一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：COLO205 人结肠癌细胞（STR 鉴定正确）（与 Caco-2（原发结肠癌）同属结直肠癌细胞，区别于 SNU-216（胃癌）、GES-1（正常胃黏膜），核心特色为 “腹水转移来源 + 半贴半悬混合生长 + 短倍增时间”，是结直肠癌转移机制、化疗耐药（经 5 – 氟尿嘧啶预处理）研究的关键模型；可与 Caco-2（原发、慢增殖）、GES-1（正常）组成 “正常 – 原发结直肠癌 – 转移结直肠癌” 全病程体系，探索结直肠癌从原发到腹水转移的恶性进展机制，同时与 Caco-2 构建 “快慢增殖 + 不同生长模式” 的结直肠癌细胞对比体系，验证药物对不同特性结直肠癌细胞的敏感性差异）
- 细胞别称：Colo 205; CoLo 205; COLO-205; Colo-205; COLO.205; Colo205; COLO205; Co 205；人结肠癌细胞（别称以 “COLO” 为核心标识，大小写、空格及连接符差异为常见书写变体，统一标注便于实验记录检索；数字 “205” 与 Caco-2 的 “2” 形成编号区分，与 SNU-216（“SNU” 前缀）、MKN-45（“MKN” 前缀）形成消化道肿瘤细胞株的清晰区分，贴合 “结直肠癌细胞 + 编号” 的精准命名体系，避免与其他 “CO” 前缀细胞（如宫颈癌细胞 C-33A）混淆）
- 种属来源：人
- 性别年龄：男；70 岁（明确的老年男性背景，与 Caco-2（72 岁男）形成 “同龄男性” 结直肠癌对照，与 MKN-45（62 岁女）形成 “老年男 – 老年女” 性别对照，与 GES-1（9 个月胎儿）形成 “老年 – 胎儿” 极端年龄对照，为结直肠癌老年男性高发机制、年龄相关转移能力差异研究提供精准模型，同时因与 Caco-2 同龄，可排除年龄因素干扰，专注研究 “原发 – 转移” 状态对细胞特性的影响）
- 组织来源：结直肠腺癌，腹水转移（核心特色为结直肠腺癌的腹水转移灶来源，保留腹水转移癌特有的 “悬浮生长适应、腹腔微环境耐受、高侵袭转移潜能” 特性；区别于 Caco-2 的原发结肠癌组织、胃癌的淋巴结转移灶，可用于结直肠癌腹水转移机制研究（如肿瘤细胞穿透腹膜屏障、腹腔定植信号通路）、腹水型结直肠癌治疗方案优化（如腹腔灌注化疗），同时为临床结直肠癌腹水转移患者的诊断标志物筛选提供实验依据）
- 生长特性：半贴半悬（核心特色为混合生长模式，贴壁细胞占比 60%-70%，悬浮细胞呈单细胞或小团状（2-3 个细胞），与 Caco-2 的纯贴壁生长显著差异；对数生长期细胞增殖节奏快（贴合 25-30 小时短倍增时间特性），贴壁强度低于 Caco-2（原发结肠癌）、高于 SNU-216（胃癌）；悬浮细胞具备活性，传代时需同时收集贴壁与悬浮细胞，适合开展转移相关研究（如悬浮细胞与腹水转移潜能的关联）、化疗耐药实验（经 5 – 氟尿嘧啶预处理，耐药亚群可能富集于悬浮细胞））
- 细胞形态：上皮细胞样（贴壁细胞呈多边形，排列松散；悬浮细胞呈圆形或椭圆形，胞质透亮，核浆比增大，具备结直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；与 Caco-2（分化后呈柱状上皮、刷状缘结构）相比，无肠上皮分化特征，与 SNU-216（胃癌，规整上皮样）相比，形态更具异形性；可通过 “半贴半悬 + 上皮样” 形态快速判断细胞纯度，避免与其他亚型肿瘤细胞或杂细胞交叉污染，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “腹水转移特性、混合生长模式、短倍增时间、化疗耐药潜能” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如悬浮细胞比例下降、倍增时间延长、5 – 氟尿嘧啶耐药性减弱）
- 背景介绍：COLO205 细胞系 1957 年由 T.U.Sample 等从患有结肠癌的 70 岁男性白人腹水分离，患者取腹水前已用 5 – 氟尿嘧啶治疗 4-6 周，核心特性及应用如下：①转移与耐药特色：腹水转移来源使其成为结直肠癌腹腔转移研究的理想模型，可模拟腹腔内肿瘤细胞的生长、侵袭过程；经 5 – 氟尿嘧啶预处理的背景，使其天然具备一定耐药性，是研究结直肠癌氟尿嘧啶类药物耐药机制（如耐药基因表达、DNA 修复能力增强）的专属模型；②分子表型：角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性（验证上皮属性），表达 CEA（结直肠癌标志物）及 IL-10（免疫抑制因子，可能参与腹水转移的免疫逃逸），与 Caco-2（表达维甲酸结合蛋白）的分子表型差异显著，体现 “原发 – 转移” 状态的分子特征变化；③应用场景：广泛用于结直肠癌腹水转移机制研究（如腹膜侵袭、免疫逃逸）、氟尿嘧啶类药物耐药研究（如耐药逆转剂筛选）、“原发 – 转移” 对比实验，同时可与 Caco-2 搭配开展药物筛选，验证药物对原发与转移结直肠癌细胞的疗效差异。
