一、细胞基本属性（客服：小烽：18030101858）
- 细胞名称：hacat 人永生化角质形成细胞（STR 鉴定正确）
核心特色：62 岁男性黑色素瘤病灶外围正常皮肤来源 + 永生化特性 + 贴壁生长 + 上皮细胞样形态 + 90% DMEM+10% FBS+PS 培养基 + 72～88 条染色体 + 角蛋白 / 角化细胞交联外膜蛋白 / 中间丝相关蛋白阳性 + A 类使用权限 + 10 代以内代数，可与 HPT-8（人表皮饲养层细胞 / RPMI-1640 / 无污染）、293T（人胚肾工具细胞 / DMEM / 高转染效率）组成 “细胞类型（永生化角质形成细胞 – 表皮饲养层细胞 – 胚肾工具细胞）+ 功能属性（角质形成 / 永生化 – 饲养层支持 – 基因转染）+ 组织细分（皮肤病灶外围 – 表皮 – 肾）+ 遗传特征（72～88 条染色体 – 无描述 – 无描述）+ 培养基差异（DMEM-RPMI-1640-DMEM）” 对比体系，用于角质形成细胞机制、皮肤永生化细胞特性、表皮细胞功能细分及 A 类权限细胞应用研究。
- 细胞别称：hacat；人永生化角质形成细胞
标注 “62 岁男皮肤来源 + 永生化角质形成细胞 + DMEM+A 类权限 + 特异性蛋白阳性”，区别于 HPT-8 的 “表皮饲养层 + RPMI-1640 + 无永生化”、293T 的 “胚肾 + 高转染效率 + 无皮肤属性” 标识，凸显永生化及角质形成细胞功能，规避与非角质形成细胞的功能混淆。
- 种属来源：人（STR 鉴定正确，种属纯净，保障永生化角质形成细胞特有的贴壁能力、上皮形态、DMEM 培养基适应能力、永生化特性及特异性蛋白表达稳定，与 HPT-8、293T 的种属来源一致，无细胞污染问题，具 A 类使用权限合规性，适配皮肤细胞分化、角质形成机制及永生化细胞相关实验场景）
- 性别年龄：男；62 岁（老年男性阶段，填补 60-65 岁老年男性皮肤永生化细胞模型空白，与 HPT-8 的 “未明确年龄性别” 形成 “老年 – 无明确年龄” 对比，与 293T 的 “未明确性别” 形成 “男 – 无明确性别” 性别差异，适配老年皮肤相关疾病基础研究，尤其适合永生化机制与皮肤老化关联实验，排除年龄性别混杂因素）
- 组织来源：皮肤（黑色素瘤病灶外围正常皮肤，与 HPT-8 的 “表皮” 同属皮肤组织但来源细分不同，区别于 293T 的 “肾”，保留皮肤正常细胞特性但具永生化改造，核心优势为表达角质形成细胞特异性蛋白（角蛋白等），无 HPT-8 的饲养层支持功能或 293T 的工具细胞属性，适配皮肤角质形成、表皮屏障功能等细分实验（如角质化过程研究））
- 生长特性：贴壁生长（核心生长特性与 HPT-8、293T 一致，贴壁稳定性优于 293T 的 “贴壁不牢”）
① 倍增时间未明确标注，参考同类永生化角质形成细胞，推测 36-48 小时（慢于 293T 的 24-30 小时，与 HPT-8 推测的 48-72 小时接近，适配永生化皮肤细胞增殖节奏，兼顾永生化效率与正常细胞特性）；② 需胰酶消化（0.25% 胰酶，37℃孵育 3-4 分钟，时间长于 293T 的 2-3 分钟，短于 HPT-8 的 3-5 分钟），细胞汇合度达 75%-85% 时按 1:3 传代（因永生化特性，增殖稳定性高于原代细胞，传代密度介于 HPT-8 与 293T 之间）；传代后 24 小时内贴壁稳定，可形成具角质形成细胞特征的单层排列，贴壁均匀度与 HPT-8 相当，优于 293T 的贴壁不牢特性。
- 细胞形态：上皮细胞样（呈多边形，胞质含角质相关颗粒，排列呈 “铺路石” 样且具轻微分层倾向，与 HPT-8 的 “上皮细胞样（单层致密）”、293T 的 “上皮细胞样（均一无颗粒）” 形态相比，更具角质形成细胞特有的颗粒感及分层潜力，可通过 “特异性蛋白阳性 + 皮肤来源 + 永生化” 快速鉴别，适配角质形成细胞形态学观察实验）
- 细胞代数：10 代以内（避免贴壁能力下降、上皮形态漂移、永生化特性丢失及特异性蛋白表达异常，与 HPT-8、293T 的代数要求一致；因涉及永生化稳定性及 A 类权限规范，代数控制更严格，需每 4 代通过免疫荧光检测角蛋白表达（阳性率≥90%），确保核心功能稳定）
- 背景简介：源自 62 岁男性黑色素瘤病灶外围正常皮肤的永生化角质形成细胞系，STR 鉴定正确，表达角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白及中间丝相关蛋白（角质形成细胞标志物），具 72～88 条染色体（异倍体），无致瘤性相关描述，A 类使用权限适配常规科研场景；核心优势为永生化改造保留正常角质形成功能，是研究皮肤角质化机制、表皮屏障功能、永生化细胞增殖调控及老年皮肤细胞特性的理想模型；可与 HPT-8 对比探索皮肤细胞功能细分（角质形成 vs 饲养层）差异，或与 293T 构建 “皮肤永生化 – 胚肾工具” 细胞功能对比模型，评估不同组织来源细胞对药物的响应差异。
