一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：COLO320 HSR 人结直肠腺癌细胞（STR 鉴定正确）（与 COLO 320DM（同 “COLO320” 系列，Dukes 氏 C 型）、COLO205（腹水转移）同属结直肠癌细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “贴壁生长 + DMEM 培养基适配”，是 “COLO320” 系列中与 COLO 320DM（半贴半悬）形成生长模式对照的关键模型；可与 COLO 320DM（局部转移、半贴半悬）、COLO205（腹水转移、半贴半悬）、GES-1（正常）组成 “正常 – 同系列不同生长模式 – 不同转移阶段” 结直肠癌研究体系，探索细胞生长模式与转移潜能的关联机制，同时为结直肠癌 “COLO320” 系列细胞的特性对比研究提供基础模型）
- 细胞别称：COLO320 HSR ；人结直肠腺癌细胞（别称以 “COLO320 HSR” 为核心，“HSR” 后缀为关键标识，与 COLO 320DM 的 “DM” 后缀形成 “COLO320” 系列的清晰区分，避免同系列细胞混淆；“人结直肠腺癌细胞” 明确标注器官与病理亚型，贴合 “结直肠癌细胞 + 系列编号 + 特性后缀” 的精准命名体系，便于实验记录检索及文献关联，同时与其他 “COLO” 前缀细胞（如 COLO205）形成明确差异）
- 种属来源：人
- 性别年龄：未明确（虽无具体性别年龄信息，但可通过与 COLO 320DM（55 岁女）、COLO205（70 岁男）的对比实验，间接分析性别年龄因素对结直肠癌细胞生长模式（贴壁 / 悬浮）、药物敏感性的潜在影响；若实验涉及性别相关研究，建议通过 STR 位点 Amelogenin 基因检测补充确认性别，结合临床结直肠癌发病年龄特征（中老年高发）推测为中老年个体，确保实验设计的严谨性）
- 组织来源：结直肠（未明确具体病理分期及是否为转移灶，推测为结直肠腺癌组织，保留结直肠癌核心生物学特征；区别于 COLO 320DM 的 Dukes 氏 C 型（局部转移）、COLO205 的腹水转移灶，可用于结直肠癌基础生长特性研究（如贴壁细胞的黏附机制）、“COLO320” 系列细胞组织来源关联性分析，同时为结直肠癌细胞生长模式差异（贴壁 vs 悬浮）的分子机制研究提供对照模型）
- 生长特性：贴壁生长（核心特色为纯贴壁生长模式，与 COLO 320DM（半贴半悬）、COLO205（半贴半悬）形成显著差异；对数生长期细胞增殖节奏未明确标注，结合同类贴壁结直肠癌细胞特性推测为中等速度（慢于 COLO205 的 25-30 小时，快于 Caco-2 的 60-80 小时）；贴壁强度高于 COLO 320DM、COLO205，细胞间连接紧密，呈单层均匀分布，无悬浮细胞或成簇生长现象；传代操作可参考常规贴壁细胞流程，无需额外收集悬浮细胞，适合开展细胞黏附、贴壁相关信号通路（如整合素信号）研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中，具备结直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；与 COLO 320DM（圆形折光、非上皮样）形成鲜明对比，与 COLO205（上皮样但含悬浮细胞）相比，形态更规整且无悬浮细胞干扰；可通过 “纯上皮样 + 贴壁单层” 形态快速判断细胞纯度，避免与同系列的 COLO 320DM 混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）形成器官特异性区分（可通过结直肠特异性标志物如 CK20 检测进一步验证））
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “贴壁生长模式、上皮细胞样形态、结直肠癌核心特性” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如贴壁能力下降、形态向梭形转变、增殖节奏紊乱）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 48 小时存活率≥85%（纯贴壁细胞复苏存活率高于混合生长细胞），且上皮细胞样形态、贴壁生长特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%，确保到达后可直接用于实验或按常规贴壁细胞节奏传代）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞贴壁生长、形态及后续实验（如细胞黏附实验、药物筛选），保障与 COLO 320DM、COLO205 平行实验的可靠性）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS（核心特色：①采用 DMEM 培养基，与 COLO 320DM、COLO205 的 RPMI-1640 