- 生物安全等级：1（与 Caco-2、SNU-216、GES-1 的安全等级一致，低于 HGC-27（等级 2）、WPMY-1（等级 2），操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，便于实验室统一管理不同安全等级的消化道细胞，降低实验操作门槛）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（计数时需包含贴壁细胞与悬浮细胞（吹散后计数）；冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（因短倍增时间，复苏后 24 小时即可快速增殖），且混合生长比例、耐药特性无显著改变；T25 瓶发货时标注 “含悬浮细胞（正常）”，提醒用户收集上清细胞，避免活性细胞流失）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞混合生长平衡、增殖速度及耐药实验结果，保障与 Caco-2 平行实验的可靠性）
- 保藏机构：ATCC; CCL-222，BCRC; 60054，ECACC; 87061208（国际权威机构（ATCC、ECACC）与地区性机构（BCRC）多重保藏，细胞来源可追溯性强，腹水转移特性及耐药表型经过严格验证，与 Caco-2（多机构保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% RPMI-1640+10% FBS+1% PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，区别于 Caco-2 的 MEM（含 NEAA），与 SNU-216、MKN-45 的 RPMI-1640 配方一致；RPMI-1640 含丰富氨基酸及葡萄糖，适配腹水转移细胞的快速代谢需求，支持其短倍增时间及混合生长模式；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中黏附因子改变混合生长比例（如减少悬浮细胞）；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞耐药性及转移特性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致悬浮细胞团干涸；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落加剧；与 Caco-2、SNU-216、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配混合生长特性调整操作，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配混合生长与短倍增特性：①同时收集贴壁细胞（0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1.5-2.5 分钟，短于 Caco-2 的 3-4 分钟）与悬浮细胞，合并后轻柔吹散大团块（保留小团块，避免单细胞化导致耐药性丢失）；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿混合生长的细胞损失）；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，避免 DMSO 对耐药相关蛋白表达的影响）
- 倍增时间：~25-30 hours（增殖速度极快，是已梳理结直肠癌细胞中最快的（快于 Caco-2 的 60-80 小时，与胃癌细胞 Eca-109 的 28 小时相近），对数生长期为接种后 12-24 小时，需每天镜检 2 次细胞密度，待贴壁细胞达 70% 时立即传代（避免过度密集导致悬浮细胞比例异常升高）；实验设计需适配快节奏，如药物处理时间建议 24-48 小时，耐药实验需缩短药物作用周期，避免细胞过度增殖影响结果判断）
