一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：CW2 人结肠癌细胞（STR 鉴定正确）（与 COLO 320DM（激素分泌、半贴半悬）、COLO320 HSR（纯贴壁）同属结直肠癌细胞，区别于 GES-1（正常胃黏膜）、SNU-216（胃癌），核心特色为 “CEA 阳性 + 生长缓慢 + 纯贴壁上皮样”，是结直肠癌 CEA 相关机制、低增殖活性肿瘤研究的关键模型；可与 COLO 320DM（CEA 未明确、激素分泌）、COLO320 HSR（CEA 未明确、纯贴壁）、GES-1（正常）组成 “结直肠癌细胞 – 不同标志物 / 生长特性 + 正常对照” 体系，探索 CEA 表达与肿瘤增殖、转移的关联，同时因生长缓慢特性，适合开展长周期药物敏感性实验）
- 细胞别称：CW2；CW-2；人结肠癌细胞（别称以 “CW” 为核心前缀，与 “COLO” 系列（COLO 320DM、COLO320 HSR）形成结直肠癌细胞株的清晰区分，数字 “2” 便于实验记录检索；“CW2” 与 “CW-2” 为常见书写变体，统一标注避免混淆；“人结肠癌细胞” 明确标注器官与肿瘤属性，贴合 “结直肠癌细胞 + 字母 + 编号” 的精准命名体系，防止与其他 “CW” 前缀细胞（如宫颈癌细胞）混淆）
- 性别年龄：女；未明确（STR 位点 Amelogenin：X,X 明确女性性别，与 COLO 320DM（55 岁女）形成 “同性别不同增殖特性” 对照，与 COLO205（70 岁男）形成 “女性 – 男性” 性别对照；年龄未标注，结合临床结直肠癌高发年龄（50 岁以上）及生长缓慢特性，推测为中老年个体，可通过细胞衰老相关基因（如 p16）表达与 COLO 320DM（已知年龄）间接对比，为结直肠癌女性患者低增殖活性肿瘤机制研究提供模型）
- 组织来源：结肠（未明确具体病理分期及是否为转移灶，推测为原发结肠癌细胞，保留结直肠癌核心生物学特征，且 CEA 阳性（结直肠癌经典诊断标志物，临床阳性率约 70%）；区别于 COLO 320DM 的 Dukes 氏 C 型（局部转移）、COLO205 的腹水转移灶，可用于结直肠癌原发灶 CEA 表达调控机制研究、CEA 靶向诊断试剂验证，同时为临床 CEA 阳性结直肠癌患者的治疗方案优化提供实验依据）
- 生长特性：贴壁生长（核心特色为纯贴壁生长模式，与 COLO 320DM 的半贴半悬形成显著差异，与 COLO320 HSR 的纯贴壁一致但增殖节奏更慢；对数生长期细胞增殖缓慢（结合 “生长较慢” 特性，推测倍增时间约 72-96 小时，长于 COLO 320DM 的中等增殖、COLO320 HSR 的推测速度）；贴壁强度高于 COLO 320DM、与 COLO320 HSR 相近，细胞间连接紧密，呈单层均匀分布；传代需严格遵循 1:2 比例，接种密度不低于 50%（低于此密度易导致生长停滞），适合开展低增殖活性肿瘤的药物干预、细胞周期调控研究）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列规整呈铺路石样，胞质丰富，核浆比适中，具备结直肠腺癌细胞典型上皮形态特征；与 COLO 320DM（圆形折光、非上皮样）形成鲜明对比，与 COLO320 HSR（上皮样）形态相似但生长更稀疏；可通过 “规整上皮样 + 生长缓慢” 形态及增殖特性快速鉴别，避免与同器官其他细胞混淆，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞（上皮样）通过结直肠特异性标志物（如 CK20）进一步区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “CEA 阳性、生长缓慢、纯贴壁形态” 核心特征，建议传代次数不超过 12 代，防止长期传代导致特性漂移，如 CEA 表达下降、增殖速度异常加快、贴壁能力减弱）
- 背景介绍：CW-2 细胞来源于结肠癌，CEA 阳性，移植于裸鼠可成瘤，核心特性及应用如下：①CEA 特色：作为结直肠癌 CEA 阳性的经典模型，CEA 表达稳定，可用于 CEA 相关机制研究（如 CEA 对肿瘤细胞黏附、侵袭的影响）、CEA 靶向药物（如抗 CEA 单克隆抗体）筛选及疗效评估；②生长与成瘤特性：生长缓慢特性模拟临床部分低增殖活性结直肠癌（预后相对较好），裸鼠成瘤能力验证其体内肿瘤形成潜能（推测成瘤周期 4-6 周，长于 COLO 320DM 的 3-4 周）；③应用场景：广泛用于结直肠癌 CEA 功能研究、低增殖肿瘤药物敏感性实验、裸鼠成瘤模型构建，同时可与 COLO 320DM（激素分泌、高转移潜能）搭配开展 “CEA 阳性 / 阴性 + 低 / 高增殖” 对比实验，探索肿瘤标志物与恶性表型的关联。
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- 传代比例控制：因生长较慢，传代时严格采用 1:2 比例（常规贴壁细胞多为 1:3-1:5），避免过度稀释导致细胞密度过低；传代后 48 小时内不换液，让细胞充分贴壁适应，减少环境干扰；
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- 接种密度要求：接种密度需不低于 50%（T25 瓶接种细胞量≥5×10⁵cells），低于此密度会导致细胞生长停滞或凋亡；若需开展低密度实验（如克隆形成），需提前用条件培养基（CW2 细胞培养上清过滤后使用）预处理培养板，提升细胞存活率；
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- 生长监测频率：因增殖缓慢，需每 3-4 天镜检 1 次细胞密度，待密度达 80%-90% 时再传代（常规细胞 2-3 天传代 1 次），避免细胞过度密集导致营养耗尽。