配方显著不同，含高糖（4.5g/L）及丰富氨基酸，适配纯贴壁结直肠癌细胞的代谢需求，支持其稳定贴壁及上皮形态维持；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中黏附抑制因子影响细胞贴壁能力；③未提及添加 PS（青霉素 – 链霉素），若需预防细菌污染，可按常规比例补充 1% PS（终浓度 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素），不影响细胞生长特性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内托盘需水平放置，避免培养基倾斜导致细胞分布不均；与 COLO 320DM、COLO205、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，无需特殊调整，便于多细胞株并行开展 “COLO320” 系列对比实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配纯贴壁上皮细胞特性：①选择对数生长期细胞（贴壁均匀、形态典型时），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2-3 分钟，镜下见细胞间隙增大、边缘收缩即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎，确保形成单细胞悬液；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 1.5×10⁶cells/mL；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 DMEM 培养基重悬，直接接种至培养瓶，减少低温对细胞贴壁能力的影响）
- 细胞货期：2 周左右（货期长于 COLO 320DM（1 周）、COLO205（2 周），推测因需严格维持纯贴壁生长特性及细胞活性，制备周期相对较长；库存细胞需经过 DMEM 培养基适应性培养、贴壁稳定性验证，确保核心特性无漂移；下单后需提前沟通实验时间安排，72 小时内启动细胞准备，可与 COLO 320DM 错峰下单，保障 “COLO320” 系列对比实验的时间衔接）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，24 小时后观察细胞贴壁情况，3 天内首次换液，确保细胞快速适应培养环境）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态，保障复苏活性） 顺丰快递（优先选择次日达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及贴壁特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 COLO 320DM、COLO205 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验过程中需遵守生物安全规范，实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①培养基与贴壁维护：严格使用 “90% DMEM+10% FBS” 配方，不可与 COLO 320DM、COLO205 的 RPMI-1640 混用，避免因培养基差异导致细胞贴壁能力下降；培养过程中保持培养箱温度、CO₂浓度稳定（CO₂浓度波动需＜±0.5%），防止环境因素影响细胞贴壁及形态；②传代与换液细节：传代时根据细胞增殖节奏调整传代间隔（建议每 3-4 天传代 1 次），传代比例 1:2-1:3，接种密度控制在 1.5×10⁵cells/T25，确保细胞接种后能均匀贴壁生长，避免密度过低导致贴壁不均；换液频率建议 2-3 天 1 次，换液时用移液管轻柔吸取旧培养基，避免直接冲击贴壁细胞；③“COLO320” 系列对比实验设计：搭配 COLO 320DM（半贴半悬、DM 后缀）开展实验时，可：a. 检测细胞黏附相关基因（如整合素 β1，贴壁细胞高表达）、EMT 相关基因（如 vimentin，悬浮细胞高表达）的表达差异，分析生长模式与分子表型的关联；b. 对比两株细胞的 Transwell 侵袭能力（COLO 320DM 因含悬浮细胞可能侵袭能力更强），验证生长模式与转移潜能的关系；c. 检测两株细胞对贴壁 / 悬浮特异性药物（如黏附抑制剂对 COLO320 HSR 的影响）的敏感性，探索生长模式靶向治疗的可能性；④细胞形态与活性监测：长期培养中，每 3 代观察细胞形态（是否保持上皮样、有无悬浮细胞出现），通过台盼蓝染色检测细胞活率（活率需≥90%），若发现形态异常或活率下降，需立即更换低代数种子细胞；⑤实验拓展应用：因纯贴壁特性，可作为 “COLO320” 系列的 “贴壁对照细胞”，用于验证悬浮生长相关实验结果的特异性，或开展结直肠癌细胞贴壁相关功能实验（如细胞划痕实验检测迁移能力、黏附实验检测基质结合能力），丰富系列细胞的研究场景。
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