一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
细胞名称：Expi293F 人胚肾细胞
种属来源：人
组织来源：肾（人胚肾来源，常用于重组蛋白表达等实验，具备高效转染特性）
生长特性：悬浮生长（全程维持悬浮状态，无贴壁能力，需在震荡培养条件下生长以避免聚团）
细胞形态：表皮细胞样（圆形或椭圆形，悬浮状态下细胞分散均匀，无明显粘连）
细胞代数：10 代以内
细胞规格：1×10⁶cells/T25 培养瓶或 1mL 冻存管
支原体检测：无
培养基：Expi293F 人胚肾细胞专用培养基（多为无血清配方，需严格按产品要求储存和使用，避免反复冻融）
培养条件：气相 95% 空气 + 5% 二氧化碳，温度 37℃，摇床转速 125-150rpm（悬浮细胞专用震荡培养条件，确保氧气充足）
冻存条件：无血清冻存液，液氮储存
细胞货期：现货，1 周左右
运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用）/ 冻存发货（需加干冰运输费用） 顺丰快递
供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
培养核心操作
1. 传代操作
- 观察细胞密度与活性，当密度达 3×10⁶-6×10⁶cells/mL、活率≥90%（台盼蓝染色检测）时，按 1:4-1:6 比例用新鲜专用培养基稀释传代（Expi293F 增殖速度快，需控制传代比例避免密度过高）。
- 无需胰酶消化，直接用移液器轻柔吹打细胞悬液 3-5 次，确保细胞分散均匀；传代后立即放入摇床培养，避免静置导致细胞沉底聚团。
2. 换液与密度监控
- 无需常规换液，通过传代稀释实现 “换液” 效果；若细胞密度未达传代标准但培养基颜色变黄（pH 值下降），可离心（1000rpm，5 分钟）弃部分上清，用新鲜培养基重悬至适宜密度（2×10⁶cells/mL 左右）。
- 每日监测细胞密度和活率，若活率低于 85% 或出现大量聚团（聚团直径＞100μm），需及时丢弃，避免影响后续实验。
3. 冻存操作
- 选取对数期（密度 4×10⁶-5×10⁶cells/mL、活率≥95%）的细胞悬液，1000rpm 离心 5 分钟，弃上清收集细胞沉淀。
- 用预冷的无血清冻存液重悬细胞至 1×10⁷cells/mL（Expi293F 冻存密度需高于普通悬浮细胞，提高复苏存活率），分装后按 “4℃静置 30 分钟→-20℃放置 2 小时→-80℃过夜→转入液氮” 的梯度降温。
4. 复苏操作
- 从液氮中取出冻存管，立即放入 37℃水浴速融（30 秒 – 1 分钟内完全融化，避免反复冻融），迅速将细胞悬液转移至含预热专用培养基的离心管（培养基体积为冻存液的 5 倍）。
- 1000rpm 离心 5 分钟弃上清，用新鲜专用培养基重悬细胞至 2×10⁶cells/mL，转入摇床培养；复苏后 24 小时内不监测密度，48 小时后正常监测，活率达标即可用于实验。
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