- STR 位点信息：Amelogenin：X,X（明确女性性别，与性别推测一致，验证细胞身份，排除交叉污染，与 COLO 320DM（Amelogenin：X）共同确认女性结直肠癌细胞身份）; CSF1PO：11,14；D12S391：19,20（新增位点，区别于 COLO 320DM 无此位点）；D13S317：9,11；D16S539：9,9（纯合子）；D18S51：12,13；D19S433：12,14.2；D21S11：31,31（纯合子）；D2S1338：18,19；D3S1358：16,17；D5S818：11,13；D6S1043：16,16（纯合子）；D7S820：10,13；D8S1179：15,17；FGA：21,22；Penta E：11,14（新增位点，与 COLO 320DM 的 STR 图谱差异显著）；TH01：7,8；TPOX：8,12；vWA：18,21；（STR 位点含新增 D12S391、Penta E 位点及多个纯合子（如 D16S539：9,9），与 COLO 320DM、COLO320 HSR 的 STR 图谱差异明显，可通过图谱比对确认细胞身份，避免同器官细胞混淆）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏后 72 小时存活率≥75%（因生长缓慢，复苏后贴壁及增殖启动时间长于常规细胞），且 CEA 阳性特性、上皮样形态无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%（高于常规发货密度），标注 “需高接种密度传代”，提醒用户遵循 1:2 传代比例）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞缓慢增殖过程及 CEA 表达，保障与其他结直肠癌细胞平行实验的可靠性）
- 培养基：RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①与 COLO 320DM 的培养基配方一致，区别于 COLO320 HSR 的 DMEM；RPMI-1640 含丰富氨基酸，适配低增殖结直肠癌细胞的代谢需求，支持其 CEA 合成及稳定贴壁；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中增殖因子异常加快细胞生长，改变其低增殖特性；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞 CEA 表达及生长节奏）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内避免剧烈晃动，防止贴壁细胞脱落；与 COLO 320DM、COLO320 HSR、GES-1 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配低增殖特性调整传代间隔，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配低增殖与纯贴壁特性：①选择对数生长期后期细胞（密度 80%，此时细胞活性最佳），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 2.5-3.5 分钟，镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞，补偿低增殖导致的复苏后生长缓慢）；③冻存流程：4℃平衡 40 分钟→-20℃放置 3 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1.5 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，按 50% 接种密度接种，避免 DMSO 对细胞低增殖特性的影响）
- 细胞货期：现货，1 周左右（库存细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、CEA 表达检测（如免疫荧光染色）及生长节奏验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，因生长缓慢，建议提前与 COLO 320DM（1 周货期）同步下单，保障 “不同增殖特性” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，48 小时内不换液，待细胞完全适应后再观察密度）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥60%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次晨达服务，最大限度缩短运输时间，降低细胞活性损失及低增殖特性改变风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 COLO 320DM、COLO320 HSR 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①CEA 检测与应用：检测 CEA 时，可通过免疫荧光（一抗：anti-CEA 抗体，货号：ab19808）观察胞质表达，或 ELISA 法检测培养上清（培养 72 小时上清 CEA 含量更高，因生长缓慢需延长收集时间），设置 COLO 320DM（阴性对照）验证特异性；开展 CEA 靶向实验时，可使用抗 CEA 药物（如西妥昔单抗）处理，通过 CCK-8 法检测 72-96 小时细胞活性，适配其低增殖特性；②低增殖实验设计：药物处理时间建议延长至 96 小时（常规细胞 48-72 小时），设置 0、24、48、72、96 小时多个时间节点，更精准反映药物对低增殖肿瘤的影响；细胞周期实验需用 PI 染色后延长培养时间至 48 小时，确保细胞完成一个完整周期；③与其他结直肠癌细胞对比：搭配 COLO 320DM（高增殖、激素分泌）开展实验时，可：a. 检测 CEA 与激素分泌的关联（如 CEA 是否调控激素合成基因），分析标志物与功能表型的关系；b. 对比两株细胞的克隆形成能力（CW2 克隆形成率更低），验证增殖速度与克隆潜能的关联；c. 检测化疗药（如氟尿嘧啶）对两株细胞的 IC50 值（CW2 因生长慢可能 IC50 更高），为低增殖肿瘤化疗方案调整提供依据；④长期培养监测：每 5 代检测 CEA 表达量（免疫印迹法）、生长曲线（绘制 7 天增殖曲线）及 STR 图谱，若发现 CEA 表达下降、倍增时间缩短至 48 小时以内或 STR 位点改变，需立即更换低代数种子细胞；⑤接种密度验证：传代后 24 小时镜检细胞贴壁情况，确保贴壁密度均匀且不低于 50%，若密度不足，需补充接种同批次细胞，避免后续生长停滞。
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