- STR 位点信息：Amelogenin：X（提示检测偏差或男性位点缺失，需结合性别标注 “男” 综合判断，区别于 HPT-8 的未明确 STR 位点、293T 的 “Amelogenin:X”）；CSF1PO：9，11；D13S317：10，12；D16S539：9，12；D18S51：12；D19S433：13，14；D21S11：30.2；D2S1338：17，25；D3S1358：16；D5S818：12；D7S820：9，11；D8S1179：14；FGA：24；TH01：9.3；TPOX：11，12；vWA：16，17，OL（含皮肤永生化细胞特征性 STR 位点，可与 HPT-8、293T 图谱对比确认身份，验证永生化改造未导致核心 STR 位点丢失）
- 细胞规格：1×10⁶cells/T25 贴壁培养瓶或 1mL 冻存管，复苏后存活率≥85%（与 HPT-8、293T 的存活率标准一致，永生化细胞复苏适应快，48 小时内可恢复角质形成细胞特有的颗粒形态，需同步验证角蛋白表达（免疫荧光阳性率≥85%），确保永生化及细胞属性稳定）
- 支原体检测：阴性（明确排除微生物污染，与 HPT-8 的 “无支原体”、293T 的 “无支原体” 标准一致；因具 A 类使用权限，微生物检测频次需高于普通细胞，建议每 3 代复测，避免污染影响永生化特性及特异性蛋白表达）
- 保藏机构：中国典型培养物保藏中心细胞库（国内权威机构保藏，永生化特性及 STR 鉴定结果经官方验证，与 HPT-8 的未明确保藏、293T 的国际 + 国内保藏形成互补，可追溯性强，适配 A 类权限细胞的来源合规性要求）
- 培养基：90% DMEM+10% FBS+PS（核心配方差异，基础培养基为 DMEM（高糖型，适配永生化细胞能量需求），区别于 HPT-8 的 “RPMI-1640”，与 293T 的 “DMEM” 一致（可共用基础培养基，降低成本）；血清选择低内毒素胎牛血清（≤10EU/mL），避免影响角质形成相关蛋白合成，开封后 2 周内用完，DMEM 培养基无需避光，操作便捷）
- 培养条件：95% 空气 + 5% 二氧化碳，37℃，湿度 70%-80%（与 HPT-8、293T 培养环境参数一致，无需额外调整；永生化细胞对温度波动敏感，培养箱控温波动需≤±0.2℃，防止影响永生化基因表达；因增殖节奏稳定，每 48 小时更换 1 次培养基即可，无需像 293T 那样频繁换液）
- 冻存条件：无血清冻存液，液氮储存（2×10⁶cells/mL，与 HPT-8 的密度一致，低于 293T 的 3×10⁶cells/mL；4℃平衡 30 分钟→-20℃ 2 小时→-80℃过夜→液氮储存；冻存前需确保细胞处于对数生长期（永生化功能最佳期），添加 10% FBS 可提升复苏后特异性蛋白表达稳定性，避免冻存老化细胞导致永生化特性下降）
- 染色体与蛋白特征：① 染色体：72～88 条（异倍体，每 5 代通过核型分析验证，区别于 HPT-8、293T 的未明确核型，适配永生化细胞遗传学研究）；② 蛋白表达：角蛋白、角化细胞交联外膜蛋白、中间丝相关蛋白阳性（可通过 Western Blot 或免疫荧光验证，阳性条带 / 荧光强度≥+++，是角质形成细胞身份的核心标志物，区别于 HPT-8 的饲养层功能蛋白、293T 的工具细胞相关蛋白）
- 运输方式：复苏发货（T25 瓶免运输费用，因贴壁稳定，运输脱落风险低于 293T，无需特殊运输防护）；冻存发货（需加干冰运输费用），顺丰快递
- 供应限制：仅限于科学研究，绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用（与 HPT-8、293T 限制条款一致；额外需强调：虽为病灶外围正常皮肤来源且具 A 类权限，但不可用于临床治疗或人体干预实验，严禁超权限用于非科研目的研究）
- 特别说明：① 权限与验证：使用前需确认 A 类权限合规性（如实验室资质、使用备案），首次培养通过免疫荧光检测角蛋白（如 CK14）、角化细胞交联外膜蛋白表达（阳性率≥90%），核型分析验证染色体数目（72～88 条占比≥80%），确保细胞身份及永生化属性稳定；② 培养注意：DMEM 需选择高糖型（葡萄糖 4.5g/L），不可用低糖 DMEM 替代（会抑制角质形成相关蛋白合成）；传代时避免过度消化（防止破坏胞质角质颗粒，影响蛋白检测结果），消化后用含血清培养基终止反应，减少对永生化细胞的损伤；③ 实验适配：适合皮肤角质形成机制研究、永生化细胞增殖调控实验、表皮屏障功能模拟（如单层细胞屏障实验）、皮肤药物毒性筛选（作为正常永生化皮肤细胞对照）；可与 HPT-8 同步开展 “角质形成细胞 – 饲养层细胞” 共培养，探索皮肤细胞间相互作用，或与 293T 对比研究永生化细胞与工具细胞的代谢差异，也可作为皮肤永生化模型优化角质形成相关实验条件（如诱导分化培养基配方）。
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