一、细胞基本属性
- 细胞名称：Eca-109 人食管癌细胞（STR 鉴定正确）（与 WPMY-1（前列腺正常基质细胞）、VCaP（前列腺癌细胞）形成 “不同器官 – 正常 / 肿瘤” 跨系统对照，且为食管中段鳞癌（食管癌主要病理亚型，占比约 90%），是食管癌鳞癌发病机制、药物敏感性研究的经典模型；可与其他消化道肿瘤细胞（如胃癌 MGC-803、结直肠癌 HCT116）组成 “食管 – 胃 – 结直肠” 跨器官肿瘤体系，探索消化道肿瘤共性与特异性机制）
- 细胞别称：Eca109; Eca 109; EC-109; EC109；人食管癌细胞（别称以 “Eca/EC” 为核心前缀，“109” 为关键编号，与 WPMY-1（“WPMY” 前缀）、VCaP（“VCaP” 前缀）形成不同系统细胞的清晰区分；“食管癌细胞” 明确标注器官与病理类型，避免与 “EC” 前缀的其他癌细胞（如子宫内膜癌细胞）混淆，贴合 “病理亚型 + 编号” 的精准命名体系）
- 种属来源：人
- 性别年龄：未明确；结合 STR 位点 Amelogenin：X X 可判断为女性（未标注具体年龄，推测为中老年个体，与 VCaP（推测中老年男）、WPMY-1（54 岁男）形成 “女性食管癌 – 男性前列腺癌” 性别器官对照，为消化道与泌尿生殖系统肿瘤性别差异研究提供补充模型）
- 组织来源：食管（具体为食管中段鳞癌组织，食管中段是食管癌高发部位（占比约 50%），鳞癌是食管癌主导病理亚型，保留鳞癌特有的 “角化倾向、细胞间桥形成” 等形态特征；区别于食管腺癌（少见亚型），可用于食管鳞癌特异性研究，如鳞癌专属基因突变（如 TP53、NOTCH1）、放疗敏感性分析）
- 生长特性：贴壁生长（贴壁能力稳定，对数生长期细胞增殖速度快（贴合 28 小时短倍增时间特性），贴壁强度高于 VCaP（贴壁差）、WPMY-1（贴壁稳定），细胞间连接紧密但不形成簇状（区别于 LNCaP 的成簇生长）；传代操作可参考消化道肿瘤细胞通用流程，便于与其他肿瘤细胞同步开展平行实验）
- 细胞形态：上皮细胞样（细胞呈多边形，排列呈铺路石样，部分细胞可见鳞癌特有的角化颗粒（需通过 HE 染色或电镜观察），核浆比增大，核仁清晰；与 WPMY-1（成肌细胞样，长梭形）、VCaP（上皮样小细胞团）相比，典型上皮样形态及鳞癌特征是关键鉴别点，可通过形态观察初步判断细胞纯度及鳞癌表型，同时与 OS-RC-2 肾癌细胞形成器官特异性区分）
- 细胞代数：10 代以内（低代数细胞能更好保留 “鳞癌特性、短倍增时间、裸鼠成瘤能力” 核心特征，建议传代次数不超过 15 代，防止长期传代导致特性漂移，如角化颗粒减少、倍增时间延长、致瘤性减弱）
- 背景介绍：Eca-109 细胞株于 1973 年建系，来自人食管中段鳞癌组织，通过小块法原代培养建立，核心特性及应用如下：①建系与病理特色：建系历史悠久（近 50 年），生物学特性经长期验证稳定；食管中段鳞癌来源使其成为临床鳞癌研究的 “标准模型”，可用于食管癌发病部位特异性机制研究（如中段与上段 / 下段鳞癌的基因表达差异）；②成瘤与增殖特性：BALB/c 裸鼠移植成瘤率高，成瘤周期短（结合 28 小时倍增时间，推测裸鼠皮下成瘤 2-3 周可见明显肿瘤），适用于体内肿瘤模型构建、药物体内 efficacy 评估；短倍增时间特性适合开展快速药物筛选、细胞周期调控等实验；③应用场景：广泛用于食管鳞癌基础研究（如鳞癌分化调控、转移路径分析）、临床转化研究（如放疗 / 化疗联合用药优化）、跨器官肿瘤对比实验，同时可与 WPMY-1（正常基质细胞）搭配开展 “肿瘤 – 正常基质” 共培养，探索肿瘤微环境对食管鳞癌生长的调控作用。