- 致瘤性：Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).（明确的裸鼠高成瘤能力，成瘤周期短（21 天内）、成瘤率 100%，且接种密度（1×10^7cells / 只）高于 Caco-2（2×10^6cells / 只），体现转移癌细胞更强的体内增殖能力；建议同时构建皮下成瘤与腹腔成瘤模型（模拟腹水转移），腹腔接种密度 5×10^6cells / 只，21 天后观察腹水形成及腹腔内肿瘤定植情况，更贴合临床腹水转移场景）
- 基因表达情况：carcinoembryonic antigen (CEA) 1.5 to 4.1 ng/10^6 cells cells/10 days（结直肠癌标志物，表达量明确，可通过 ELISA 法定量检测，与 Caco-2（CEA 低表达）对比，验证 “转移灶 CEA 高表达” 的临床特征）; keratin（上皮细胞标志物，免疫过氧化物酶染色阳性，验证细胞上皮属性）; interleukin 10 (IL-10, interleukin-10)（免疫抑制因子，可能通过抑制免疫细胞活性促进腹水转移，可用于结直肠癌免疫逃逸机制研究）（基因表达与腹水转移、免疫逃逸高度关联，可通过 RT-PCR 或 Western Blot 检测其表达水平，分析耐药处理（如 5 – 氟尿嘧啶）对基因表达的影响，探索耐药与转移的关联机制）
- 细胞货期：2 周左右（因需维持混合生长特性及耐药表型稳定性，库存细胞需经过耐药性验证（如 5 – 氟尿嘧啶 IC50 检测），制备周期长于 Caco-2 的 1 周；下单后需提前沟通实验需求，72 小时内启动细胞准备，确保 2 周内发货，可与 Caco-2 错峰下单，保障 “原发 – 转移” 实验的时间衔接）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，12 小时后观察细胞状态，因增殖快，24 小时内需判断是否传代）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及耐药特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 Caco-2、SNU-216 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；因具备化疗耐药背景，实验过程中需妥善处理含药物的培养基，避免环境污染，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①混合生长维护：传代时用移液管轻轻吸取上清（保留底部 1mL 旧培养基），收集悬浮细胞，1000rpm 离心 5 分钟后与贴壁消化细胞合并传代；若悬浮细胞比例超过 40%，需检查培养箱温度（波动需＜±0.5℃）及培养基批次，排除环境因素导致的贴壁能力下降；换液频率建议 1-2 天 1 次，换液时保留 1/4 旧培养基（含悬浮细胞生长所需的 IL-10 等因子）；②耐药实验设计：开展 5 – 氟尿嘧啶耐药实验时，设置 Caco-2（敏感对照）、COLO205（耐药模型），药物浓度梯度建议 0.1-100μM，处理 48 小时后通过 CCK-8 法检测 IC50 值，COLO205 的 IC50 应显著高于 Caco-2（通常为 2-5 倍）；可通过 Western Blot 检测耐药相关蛋白（如 ABC 转运蛋白、DNA 修复酶）表达，验证耐药机制；③“原发 – 转移” 对比实验：搭配 Caco-2 开展实验时，可：a. 检测转移相关基因（如 MMP9、CXCR4，COLO205 高表达）与分化相关基因（如维甲酸结合蛋白，Caco-2 高表达）的表达差异，分析 “原发 – 转移” 分子特征；b. 对比两株细胞的 Transwell 侵袭能力（COLO205 的穿膜细胞数应≥Caco-2 的 2 倍）及腹腔成瘤能力，验证转移灶的高恶性表型；c. 检测 CEA 分泌量，COLO205 的 CEA 表达量应高于 Caco-2，贴合临床转移癌标志物升高的特征；④细胞活性与表型监测：长期培养中，每 3 代检测混合生长比例（贴壁 60%-70%、悬浮 30%-40%）、倍增时间及 5 – 氟尿嘧啶 IC50 值，若发现比例异常、倍增时间偏离 25-30 小时或 IC50 下降，需立即更换低代数种子细胞；⑤腹水模型构建：腹腔成瘤模型需选择 6-8 周龄裸鼠，接种前用无菌 PBS 重悬 COLO205 细胞（5×10^6cells/0.5mL），腹腔注射后每周观察小鼠腹水情况（腹部肿胀程度），21 天后处死小鼠，收集腹水计数肿瘤细胞，分析腹腔转移效率。
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