一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：CHO-K1-GFP-puro 中国仓鼠卵巢细胞 (GFP 标记)
种属来源：仓鼠
组织来源：卵巢
生长特性：贴壁生长
细胞形态：上皮细胞样
性别：雌
细胞代数：10 代以内（低传代范围，可更好维持绿色荧光蛋白（GFP）表达稳定性及仓鼠卵巢细胞特有的生物学特征）
生物安全等级：未明确标注，参考同类仓鼠细胞标准，建议按 1 级生物安全防护操作
药筛浓度：该细胞 puro（嘌呤霉素）药筛浓度为 4.0μg/ml，用于去除未转染细胞；培养过程中建议使用 1.0μg/ml 浓度 puro 维持，需注意其药筛浓度高于常规人类细胞，避免浓度混淆
背景与筛选验证
背景介绍
CHO-K1-GFP-puro 细胞稳定表达绿色荧光蛋白（GFP），性状稳定，可用作 GFP 荧光检测的阳性对照，也适用于蛋白表达、药物筛选等实验（如重组蛋白生产、药物毒性评估）。
该细胞保留 CHO-K1 细胞的核心特性 —— 易于转染、可高效表达外源蛋白，是生物制药领域重组蛋白生产、分子生物学实验的常用工具细胞株。
puro 药筛浓度说明
- 筛选阶段：puro 浓度为 4.0μg/ml，因仓鼠细胞对 puro 抗性较高，需更高浓度才能有效清除未转染细胞，确保 GFP 阳性细胞纯度；
- 维持阶段：puro 浓度降至 1.0μg/ml，既能稳定细胞的药物抗性与 GFP 表达，又可避免高浓度药物对细胞贴壁能力、蛋白表达功能的抑制。
细胞培养核心信息
基础参数
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装；
- 支原体检测：无（无支原体污染，避免干扰细胞增殖、GFP 荧光表达及蛋白表达 / 药物筛选实验结果，保障数据准确性）；
- 保藏机构：未明确标注，可通过随货产品说明书或供应商获取详细溯源信息，确保细胞株稳定性与 CHO-K1 细胞属性可靠。
培养与冻存
1. 培养基配方（关键成分不可省略）
DMEM 培养基 + 10% FBS（胎牛血清）+PS（青霉素 – 链霉素双抗）+10μg/ml 脯氨酸 + 1.0μg/ml puro（常规维持培养）；
注：脯氨酸为 CHO-K1 细胞生长必需氨基酸（该细胞自身无法合成），不可省略；药筛时需将 puro 浓度调整为 4.0μg/ml。
2. 培养条件
- 气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（常规 CO₂培养环境即可，无需特殊调整）；
- 操作注意事项：避免强光直射培养瓶，减少 GFP 光漂白，保障荧光观测效果；操作时动作轻柔，避免频繁移动影响细胞贴壁；待细胞密度达 80%-90% 时及时传代，CHO-K1 细胞增殖较快，过度密集易导致营养耗尽。
3. 冻存条件
- 冻存液：无血清冻存液；
- 操作要点：冻存前确保细胞处于对数生长期，保留 GFP 荧光活性与蛋白表达能力；按 1×10⁶-2×10⁶cells/ml 密度分装，梯度降温后存入液氮；复苏后优先观察细胞贴壁情况、上皮细胞样形态及 GFP 荧光强度，确认细胞功能正常。
货期与运输
- 细胞货期：现货，1 周左右；
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递；运输过程需尽量减少颠簸，降低细胞脱落概率，保障接收后细胞活性与蛋白表达功能稳定。
供应限制
仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用。
特别说明
以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；开展蛋白表达实验时，需确保培养基中脯氨酸浓度精准，其缺失会直接影响细胞生长与外源蛋白产量；利用 GFP 标记时，可通过荧光强度快速判断细胞活性与转染效率。
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