型为高分化腺癌 I 级（与 A549 的未明确分级一致），因慢增殖特性，成瘤周期略长（推测 3-4 周，与 Calu-1 相近）；建议接种密度为 1.5×10⁷cells / 只（高于 A549 的 1×10⁷cells / 只），接种后每 4 天测量肿瘤体积，成瘤后通过 HE 染色观察腺癌特有的腺管结构，同时检测肿瘤组织中化疗耐药基因表达，验证体内外耐药特性一致性）
- 抗原表达情况：Blood Type A; Rh+（血型抗原 A 型、Rh 阳性，与 Calu-1（A 型 Rh+）、SW620（A 型 Rh+）血型一致，可通过血型鉴定实验辅助验证细胞身份，避免与其他肺癌细胞交叉污染；血型抗原与肿瘤免疫相关，可用于年轻肺癌患者免疫逃逸机制研究，同时为细胞身份多重验证提供依据）
- 基因表达情况：Blood Type A; Rh+（重复标注血型抗原，核心基因表达需补充：①化疗耐药相关基因：推测高表达 ABC 转运蛋白（如 ABCB1、ABCG2），可通过 Western Blot 检测；②肺腺癌标志物：TTF-1、Napsin A 高表达（验证腺癌亚型）；③转染相关基因：转染效率较高（可作为转染宿主），适合开展 CRISPR/Cas9 基因编辑实验（如敲降耐药基因））（基因表达与年轻化疗后转移特性高度关联，可通过 RT-PCR 检测耐药基因、转移基因（如 CXCR4）的表达，分析其与胸水转移、化疗耐药的分子关联）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 MEM 培养基适应性培养、成团性验证（细胞团占比 40%-60%）及贴壁时间检测（24-48 小时），确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因慢贴壁，建议比 Calu-1（1 周货期）提前 2 天下单，保障 “不同年龄肺癌” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中用固定支架防止培养瓶晃动，减少细胞团脱落；到达后立即放入 5% CO₂培养箱，48 小时内不观察不换液，待细胞完全贴壁后再操作）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失
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