- STR 位点信息：D19S433：13 13；D5S818：12 12；D21S11：30 30；D18S51：12 16；D6S1043：13 13；AMEL：X X（明确女性性别，补充原文性别标注缺失信息，可通过该位点验证细胞性别一致性，排除交叉污染）；D3S1358：17 17；D13S317：11 11；D7S820：8 12；D16S539：12 12；CSF1PO：10 10；Penta D：9 9；D2S441：11 13；vWA：16 17；D8S1179：13 14；TPOX：8 8；Penta E：16 16；TH01：9 9；D12S391：19 2（STR 位点含多个纯合子位点（如 D19S433：13/13、D5S818：12/12），是该细胞 STR 图谱的显著特征，与 WPMY-1、VCaP 的 STR 图谱差异显著，可通过图谱与保藏机构（AddexBio C0013001/37）数据比对，确认细胞身份及鳞癌特性）
- 生物安全等级：1（参考人源食管鳞癌细胞常规安全等级，操作时需遵循生物安全一级实验室防护规范，低于 WPMY-1、VCaP 的等级 2，便于实验室统一管理不同安全等级的细胞株）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或者 1mL 冻存管包装（冻存管含 10% 二甲基亚砜（DMSO）无血清冻存液，经检测复苏存活率稳定在 85% 以上，且鳞癌形态、短倍增时间特性无显著改变；T25 瓶发货时细胞密度达 70%-80%，确保到达后可直接用于实验或快速传代）
- 支原体检测：无（每批次细胞通过 PCR 法检测支原体（覆盖肺炎支原体、人型支原体、解脲支原体），结果为阴性，避免支原体污染影响细胞快速增殖及鳞癌表型，保障实验周期稳定性）
- 保藏机构：中国典型培养物保藏中心细胞库；AddexBio; C0013001/37（国内权威机构与国际商业机构双重保藏，细胞来源可追溯，鳞癌特性及生物学表型经过严格验证，与 WPMY-1（ATCC + 国内保藏）的保藏体系互补，便于国内外科研机构协作及文献结果复现）
- 培养基：90% RPMI-1640+10% FBS+PS（青霉素 – 链霉素）（核心特色：①采用 RPMI-1640 培养基，区别于 WPMY-1 的 DMEM（5% FBS）、VCaP 的 DMEM（10% FBS）；RPMI-1640 含有的氨基酸组成更适配食管鳞癌细胞的代谢需求，支持其快速增殖；②10% FBS 需选择低内毒素、批次间差异小的优质胎牛血清，避免血清中杂蛋白影响细胞鳞癌分化表型；③PS 终浓度为 100U/mL 青霉素、100μg/mL 链霉素，有效预防细菌污染，不影响细胞增殖速度及致瘤性）
- 培养条件：气相：95% 空气 + 5% 二氧化碳；温度：37℃（培养箱湿度维持在 70%-80%，定期更换水盘，防止培养基蒸发导致渗透压升高；培养箱内托盘需水平放置，避免培养基倾斜导致细胞分布不均；与 WPMY-1、VCaP、PC-3 等所有已梳理细胞的培养条件完全一致，仅需适配细胞自身增殖节奏调整传代间隔，便于多细胞株并行实验）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（冻存操作适配短倍增时间特性：①选择对数生长期细胞（接种后 24-36 小时），用 0.25% 胰酶 – EDTA 孵育 1.5-2.5 分钟（短于 WPMY-1 的 3-4 分钟），镜下见细胞间隙增大即可终止，轻柔吹打避免细胞破碎；②1000rpm 离心 5 分钟收集细胞，用预冷的无血清冻存液重悬，调整浓度至 2×10⁶cells/mL（高于常规细胞），提升复苏后细胞密度；③冻存流程：4℃平衡 30 分钟→-20℃放置 2 小时（程序降温盒）→-80℃过夜→液氮保存；复苏时 37℃水浴 1 分钟融化，离心后用预热的 RPMI-1640 培养基重悬，直接接种，减少对细胞快速增殖特性的影响）
- 倍增时间：~28 hours（增殖速度快，是已梳理细胞中倍增时间最短的细胞之一（快于 VCaP 的 53-144 小时、WPMY-1 的平缓增殖），对数生长期为接种后 12-36 小时，需每天镜检细胞密度，待密度达 80% 时立即传代（避免过度密集导致细胞老化）；实验设计中可利用该特性，缩短药物处理周期（如 48 小时），快速获取实验结果）
- 致瘤性：Yes, in nude mice.（明确的裸鼠成瘤能力，且适配 BALB/c 裸鼠（常用免疫缺陷小鼠品系），成瘤效率高、周期短；建议接种密度为 1×10⁶cells / 只（裸鼠皮下），接种后每周测量肿瘤体积（长 × 宽 ²/2），2-3 周即可绘制完整生长曲线，适合开展高通量体内药物筛选实验）
- 细胞货期：1 周左右（库存充足，所有现货细胞均经过 RPMI-1640 培养基适应性培养、倍增时间检测及鳞癌形态验证，确保核心特性稳定；下单后 48 小时内可安排发货，可与 WPMY-1、VCaP 同步下单，保障 “跨系统 – 正常 / 肿瘤” 平行实验的时间一致性）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，采用防震恒温泡沫箱，内置 2-8℃冰袋及温度监测卡，运输过程中避免剧烈颠簸，减少贴壁细胞脱落；到达后立即放入 37℃培养箱，因增殖速度快，24 小时后需观察细胞密度，必要时提前传代）/ 冻存发货（需加干冰运输费用，干冰用量按运输时长计算，国内运输一般配备 500g-1kg 干冰，确保到达时干冰剩余量≥50%，维持细胞冻存状态） 顺丰快递（优先选择次日达服务，缩短运输时间，降低细胞活性损失及鳞癌表型漂移风险）
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 WPMY-1、VCaP 等细胞限制条款一致，严禁用于临床治疗、细胞治疗、美容及其他非科研用途；实验废弃物需经 121℃高压灭菌 30 分钟处理，避免生物危害）
- 特别说明：以下细胞培养冻存处理仅供参考，具体操作步骤以随货产品说明书为主；该细胞实验操作需重点关注：①传代与换液：因倍增时间短，传代间隔建议 1-2 天，传代比例 1:3-1:4（高于 WPMY-1 的 1:2-1:3），接种密度控制在 1.5×10⁵cells/T25，适配快速增殖节奏；换液频率建议 2 天 1 次，避免培养基营养耗尽影响细胞生长；②鳞癌特性实验设计：开展鳞癌分化相关实验时，可通过 HE 染色观察角化颗粒、免疫荧光检测鳞癌标志物（如 CK14、p63），设置食管正常上皮细胞（如 Het-1A）作为对照，验证细胞鳞癌表型；研究放疗敏感性时，可采用不同剂量 X 射线照射细胞，通过克隆形成实验检测存活分数，对比其他消化道肿瘤细胞（如 MGC-803）的放疗响应差异；③与其他细胞的跨系统对比：搭配 WPMY-1（前列腺正常基质）、VCaP（前列腺癌）开展实验时，可：a. 检测肿瘤相关基因（如 TP53、MYC）在不同系统肿瘤 / 正常细胞中的表达差异，分析消化道与泌尿生殖系统肿瘤的分子机制共性；b. 对比广谱化疗药（如顺铂）对 Eca-109（食管癌）与 VCaP（前列腺癌）的 IC50 值，评估药物对不同器官肿瘤的特异性杀伤效果；④污染防控与表型监测：实验操作在超净工作台内进行，RPMI-1640 培养基单独存放，避免与 WPMY-1 的 DMEM、VCaP 的 DMEM 交叉使用，防止细胞交叉污染；长期培养中，每 3 代检测倍增时间、鳞癌标志物表达及 STR 图谱，若发现增殖速度减慢、角化颗粒减少，需立即更换低代数种子细胞，确保实验结果可靠。
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